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1、1基因工程专题基因工程专题【考试说明对基因工程部分的要求】基因工程（1）基因工程的诞生 （2）基因工程的原理及技 术 （3）基因工程的应用 （4）蛋白质工程 1.下列叙述符合基因工程概念的是 A. B 淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有 B 淋巴细胞中的抗体基因 B. 将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株 C. 用紫外线照射青霉菌，使其 DNA 发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株 D. 自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其 DNA 整合到细菌 DNA 上 2.在已知某小片段基因碱基序列的情况下，获得该基因的最佳方法是 A.用 mRNA 为模板逆转录合成
2、 DNA B.以 4 种脱氧核苷酸为原料人工合成 C.将供体 DNA 片段转入受体细胞中，再进一步筛选 D.由蛋白质的氨基酸序列推测 mRNA 获取目的基因的方法有哪些？如何操作？适用对象？ 3天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因 B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列 已知的基因 B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是 A提取矮牵牛蓝色花的 mRNA，经逆转录获得互补的 DNA，再扩增基因 B B利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因 B C利用 DNA 聚合酶将基因 B 与质粒连接后导入玫瑰细胞 D将基因 B 直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细
3、胞 4. 下列关于转基因生物安全性的叙述，错误的是 A. 种植转基因作物应与传统农业种植区隔离 B. 转基因作物被动物食用后，目的基因会转入动物体细胞中 C. 种植转基因植物有可能因基因扩散而影响野生植物的遗传多样性 D. 转基因植物的目的基因可能转入根系微生物 5.下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图 l、图 2 中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回 答下列问题：2一个图 1 所示的质粒分子经 Sma切割前后，分别含有 和 个游离的磷酸基团。 若对图中质粒进行改造，插入的 Sma酶切位点越多，质粒的热稳定性越 。 用图中的质粒和外源 DNA 构建重组质粒，不能使用 Sma切割，原因
4、是 。 与只使用 EcoR相比较，使用 BamH和 Hind两种限制酶同时处理质粒、外源 DNA 的优点在于可以防 止 为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 酶。 重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。 为了从 cDNA 文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体， 然后在的培养基中培养，以完成目的基因表达 的初步检测。 6请回答基因工程方面的有关问题： 关于基因工程的工具 构建重组 DNA 分子所用的限制性内切酶作用于图 1 中的处，DNA 连接酶作用于图 1 中的_处。 （填序号）用限制酶 EcoRV、Mbol 单独或联合切割同一
5、种质粒，得到的 DNA 片段长度如下图 2（1 kb 即 1000 个碱 基对） ，请画出质粒上 EcoRV、Mbol 的切割位点，并标出酶切位点之间的距离。利用 PCR 技术扩增目的基因3PCR 过程需要_酶，作用于图 3_步骤。 如果延伸时间设置较长，在第 轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的 DNA 片段，复制 方式为_。如图 4 所示，箭头代表子代 DNA 的延伸方向，我们可以根据已知 DNA 序列复制未知 DNA 序列，TDNA 片段 基因序列已知，设计 4 段 TDNA 的引物 A、B、C、D，引物的作用是_，如果利用 PCR 技术扩增 TDNA 片段，我们可选择_作为引物（
6、填字母） ；如果扩增未知基因可选择_作为引 物（填字母） 。 设计引物是 PCR 技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如 下图 5） ，请分别说明理由。 第 1 组： ； 第 2 组： PCR 反应体系中含有热稳定 DNA 聚合酶，下图 6 的表达式不能正确反映 DNA 聚合酶的功能，这是因为 。 获得转基因植株4在构建重组质粒时，应选用图中 限制酶对 进行切割，以保证重组 DNA 序列的唯一性。 为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，应在培养基中加入 。 将转入抗旱基因的水稻细胞培育成完整的植株需要用 技术，该技术包括图 7 中 、过程。 7.黄曲霉毒素 B1
7、（AFB1）存在于被黄曲霉菌污染的饲料中，它可以通过食物链进入动物体内并蓄积，引 起癌变。某些微生物能表达 AFB1解毒酶将该酶添加在饲料中可以降解 AFB1，清除其毒性。 AFB1属于 类致癌因子。 AFB1能结合在 DNA 的 G 上使该位点受损伤变为 G ，在 DNA 复制中，G 会与 A 配对。现有受损伤部位的序列为，经两次复制后，该序列突变为 。 下图为采用基因工程技术生产 AFB1解毒酶的流程图据图回答问题： 在甲、乙条件下培养含 AFB1解毒酶基因的菌株经测定：甲菌液细胞密度小、细胞含解毒酶；乙菌液 细胞密度大、细胞不含解毒酶。过程 应选择 菌液的细胞提取总 RNA ，理由是 _。 过程中，根据图示，可以看出与引物结合的模板是 _。 检测酵母菌工程菌是否合成了 AFB1解毒酶，应采用方法。 选取不含 AFB1的饲料和某种实验动物为材料，探究该 AFB1解毒酶在饲料中的解毒效果。实验设计及测 定结果见下表，据表回答问题： 本实验的两个自变量，分别为 。 本实验中反映 AFB1解毒酶的解毒效果的对照组是 。 经测定，某污染饲料中 AFB1含量为 100g/kg ，则每千克饲料应添加 克 AFB1解毒酶解毒 效果最好，同时节约了成本。 采用蛋白质工程进一步改造该酶的基本途径是：从提高酶的活性出发，设计预期的蛋白质结构，推测 应有的氨基酸序列，找到相对应的 。
