《系统性红斑狼疮患者骨髓间充质干细胞凋亡相关研究》由会员分享,可在线阅读,更多相关《系统性红斑狼疮患者骨髓间充质干细胞凋亡相关研究(45页珍藏版)》请在金锄头文库上搜索。
1、A p o p t o s i so fm e s e n c h y m a is t e mc e l l si np a t i e n t sw i t hs y s t e m i cl u p u se r y t h e m a t o s u sAD i s s e r t a t i o nS u b m i t t e dt oN a n ji n gU n i v e r s i t yF o rt h eA c a d e m i cD e g r e eo fM a s t e ro fM e d i c i n eB yL e il i uS u p e r v i
2、 s e db yP r o f L i n g y u nS u nD e p a r t m e n to fR h e u m a t o l o g ya n dI m m u n o l o g yT h eA f f i l i a t e dD r u mT o w e rH o s p i t a lM e d i c a lS c h o o lN a n j i n gU n i v e r s i t yM a y 2 0 1 1萄京犬凑。医学院硕士研究生毕业论文南京大学学位论文原创性声明J 舢删Y 2 3 7 3 4 5 4本人声明,所呈交的学位论文是本人在导师指导下进
3、行的研究工作和取得的研究成果。尽我所知,除了论文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得南京大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献己在论文中作了说明并表示感谢。作者签名:刘蕾 1日期:如ff 年明;。日南京大学学位论文使用授权说明本人了解南京大学有关保留、使用学位论文的规定,即学校有权保留学位论文,允许学位论文被查阅和借阅:学校可以公布学位论文的全部或部分内容,可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文;学校可根据国家或江苏省有关部门规定送交学位论文。作者签名:主I 蔷导师签名:日期:p 6 1 年口明了。
4、日南京犬爨医学院硕士研究生毕业论文扉页南京大学学位论文原创性声明学位论文使用授权声明目录英文缩写索引1论文题目系统性红斑狼疮患者骨髓间充质干细胞凋亡相关研究中文摘要3英文摘要5前言7第一节研究对象及材料91 1 研究对象91 2 主要试剂91 3 主要仪器和设备。1 01 4 主要溶液的配制1 1第二节实验方法1 22 1B M S C s 的分离和培养1 22 2A n n e x i n V 流式细胞术检测凋亡率1 32 3T U N E L 法检测细胞凋亡1 3j I l l 京犬囊医学院硕士研究生毕业论文2 4 免疫组织化学法检测C y t - C 表达量一1 42 5 流式细胞术检测
5、F a s 、B c l 2 的表达及C a s p a s e8 活性1 42 6E L I S A 法检测血清F a s L 及T N F 水平1 52 7W e s t e r n b l o t 检测F a s 、T N F R 、C a s p a s e8 蛋白表达水平1 52 8 引物设计及合成1 62 9 实时荧光定量聚合酶链反应1 72 1 0 统计学处理1 8第三节结果1 83 1S L E 患者与正常对照组B M S C s 细胞凋亡率分析1 83 2S L E 患者B M S C s 内源性凋亡相关因子表达1 93 3S L E 患者B M S C s 外源性凋亡相关因
6、子表达一1 9第四节讨论2 0参考文献2 3附录1 综述2 5综述1H e d g e h o g 信号通路与淋巴细胞及干细胞分化2 5综述2 干燥综合症与细胞因子3 2附录2 个人简历3 9致谢4 1白螽犬募医学院硕上研究生毕业论文英文缩写A p a f - 1B A F FB C M AC y t - CD RD M S Od s D N AE L I S AF a s LF B SF n CG A P D HG V H DH U M S C sI F N 吖I LL D M E MM S C sM S C TP B SP C RR F英文名称缩略词对照表A p o p t o s i s
7、p r o t e a s ea c t i v a t i n gf a c t o r - 1B - c e l la c t i v a t i n gf a c t o rB c e l lm a t u r a t i o na n t i g e nC y t o c h r o m eCD e a t hr e c e p t o rD i m e t h y ls u l f o x i d eD o u b l es t r a n dD N AE n z y m el i n k e di m m u n o s o r b e n ta s s a yF a sl i g
