单胺氧化酶的研究进展

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1、1单胺氧化酶的研究进展【摘要】近年来,关于单胺氧化酶在临床上的应用研究越来越受到人们的关注,本文将对其理化性质、检测方法及临床应用作一综述。【关键词】单胺氧化酶;研究进展1MAO 理化性质单胺氧化酶(Monoamine oxidase, MAO)的分类名为单胺:氧氧化还原酶,是含Fe2+、Cu2+和磷脂的结合酶,主要作用CH2NH2 基团催化各种单胺类脱胺生成相应的醛,然后进一步氧化成酸;或使醛转化为醇再进一步代谢。MAO 是一种上具多个结合部位的单一分子酶,故对底物的特异性不高,可使多种胺类氧化脱氨。MAO 广布于体内各组织器官,尤以肝、肾、胃和小肠含量最多,主要位于线粒体膜外表面,并与膜紧

2、密结合,以黄素腺嘌呤二核苷酸为辅酶;另一类存在于结缔组织,不含 FAD,以磷酸吡哆醛为辅酶。脑组织中的 MAO 随年龄增加、神经胶质细胞的增多其活性增强。MAO 能分解儿茶酚胺类激素,可间接反映心脏交感神经结功能。现已证实,不同来源的 MAO 的相对分子质量相差很大,小者约100, 000,大者可达 1,000,000 以上,是由于同一亚基的聚合2程度不同所致。2MAO 实验室检测方法最早检测 MAO 是用荧光测定法 1和醛偶氮萘酚法2,目前常用方法包括以下几种。2.1醛苯腙比色法该方法通过 MAO 氧化苄胺,再与 2,4 二硝基苯肼作用生成的醛苯腙在碱性条件下产生棕红色,于 470nm比色测

3、定,计算 MAO 的浓度。2.2MCDP 比色法该法是通过 MAO 氧化苄胺产生过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶存在下与 MCDP 作用生成有色的甲烯蓝,于660nm 处比色测定,计算 MAO 的浓度。此法需要加入终止液后测定,不宜于大批量标本的检测,而且 MCDP 见光易分解。2.3连速监测法该方法是通过 MAO 催化苄胺生成氨,氨在-酮戊二酸、NADPH 和 GLDH 的存在下生成谷氨酸,同时NADPH 还原成 NADP+,引起 340nm 处吸光度的下降,通过监测其下降的速率即可得出样本中 MAO 的活性。此方法快捷、操作简单、适合自动化分析,可减少人为误差,具有良好的准确度与精密度,适合

4、大多数临床实验室应用。33MAO 测定的临床应用3.1血清单胺氧化酶活性高低能反映肝纤维化的程度,是诊断肝硬化的重要指标。肝硬化病人 MAO 活性升高的阳性率在 80%以上,最高值可达对照值的 3.5 倍(n=30) 。酶活性与腹腔镜所见肝表面的结节变化,以及与活组织镜检所见的纤维化程度相平行。纤维变仅限于汇管区或小叶中心者,其 MAO 活性大致正常;纤维变侵入肝实质内时,MAO 升高率为 30%;汇管和汇管区之间有架桥性纤维化时,则有 83%升高;如在假小叶周围有广泛纤维化形成时,则几乎全部均升高,且升高幅度最大。国内报道阳性率均在 85%(天津公安医院:17 例,88%,高玑山等:32 例

5、,85.7% ;薛德义等:71 例,87.05%;黄泽伦: 20 例,85%;刘览等:30 例,86.7%) ,其升高幅度及阳性率均超过急性或慢性肝炎。同工酶分离证实,慢性肝病 SMAO-III 有增高趋势;肝硬化代偿组 MAO-III 占总活性的(23.9+3.0 )% ,其阳性率为 72.2%(13/18) ;肝硬化失代偿组MAO-III 占总活性的(34.6+4.0)%,其阳性率为 92.3%,故检测MAO 同工酶有助于肝硬化的早期诊断(陈道宏等) 。虽然肝硬化时,结缔组织纤维释放 MAO 增多,但在纤维化甚为明显的血吸虫肝病,患者 SMAO 并不一定升高,故纤维化并非MAO 活性升高的

6、唯一原因。现已知大动脉和肺组织内 MAO 的浓度比血清高 100150 倍,血中 MAO 可能部分来自血管内皮细胞。肝硬化时,病人体内的水分增加,末梢扩张和高动力型循环等有可4能促使血管壁内 MAO 释放人血。由于胃肠组织也含有丰富的MAO,因此门体静脉短路时,肠内 MAO 可经短路进入体循环。3.2各型肝炎:各型肝炎急性期患者的 MAO 活性多数不升高,但在暴发型重症肝炎时,因肝细胞坏死,线粒体释放大量的MAO,可致 MAO 活性升高,阳性率可达 73.3%,其升高幅度与病情轻重程度成正相关;急性肝炎经久不愈,病程超过 3 个月者,MAO 活性亦可升高;活动型慢性肝炎有半数左右病例 MAO

7、活性升高。肝炎与肝硬化病人 MAO 活性差别显著,而各型肝炎之间的MAO 活性无显著差异。3.3糖尿病可因合并脂肪肝,充血性心力衰竭可因肝郁而继发肝纤维化,以至人 MAO 活性增高;甲状腺功能亢进可因纤维组织分解与合成旺盛,肢端肥大症可因纤维过度合成等原因,从而引起MAO 活性不同程度的升高。有些无纤维增生的结缔组织疾病的病人 MAO 活性不升高。原发性肝癌、继发性肝癌、畸胎瘤、胆汁性肝硬化、血吸虫性肝硬化、慢性胆汁郁积型肝炎等患者的 SMAO 活性不变。测定血小板 MAO 活性发现,正常对照组女性大于男性。慢性精神分裂症患者血小板 MAO 活性明显低于正常组,而急性5精神分裂症与对照组无明显

8、差别,但抗精神病药物能引起 MAO 活性升高。双向情感性障碍患者,血小板 MAO 活性显著低于对照组,且男性低于女性;躁狂型患者显著低于抑郁型患者患者,单相抑郁症患者显著公共开支对照组。但美国学者最近研究认为,血小板MAO 活性与精神病学检查结果没有明显关系。酒精中毒者男性血小板 MAO 与女性有明显差异。此外,测定肿瘤组织匀浆 MAO 和二胺氧化酶的活性,有助于区别前肠和中肠的类癌瘤肿瘤,前肠类癌肿组织中 MAO 活性(1850+342)mol/mg.min,n=16明显高于中肠类癌肿瘤(407+43)mol/mg.min 。参考文献1王坤,等.实用诊断酶学 M.重庆:科技文献出版社重庆分社,1989:259267.2叶应妩,等.全国临床检验操作规程式M.北京:人民卫生出版社,1997:229 231.

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