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1、胸腹水及其它体液形态学检查胸腹水及其它体液形态学检查 周道银周道银 上海第二军医大学长海医院上海第二军医大学长海医院 一、体液细胞形态学检查概述一、体液细胞形态学检查概述 二、浆膜腔积液常规形态学检查二、浆膜腔积液常规形态学检查 （胸水、腹水、心包腔积液）（胸水、腹水、心包腔积液） 三、胸水、腹水、心包积液间皮细胞、巨噬三、胸水、腹水、心包积液间皮细胞、巨噬 细胞和浆细胞的形态鉴别（瑞吉染色）细胞和浆细胞的形态鉴别（瑞吉染色） 四、脑脊液常规形态学检查四、脑脊液常规形态学检查 五、粪便常规形态学检查五、粪便常规形态学检查 六、支气管肺泡灌洗液形态学检查六、支气管肺泡灌洗液形态学检查 内容一：内
2、容一： 内容二：内容二：病例讨论病例讨论 体液细胞形态学检查：体液细胞形态学检查： 是指除血液以外的各种体液，如是指除血液以外的各种体液，如胸水、腹水、心包液、胸水、腹水、心包液、关节液、脑脊液、支气管肺泡灌洗液关节液、脑脊液、支气管肺泡灌洗液等，在完成等，在完成一般性常规一般性常规检验检验的基础上，将沉渣制成涂片，经瑞吉染色后，在显微镜的基础上，将沉渣制成涂片，经瑞吉染色后，在显微镜下进行细胞下进行细胞形态学形态学观察，作出检验诊断（报告细胞分类、肿观察，作出检验诊断（报告细胞分类、肿瘤细胞、狼疮细胞、噬菌细胞、真菌、寄生虫和结晶等）。瘤细胞、狼疮细胞、噬菌细胞、真菌、寄生虫和结晶等）。该该
3、检查是集基础理论、实验方法、涂片染色、临床知识、实检查是集基础理论、实验方法、涂片染色、临床知识、实践经验于一体的综合技术；践经验于一体的综合技术；可称为可称为体液常规细胞形态学检查体液常规细胞形态学检查。其目的是提高检验质量，提升常规检验应用价值。其目的是提高检验质量，提升常规检验应用价值。 检验诊断报告具有检验诊断报告具有参考诊断参考诊断、鉴别诊断鉴别诊断、确定诊断确定诊断价值。价值。 一、体液细胞形态学检查概述一、体液细胞形态学检查概述 形形 态态 学学 核核 心心 价价 值值 形态学检验是检验学科最基本的技能，形态学检验是检验学科最基本的技能，是临床实验室诊断是临床实验室诊断 最简便、
4、最特异和最经济实用的常规检验方法最简便、最特异和最经济实用的常规检验方法 (李艳、丛玉隆.加强形态学临床检验专家座谈会纪要，中华检验医学杂志2005， 28(2),147 ) 形态学检验是某些疾病诊断的形态学检验是某些疾病诊断的“金指标金指标”，是判断疾病疗是判断疾病疗 效和预后的重要依据。效和预后的重要依据。 （丛玉隆、秦小玲.既要发展现代技术 也要继承经典方法,中华检验医学杂志 2005,28(2),129 ） 形态学检验是常规检验的重要内容，形态学检验是常规检验的重要内容，但由于自动化仪器的但由于自动化仪器的 应用，检验人员，尤其是青年技术人员的形态学技能越渐应用，检验人员，尤其是青年技
5、术人员的形态学技能越渐 弱化，现在特别需要加强形态学人才培养，使这一对某些弱化，现在特别需要加强形态学人才培养，使这一对某些 疾病具有重要诊断价值的经典技术传承光大。疾病具有重要诊断价值的经典技术传承光大。 体液形态学检查的法规依据体液形态学检查的法规依据 医学实验室质量和能力专用要求医学实验室质量和能力专用要求 （GB/T 22576GB/T 22576- -2008/ISO15189:20072008/ISO15189:2007） 医疗机构临床实验室管理办法医疗机构临床实验室管理办法 ( (卫生部卫生部 卫医发卫医发200620067373号号) ) 医疗机构临床检验项目目录医疗机构临床检