8、 a n dF e t a lb o v i n es e r u mF l u o r e s c e i ni s o t h i o c y a n a t eG l y c e r a l d e h y d ep h o s p h a t ed e h y d r o g e n a s eG r a f t v e r s u s h o s td i s e a s eH u m a nu m b i l i c a lc o r dm e s e n c h y m a ls t e mc e l lI n t e r f e r o n - ,I n t e r l e u
9、 k i n中文译文凋亡细胞蛋白酶激活因子B 细胞活化因子B 细胞成熟抗原细胞色素C死亡受体二甲基亚砜双链D N A酶联免疫吸附法F a s 配体胎牛血清异硫氰酸荧光素磷酸甘油醛脱氢酶移植物抗宿主疾病人脐带问充质干细胞干扰素叫白细胞介素L o wg l u c 。8 eD u l b e c c 。sm 。d i f i e de a g l e低糖D M E M 培养基 m e d i u mM e s e n c h y m a ls t e mc e l l sT r a n s p l a n t a t i o no fm e s e n c h y m a ls t e mc e
10、l l sP h o s p h a t eb u f f e rs a l i n eP o l y m e r a s ec h a i nr e a c t i o nR h e u m a t o i df a c t o r间充质干细胞M S C s 移植磷酸盐缓冲液聚合酶链反应类风湿因子亩未犬募医学院硕士研究生毕业论文S L ES L E D A IT U N E LT N F 一0 【T N F RT G F - BW BS y s t e m i cl u p u se r y t h e m a t o s u sS L Ed i s e a s ea c t i v i t
11、 yi n d e xT e r m i n a ld e o x y n u c l e o t i d y lt r a n s f e r a s e m e d i a t e dd U T P - b i o t i nn i c ke n dl a b e l i n ga s s a yT u m o rn e c r o s i sf a c t o r - aT u m o rn e c r o s i sf a c t o r - i xr e c e p t o rT r a n s f o r m i n gg r o w t hf a c t o rpW e s t
12、e r nb l o t t i n g系统性红斑狼疮系统性红斑狼疮疾病活动指数末端脱氧核苷酸转移酶介导d U T P 原位切口末端标记技术肿瘤坏死因子0 c肿瘤坏死因子受体转化生长因子p免疫印迹法氨京犬凑医学院硕士研究生毕业论文查塞杰堂堡窒生皇些垒窒生窒塑翼笪亘旦丝毕业论文题目:丕统性红逛狼痊皇鲞置煎间在厦王细胞翅主担差班究 囱抖堂专业巡级亟生姓名:塞蠖指导老师( 姓名、职称) :处凌云教握系统性红斑狼疮患者骨髓间充质干细胞凋亡的相关研究中文摘要目的探讨系统性红斑狼疮( s y s t e m i cl u p u se r y t h e m a t o s u s ,S L E ) 患者
13、骨髓间充质干细胞( b o n em a r r o wm e s e n c h y m a ls t e mc e l l s ,B M S C s ) 的凋亡率变化及凋亡相关因子的表达。方法密度梯度离心和贴壁筛选法分离培养S L E 患者及正常人B M S C s ,T U N E L法及A n n e x i nV P I 双染法检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞表面F a s 、B c l 2表达水平及C a s p a s e8 活性;实时荧光定量P C R 技术检测F a s 、B c l 2 、B a x 、B c l W 、C a s p a s e8 及T N F Rm R
14、N A 表达水平;酶联免疫吸附法测定血清F a s L 及T N F o 【水平;W e s t e r nb l o t 检测F a s 、T N F R 、C a s p a s e8 蛋白表达水平;免疫组织化学染色检测胞质细胞色素c 表达水平。方差齐行独立样本t 检验,方差不齐行M a n n - W h i t n e y 秩和检验,p 0 0 5 ) ;S L E 患者B M S C s 细胞内C a s p a s e8 活性显著增强( p 0 0 5 ) :S L E 患者外周血血清中F a s L 及T N F 一0 【水平较健康对照组显著增高( p 0 0 5 ) ,但S L E 患者B M S C s 在体外培养过程中蛋白水平有显著增高( p 0 0 5 ) ,但流式细胞术检测其活性,发