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1、1基因工程专题基因工程专题【考试说明对基因工程部分的要求】基因工程(1)基因工程的诞生 (2)基因工程的原理及技 术 (3)基因工程的应用 (4)蛋白质工程 1.下列叙述符合基因工程概念的是 A. B 淋巴细胞与肿瘤细胞融合,杂交瘤细胞中含有 B 淋巴细胞中的抗体基因 B. 将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌,获得能产生人干扰素的菌株 C. 用紫外线照射青霉菌,使其 DNA 发生改变,通过筛选获得青霉素高产菌株 D. 自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其 DNA 整合到细菌 DNA 上 2.在已知某小片段基因碱基序列的情况下,获得该基因的最佳方法是 A.用 mRNA 为模板逆转录合成
2、 DNA B.以 4 种脱氧核苷酸为原料人工合成 C.将供体 DNA 片段转入受体细胞中,再进一步筛选 D.由蛋白质的氨基酸序列推测 mRNA 获取目的基因的方法有哪些?如何操作?适用对象? 3天然的玫瑰没有蓝色花,这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因 B,而开蓝色花的矮牵牛中存在序列 已知的基因 B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰,下列操作正确的是 A提取矮牵牛蓝色花的 mRNA,经逆转录获得互补的 DNA,再扩增基因 B B利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因 B C利用 DNA 聚合酶将基因 B 与质粒连接后导入玫瑰细胞 D将基因 B 直接导入大肠杆菌,然后感染并转入玫瑰细
3、胞 4. 下列关于转基因生物安全性的叙述,错误的是 A. 种植转基因作物应与传统农业种植区隔离 B. 转基因作物被动物食用后,目的基因会转入动物体细胞中 C. 种植转基因植物有可能因基因扩散而影响野生植物的遗传多样性 D. 转基因植物的目的基因可能转入根系微生物 5.下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图 l、图 2 中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回 答下列问题:2一个图 1 所示的质粒分子经 Sma切割前后,分别含有 和 个游离的磷酸基团。 若对图中质粒进行改造,插入的 Sma酶切位点越多,质粒的热稳定性越 。 用图中的质粒和外源 DNA 构建重组质粒,不能使用 Sma切割,原因
4、是 。 与只使用 EcoR相比较,使用 BamH和 Hind两种限制酶同时处理质粒、外源 DNA 的优点在于可以防 止 为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入 酶。 重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。 为了从 cDNA 文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体, 然后在的培养基中培养,以完成目的基因表达 的初步检测。 6请回答基因工程方面的有关问题: 关于基因工程的工具 构建重组 DNA 分子所用的限制性内切酶作用于图 1 中的处,DNA 连接酶作用于图 1 中的_处。 (填序号)用限制酶 EcoRV、Mbol 单独或联合切割同一
5、种质粒,得到的 DNA 片段长度如下图 2(1 kb 即 1000 个碱 基对) ,请画出质粒上 EcoRV、Mbol 的切割位点,并标出酶切位点之间的距离。利用 PCR 技术扩增目的基因3PCR 过程需要_酶,作用于图 3_步骤。 如果延伸时间设置较长,在第 轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的 DNA 片段,复制 方式为_。如图 4 所示,箭头代表子代 DNA 的延伸方向,我们可以根据已知 DNA 序列复制未知 DNA 序列,TDNA 片段 基因序列已知,设计 4 段 TDNA 的引物 A、B、C、D,引物的作用是_,如果利用 PCR 技术扩增 TDNA 片段,我们可选择_作为引物(
6、填字母) ;如果扩增未知基因可选择_作为引 物(填字母) 。 设计引物是 PCR 技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如 下图 5) ,请分别说明理由。 第 1 组: ; 第 2 组: PCR 反应体系中含有热稳定 DNA 聚合酶,下图 6 的表达式不能正确反映 DNA 聚合酶的功能,这是因为 。 获得转基因植株4在构建重组质粒时,应选用图中 限制酶对 进行切割,以保证重组 DNA 序列的唯一性。 为筛选出导入了重组质粒的农杆菌,应在培养基中加入 。 将转入抗旱基因的水稻细胞培育成完整的植株需要用 技术,该技术包括图 7 中 、过程。 7.黄曲霉毒素 B1
7、(AFB1)存在于被黄曲霉菌污染的饲料中,它可以通过食物链进入动物体内并蓄积,引 起癌变。某些微生物能表达 AFB1解毒酶将该酶添加在饲料中可以降解 AFB1,清除其毒性。 AFB1属于 类致癌因子。 AFB1能结合在 DNA 的 G 上使该位点受损伤变为 G ,在 DNA 复制中,G 会与 A 配对。现有受损伤部位的序列为,经两次复制后,该序列突变为 。 下图为采用基因工程技术生产 AFB1解毒酶的流程图据图回答问题: 在甲、乙条件下培养含 AFB1解毒酶基因的菌株经测定:甲菌液细胞密度小、细胞含解毒酶;乙菌液 细胞密度大、细胞不含解毒酶。过程 应选择 菌液的细胞提取总 RNA ,理由是 _。 过程中,根据图示,可以看出与引物结合的模板是 _。 检测酵母菌工程菌是否合成了 AFB1解毒酶,应采用方法。 选取不含 AFB1的饲料和某种实验动物为材料,探究该 AFB1解毒酶在饲料中的解毒效果。实验设计及测 定结果见下表,据表回答问题: 本实验的两个自变量,分别为 。 本实验中反映 AFB1解毒酶的解毒效果的对照组是 。 经测定,某污染饲料中 AFB1含量为 100g/kg ,则每千克饲料应添加 克 AFB1解毒酶解毒 效果最好,同时节约了成本。 采用蛋白质工程进一步改造该酶的基本途径是:从提高酶的活性出发,设计预期的蛋白质结构,推测 应有的氨基酸序列,找到相对应的 。