6、验项目目录（卫生部（卫生部 卫医发卫医发20072007180180号）号） 胸腹水常规检查胸腹水常规检查 包括外观、比重、粘蛋白定性、细胞计数、细胞分类包括外观、比重、粘蛋白定性、细胞计数、细胞分类 胸腹水细胞学检查胸腹水细胞学检查 包括浓缩查肿瘤细胞包括浓缩查肿瘤细胞 各种穿刺液及分泌物细胞学检查各种穿刺液及分泌物细胞学检查 包括嗜酸、肥大细胞、肿瘤细胞等包括嗜酸、肥大细胞、肿瘤细胞等 全国临床检验操作规程全国临床检验操作规程（卫生部（卫生部 第三版第三版 P315P315- -317317） 胸腹水常规检查及分类胸腹水常规检查及分类: :穿刺液应在抽出后立即离心，用沉淀物涂片穿刺液应在抽
7、出后立即离心，用沉淀物涂片3 3- -5 5张，张，以瑞以瑞氏或瑞氏氏或瑞氏- -吉姆萨复合染色法进行分类吉姆萨复合染色法进行分类，同时用多张涂片，同时用多张涂片寻找肿瘤细胞寻找肿瘤细胞也甚有效。也甚有效。 体液检验能否筛查肿瘤细胞体液检验能否筛查肿瘤细胞 全国临床检验操作规程全国临床检验操作规程第第3版版： P313 P313 脑脊液染色分类脑脊液染色分类:进行瑞氏染色后油镜分类，如见有不能分类的细胞，应 请示上级主管，并另行描述报告，如脑膜白血病或肿瘤细胞等。 P316 P316 浆膜腔积液检查浆膜腔积液检查：穿刺液用沉淀物涂片35张，以瑞氏或瑞氏-吉姆 萨复合染色法进行分类，同时用多张涂
8、片寻找肿瘤细胞也甚有效。 P324P324- -329 329 阴道脱落细胞检查阴道脱落细胞检查：细胞学诊断报告方式有巴氏五级分类。 P330 P330 胃液显微镜检查胃液显微镜检查：包括红细胞、白细胞、上皮细胞、癌细胞。 P331 P331 痰液显微镜检查痰液显微镜检查：包括红细胞、白细胞、上皮细胞、真菌孢子、心力衰竭 细胞、癌细胞等。 P304 P304 粪便显微镜检查粪便显微镜检查：包括白细胞、红细胞、巨噬细胞、肠粘膜上皮细胞、肿 瘤细胞等。 P277 P277 肺泡灌洗液检查：肺泡灌洗液检查：可发现呼吸道原发性或继发性恶性肿瘤，包括周围性肺 癌，弥漫性肺恶性肿瘤（如支气管肺泡癌）、小细
9、胞肺癌等。临床检验基础 第3版 ISO 15189ISO 15189：5.5.1优先使用在公认/权威教科书，经同行评议的书刊或杂志，或 国际、国家或区域的指南中发表的程序。 体液标本种类体液标本种类 胸液、腹液、心包液、脑脊液、痰液、胃液、十二胸液、腹液、心包液、脑脊液、痰液、胃液、十二指肠液、胆囊液、胰液、羊水、精液、前列腺液、指肠液、胆囊液、胰液、羊水、精液、前列腺液、泪液、唾液、耳道分泌物、鼻腔分泌物、乳腺分泌泪液、唾液、耳道分泌物、鼻腔分泌物、乳腺分泌物、阴道分泌物、尿道分泌物、肿块物、阴道分泌物、尿道分泌物、肿块/ /囊肿液、脓肿囊肿液、脓肿液、引流液、关节腔积液、阴囊积液、肺泡灌洗
10、液、液、引流液、关节腔积液、阴囊积液、肺泡灌洗液、腹膜透析液、胸腔冲洗液、腹腹膜透析液、胸腔冲洗液、腹/ /盆腔冲洗液、尿液、盆腔冲洗液、尿液、粪便等三十余种。粪便等三十余种。 体液常规形态学检验内容体液常规形态学检验内容 细胞形态学细胞形态学 细胞计数细胞计数 细胞形态及分类细胞形态及分类 病原生物及其它形态学病原生物及其它形态学 真菌、细菌、寄生虫、结晶等真菌、细菌、寄生虫、结晶等 理化检验理化检验 CLINICAL LABORATORY SCIENCE The Basics and Routine Techniques ( 5/E 2012) MARY LOUISE TURGEON 主译
11、：彭明婷 申子瑜 脑脊液、浆膜腔积液常规检查内容脑脊液、浆膜腔积液常规检查内容 外观外观 化学分析（蛋白、糖）化学分析（蛋白、糖） 红、白细胞计数红、白细胞计数 形态学检查及细胞分类（瑞氏染色、异常细胞）形态学检查及细胞分类（瑞氏染色、异常细胞） 微生物革兰染色及培养微生物革兰染色及培养 二、浆膜腔积液常规形态学检查二、浆膜腔积液常规形态学检查 （胸水、腹水、心包腔积液）（胸水、腹水、心包腔积液） 浆膜腔积液常规形态学检查内容浆膜腔积液常规形态学检查内容 1 1. .颜色颜色、透明度透明度、蛋白定性蛋白定性、细胞总数细胞总数 计数计数、有核细胞计数有核细胞计数、细胞分类细胞分类。 2.2.形态
