小鼠造模,四诊检测,病理学组织固定、包埋、切片、染色,检测。

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1、 一、教学目的和要求(一)实验流程的介绍1今天课程的内容安排主要是预初实验,包括:(1)有关理论知识学习。(2)掌握实验准备的基本方法。(3)掌握各实验方法的预实验。(4)掌握小鼠四诊检测的方法与技术。2下一次(3/14)实验课程安排(直接去实验教学 中心)内容包括:(1)正式教学实验开始:在老师指导下,动物四诊 检测,并开展造模。1)在教师的指导下,参考预初实验,集中对30只小 鼠实施造模,10只作正常对照。2)中药完成制备,并给药。3)按照计划,小鼠的证侯发生及其演变的观察、记 录。(2)其他组别学生,继续实验准备和各实验方法的 培训,为后续实验准备。实验前准备:包括准备4套相应 的实验器

2、材和有关试剂、容器、材料,放在相应的实验台 上;显微镜、匀浆器、试管和试管架等也准备到位。所有 实验方法掌握,并能够熟练运用。 3再下两次(3/21-3/28)课程内容安排(直接去 实验教学中心)第一次(3/21) (1)上午,第一组同学,去动物房小鼠四诊检测。(2)中午12:30,全体同学一道,处死实验小鼠, 取材。具体分工如下:组别实验 内容 1配合取材(胸腺、脾、肝、胃、小肠。以及心、肾、睾丸有关组织 称重 ),病理组织 固定、修块、包埋、切片、染色、封片,等。 2取材,并分离实验动 物后肢股骨,取骨髓,骨髓涂片,等。 3处死实验动 物,收集血液标本、血涂片,等。 4切取肝脏,抽提RNA

3、 ,等。(3)在老师的指导下,各检测研究同步展开,多手 段检测不同组别实验动物有关指标的改变,综合实验开 展和有关能力的训练。具体分工如下:组别指导老师实验 内容一实验 内容二1卢文丽小鼠造模,四诊检测 ,病理学组织 固 定、包埋、切片、染色,检测 。舌与舌苔,小肠、胃 粘膜病理 2潘志强小鼠造模,四诊检测 和辨证;骨髓涂 片、血涂片。脾、胸腺病理3宋菊敏 刘小美血清白蛋白、总抗氧化能力等生化测定 。肝、小肠、胃粘膜病 理 4梁超 管冬元中药制备,给药 ;白蛋白RTPCR、葡 萄糖醛酸基转移酶。肝、小肠、胃粘膜病 理在老师的指导下,在适当时间对标本进行处理,包 括生化、分子生物学指标检测,组织

4、、血液和骨髓涂片 的固定、包埋、切片、染色、封片、观察、记录,等; 以及相应的统计处理。此后几天内学生将利用课余时间和晚上开展相应实验 。主要用于组织的包埋、染色。第二次(3/28) 继续实验。此时,所有病理切片和染色已经完成,各 组同步开展读片工作。部分实验要求:(1)要求详细的实验记录:时间、内容、方法、结果 、对结果的分析、实验人员签名。 (2)关于读片读片注意:形态(组织结构、细胞形态、胞浆和细胞 核)的异同,颜色的异同。以往的问题:观察不仔细,把 握不住细胞的形态,有了变化却视而不见。关键在准备不 够充分。结果可以绘图,可以拍照。要求把有关结构、内容标 记清楚。要有文字说明,如:“图

5、1,脾脏,HE,400” 。以下将专门介绍。 (3)关于数据处理实验数据要求处理。要求提供均数和标准差,以及 各个组别的差别。差别要求明确其统计意义。常规统计方法,如卡方检验、方差分析等。处理过的数据可以列表,通常是3线简表,或直方图 类。有关图的选用,常用的是直方图,如果反映时间变 化的,比如不同时段体重的变化,可以用曲线图。常用 的还有散点图等。目的是清晰易懂。以往的问题。集中在统计方法不对,以及表格和图 的使用不当。(4)关于态度和精英教育鉴于教学条件和安排,没有要求每一个同学开展所有 实验。但是,如果可能的话,在完成各自负责的实验项目 的基础上,请主动参加所有实验,充分利用这样宝贵的学

6、 习、锻炼机会。投入多,收获多。4实验结果统计处理,形成PPT4/5的课,各小组推荐1人准备实验结果课堂介绍。其 他小组记录,并作为研究报告撰写时的参考内容。介绍实验结果的目的(1)作为介绍实验结果能力的培训。怎样把结果有 序、准确、精炼地介绍给大家。 (2)互通信息。由于不是人人参与了所有实验,具 体个人往往对其他同学的实验结果不了解,这样在分析自 己实验结果时容易造成偏差。盲人摸象。这也是为什么鼓 励综合实验的目的,即综合地分析所有数据,联系而不是 孤立地看待问题和数据,得到更贴近实际的结果。(3)为了达到介绍的最佳效果,要求可能的话制作 PPT。(二)今天的课程和预初实验1上午(1)今天和后续课程的总体介绍。(2)观看小鼠四诊和辨证方法,以及整个实验过程 的DVD课件,了解实验的基本方法。(3)观看小鼠辨证方法的PPT课件。(4)观看小鼠主要组织病理图谱PPT课件。2下午(实验教学中心)在各小组指导教师的指导下,分别开展:(1)小鼠四诊检测的全体学生操作训练,掌握小鼠 四诊检测的方法与技术。(2)各实验方法的预实验,重点为技术培训,以保 证后续实验开展。(3)掌握实验准备的基本方法。(4)中药制备。

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