血液细胞分析仪原理及应用【ppt课件】

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1、血液细胞分析仪原理及应用 主要内容 血液细胞分析仪的发展简史 血细胞计检测原理 人类生理和病理变化,往往会引起 血液组分的变化,所以及时了解血 液组分的变化,可以为医生提供诊 断与治疗疾病的重要依据。 红细胞 双凹圆盘 无核 红细胞的直径在69m之间,平均 为7.2m。 成年男子的红细胞个数为(4.6 6.2)1012个/L 成年女子的红细胞个数为(4.2 5.4)1012个/L 白细胞 有核 球形 直径为725m。 正常人的白细胞数目为(410)109 个/L 血小板 两面微凹的圆盘,受刺激时伸出伪足 正常人的血小板值为(100300)109 个/L,直径为24m。 血红蛋白(血色素或血红素

2、) 血红蛋白存在于红细胞中,是一种含 铁的色蛋白 成年男子为120160g/L 成年女子为110150g/L血液细胞分析仪测量参数 红细胞RBC 白细胞WBC 血小板PLT 血红蛋白HGB 红细胞比容HCT 平均红细胞容量 MCB 平均血红蛋白量 MCH 平均血红蛋白浓 度MCHC一、血液细胞分析仪的发展简 史 1956年美国科学家W.H.Coulter将 电阻法计数粒子的专利技术应用于 血细胞计数获得成功 其原理是根据血细胞非传导的性质 ,以电解质溶液中悬浮血细胞在通 过计数小孔时引起的电阻变化进行 检测为基础,进行血细胞计数和体 积测定,这种方法称为电阻法或库 尔特原理。 国外厂商: 日本

3、SYSMEX 美国beckman- coulter 日本KOHDEN 美国DANAM 瑞典BOULE 美国BAYER 美国ABBOTT 国内厂商: 南昌特康 南昌百特 深圳迈瑞 桂林百利特二、血细胞计数检测原理 库尔特计数原理 白细胞分类及计算方法 红细胞计数核红细胞比容测定原理 血红蛋白测定原理 血小板计数原理 其它参数计算方法 五分类血液分析仪原理及应用机型1. 库尔特计数原理 库尔特原理(coulter principle) :二、血细胞计数检测原理库尔特原理 悬浮在电解液中的颗粒/细胞,随 电解液通过小孔管时,因取代了相 同体积的电解液,在恒电流设计的 电路中导致小孔管内外两电极间电

4、阻发生瞬时变化,而产生了电位脉 冲。脉冲信号的大小和次数与颗粒 的大小和数目成正比。二、血细胞计数检测原理2. 白细胞分类及计算方法 根据脉冲的大小,即可人为地将血内地 白细胞分成几群(二分群或三分群) 三分类:淋巴细胞LY,单核细胞MO, 粒细胞GI。 五分类:淋巴细胞LY,单核细胞MO, 粒细胞GI(中性细胞,嗜酸性细胞,嗜 碱性细胞) 电阻抗法白细胞“分类”不能代替显微镜 涂片检查二、血细胞计数检测原理 在进行血细胞测定之前,全血标本 必须用稀释液在仪器外部或内部进 行一定比例的稀释,一般用1:251 的稀释倍数来测量白细胞 仪器将从白细胞计数池中测量到体 积35fl颗粒产生的电子脉冲的

5、数量 作为白细胞计数,根据细胞稀释倍 数进行计算,得到正确的白细胞计 数结果。 二、血细胞计数检测原理仪器是如何进行细胞分群的呢 ? 仪器除给出细胞数据结果外,同时提供 出细胞体积分布图形,这些可以表示出 细胞群体分布情况的图形被称为直方图 它可以显示出某一特定细胞群的平均细 胞体积、细胞分布情况和是否存在明显 的异常细胞群 直方图是由测量通过感应区的每个细胞 脉冲累积得到的,根据库尔特原理可以 在计数的同时进行分析测量。 二、血细胞计数检测原理直方图与脉冲信号的关系二、血细胞计数检测原理 在进行白细胞分析时,仪器的计算 机部分可以将白细胞体积从35 450fl分为256个通道,每个通道约 为

6、1.64fl,细胞根据其体积大小被 分别放在不同通道中,从而得到白 细胞体积分布的直方图 二、血细胞计数检测原理二、血细胞计数检测原理 经过溶血剂处理后的白细胞根据体 积大小可以初步确认其相应的种类 : 第一亚群(小细胞群)是淋巴细胞 LYM; 第二个亚群是单个核细胞群MONO, 也被称为中间细胞MID; 相当于粒细胞的细胞群GRAN位于第 三亚群(大细胞群)。 二、血细胞计数检测原理二、血细胞计数检测原理 仪器根据各细胞群占总体积的比例计算 出各细胞群的百分比,如果与该标本为 的白细胞总数相乘,即得到各项的绝对 值 注意,由于各厂家血细胞分析仪使用的 稀释液和溶血剂成分不完全相同,对白 细胞

7、膜的作用程度不同,所以仪器对各 类白细胞区分界限的规定有所不同,在 使用时不应随意更换生产厂家试剂,防 止造成错误报告。 二、血细胞计数检测原理3. 红细胞计数和红细胞比容测定 原理 大多数血细胞分析仪使用库尔特法 进行红细胞计数核红细胞比容测定 ,其原理同白细胞检测一样。 红细胞通过小孔时,形成大小相应 的脉冲,脉冲的多少即红细胞的数 目,脉冲的高度代表单个脉冲细胞 的体积 脉冲高度叠加,经过换算可得到红 细胞的比容 HCT二、血细胞计数检测原理 红细胞比容的测定方法: 红细胞比容指红细胞在全血中所占的 容积百分比是用来检测红细胞数量的 一个比值。 先以单个脉冲细胞的高度计算红细胞 的平均体

8、积MCV,再乘以红细胞的数 ,得出红细胞比容 正常成年人的红细胞比容,男性为40% -50%,女性为37%-48%。二、血细胞计数检测原理4. 血红蛋白测定原理 一般采取比色法 加入溶血剂,释放血红蛋白 用HiCN 生成氰化血红蛋白 ,或是 用SLS,光谱最大吸收在540nm附 近。二、血细胞计数检测原理二、血细胞计数检测原理5. 血小板计数原理 血小板随红细胞一起在一个系统中进行 检测,由于血小板体积与红细胞体积有 明显的差异,仪器设定了特定的阈值, 将高于阈值者定于红细胞,反之为血小 板 。二、血细胞计数检测原理 血小板分别贮存于64个通道内,直 方图范围为2-30fl。 为了使血小板计数更准确,有些仪 器专门设置了增加血小板准确性的 计数,如鞘流计数、浮动界标、拟 合曲线等 二、血细胞计数检测原理6. 其它参数计算方法 根据以上的方法检测出的参数套用相应公式就 可计算出:红细胞比容(HCT)、平均血红蛋白 量(MCH)、平均血红蛋白浓度(MCHC)、淋巴 细胞计数百分比(LY)血小板压积(PCT)等。 二、血细胞计数检测原理

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