12、学及细胞计数、分类检查借助显形态学及细胞计数、分类检查借助显微镜完成：微镜完成： 细胞总数计数细胞总数计数、有核细胞计数有核细胞计数 细胞分类细胞分类、形态学观察形态学观察 浆膜腔积液细胞成份浆膜腔积液细胞成份 细胞成份细胞成份： 上皮源肿瘤细胞：如癌细胞上皮源肿瘤细胞：如癌细胞 上皮源非肿瘤细胞：如间皮细胞上皮源非肿瘤细胞：如间皮细胞 造血淋巴组织肿瘤细胞：如淋巴瘤细胞、白血病细胞造血淋巴组织肿瘤细胞：如淋巴瘤细胞、白血病细胞 造血淋巴组织非肿瘤细胞：如中性、淋巴、巨噬细胞造血淋巴组织非肿瘤细胞：如中性、淋巴、巨噬细胞 其它：如细菌、真菌、寄生虫、结晶其它：如细菌、真菌、寄生虫、结晶 腹水腹
13、水 嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、巨噬细胞嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、巨噬细胞 胸水胸水 淋巴细胞、巨噬细胞、中性粒细胞淋巴细胞、巨噬细胞、中性粒细胞 胸水涂片 间皮细胞（红色箭头所示）、淋巴细胞、巨噬细胞 腹水 癌细胞 浆膜腔积液标本采集浆膜腔积液标本采集 浆膜腔积液标本由穿刺术采集浆膜腔积液标本由穿刺术采集 第一管细菌学检查第一管细菌学检查，必须留于无菌试管必须留于无菌试管 第二管化学及免疫学检查第二管化学及免疫学检查（宜用肝素抗凝宜用肝素抗凝） 第三管常规检查第三管常规检查（宜用宜用EDTAEDTA- -NaNa2 2 抗凝抗凝） 第四管不加任何抗凝剂第四管不加任何抗凝剂，以观察有无凝集现象以
14、观察有无凝集现象。 标本收集后必须立即送检标本收集后必须立即送检，以防细胞变性以防细胞变性、出现出现 凝块或细胞破坏溶解凝块或细胞破坏溶解。 其方法是将离心后标本弃上清液其方法是将离心后标本弃上清液, ,留约留约0.05ml0.05ml沉渣，沉渣， 取取5 5- -8 8ll, , 置于清洁玻片的右侧端置于清洁玻片的右侧端, ,用一推玻片压用一推玻片压 在沉渣上在沉渣上, ,形成形成25253030度角度角, ,迅速向另一侧推进迅速向另一侧推进, ,制制 成涂片。成涂片。 每份标本推每份标本推6 6张涂片：张涂片：2 2张有尾薄片、张有尾薄片、2 2张有尾厚片、张有尾厚片、 2 2张无尾厚片。
15、张无尾厚片。 有核细胞浓集（离心后沉渣量）和制作涂片是提有核细胞浓集（离心后沉渣量）和制作涂片是提 高恶性细胞检出率最关键的操作技术高恶性细胞检出率最关键的操作技术 推片法制作涂片推片法制作涂片 备用涂片开展其他染色备用涂片开展其他染色, ,如抗酸、化学和免疫化学染色等如抗酸、化学和免疫化学染色等 有尾薄片有尾薄片x x2 有尾厚片有尾厚片x x2 无尾厚片无尾厚片x2x2 瑞吉染色瑞吉染色: :细胞形态染色鲜艳、结构清晰细胞形态染色鲜艳、结构清晰, ,便于良便于良 恶性细胞的辨认和鉴定恶性细胞的辨认和鉴定 每例标本至少观察每例标本至少观察2 2份涂片份涂片 先用低倍镜扫描全片先用低倍镜扫描全片, ,寻找可疑细胞寻找可疑细胞 再用油浸镜鉴定细胞性质再用油浸镜鉴定细胞性质 恶性细胞易分布于无尾片的尾部恶性细胞易分布于无尾片的尾部 涂片染色与镜检涂片染色与镜检 有核细胞分类及异常细胞报告有核细胞分类及异常细胞报告 低倍镜扫描低倍镜扫描2 2份涂片后，选择细胞分布均匀处，计数份涂片后，选择细胞分布均匀处，计数100100- -200200个有核细胞个有核细胞, ,按各占百分比报告。如中性粒细按各占百分比报告。如中性粒细胞胞60%,60%,淋巴细胞淋巴细胞25%,25%,巨噬细胞巨噬细胞10%,10%,嗜酸性粒细胞嗜酸性粒细胞5%5%。同时
