《橙色粘球菌type Ⅳ pilus蛋白间的相互作用暨NaH antiporter和外膜蛋白影响盐环境下多细胞行为的遗传分析》由会员分享，可在线阅读，更多相关《橙色粘球菌type Ⅳ pilus蛋白间的相互作用暨NaH antiporter和外膜蛋白影响盐环境下多细胞行为的遗传分析（173页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、分类号密级单位代码学号1 0 4 2 22 0 0 7 1 1 4 2 2国沙东) y 芬 博士学位论文论文题目：橙色粘球菌t y p eI Vp i l u s 蛋白间的相互作用暨N a + 旷a n t i p o r t e r 和外膜蛋白影响盐环境下多细胞行为的遗传分析I n t e r a c t i o n so f M y x o c o c c u s x a n t h u sT y p eI Vp i l u sc o m p o n e n t s g e n e t i ca n a l y s i so fN a 嚼a n f i p o r t e ra n do
2、u t e rm e m b r a n ep r o t e i n si ns o c i a lb e h a v i o ru n d e rs a l tc o n d i t i o n s作者姓名学院名称专业名称指导教师李成云生命科学学院微生物学李越中教授合作导师Z h a o m i n Y a n g 副教授2 0 1 3 年1 1 月2 0 曰原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式
3、标明。本声睨的法律责任由本人承担。论文作者签名：槭厶日期：伽侈I I , 叼关于学位论文使用授权的声明本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权由东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。( 保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名：叁酞导师签名论文作者签名：7 跌以釜导师签名H 龄：丑限眭吨山东大学博士学位论文目录摘要IA b s t r a c t 。、f第一章前言11 1M y x o c o c c u sx
4、a n t h u s 的多细胞行为综述11 2 M y x o c o c c u s x a n t h u s 在固体界面的滑动运动31 2 1S 运动系统41 2 2A 运动系统1 11 3 运动的调节系统。1 11 3 1D i f 化感系统1 l1 3 2F r z 化感系统1 31 3 海洋耐盐粘细菌( M y x o c o c c u s f i d v u sH W 1 ) 的生存模式简述1 71 3 1 海洋耐盐粘细菌( M v x o c o c c u s f u l v u sH W 1 ) 的社会性行为1 71 3 。2H W 1 环境适应性进化生活模式转换的机制
5、研究1 81 4 论文工作的开展思路以及研究内容1 9第_ 7 2 章橙色粘细菌遗传学方法检测t y p eI Vp i l u sP i l M N O P Q 复合物2 12 1 实验材料2 22 1 。1 菌株及质粒。2 22 1 2 培养基2 42 。1 。3 实验试剂及仪器耗材2 42 2 试验方法2 72 2 1 目的基因缺失载体的构建流程2 72 2 。2Mx a n t h u sD K l 6 2 2 的电转化及突变株的筛选纯化2 82 2 3 目的基因的异源回补及示意图。2 92 2 4 敲除突变株中的点突变置换2 92 。2 。S 运动能力分析3 1山东大学博士学位论文2
6、 2 6 胞外多糖分析3 12 3 结果与分析3 22 3 。1M y x o c o c c u sx a n t h u s 中T y p eI Vp i l u s 系统的作用3 22 3 2 p i l M N O P Q 敲除突变株回补表型3 22 3 。3p i l B 木能够抑制p i l G H I 敲除突变株E P S 缺失但不抑制p i l M N O P Q C敲除突变株E P S 的缺失。3 42 4 小章总结4 l第三章T y p eI Vp i l i 蛋白间的茸接相互作用4 3 3 1 实验材料4 43 1 1 菌株及质粒4 43 。1 。2 培养基4 93 1
7、3 实验试剂。S O3 1 4 实验仪器及耗材S 23 2 试验方法5 23 。2 。1 酵母双杂和细菌双杂的质粒构建。5 23 。2 。2 酵母转化或者共转化实验。5 33 2 3 酵母m a t i n g 方式获得二倍体细胞5 53 2 4 酵母转化子B 一半乳糖苷酶活性分析( O N P G 作为底物) 5 53 2 5 酵母转化r e p l i c a 复制平板的方法5 63 2 6 酵母三杂交系统检测三个蛋白问的相互作用5 63 。2 7 稀释点板试验S 73 2 8 细菌双杂交检测蛋白相互作用的步骤5 73 3 实验结果。5 83 。3 1 酵母双杂交检测Mx a n t h
8、u sT y p eI Vp i l i 蛋白间相互作用5 83 3 2 酵母三杂交检测MX o l T t h l l sT y p eI Vp i l i 蛋白可能相互作用6 63 。3 3M ) c a n t h u sP i l C 蛋白的相互作用检测。6 7山东大学博士学位论文3 3 4 细菌双杂交系统检测Mx a n t h u sP i l M ，P i l N ，P i l T 和P i l B 蛋白相互作用7 03 3 5T h e r m u st h e r m o p h i l u sP i l N O P Q 蛋白相互作用的发现和验证7 23 3 。6 本章小结7
9、 7第四章M y x o c o c c u s f i d v u sH W - 1 和M y x o c o c c u sx a n t h u s 预测的N a + H + a n f i p o r t e rc l u s t e r 的功能分析7 94 1 实验材料。8 04 1 1 菌株及质粒8 04 1 2 培养基8 14 。1 。3 实验试剂及仪器8 24 2 试验方法。8 54 2 1 运动能力分析，8 54 。2 。2 胞夕 、多糖分析8 64 。2 3 发育能力的分析8 64 2 4 细胞胞外多糖染料结合实验8 74 ，2 。5S o u t h e r n 杂交插入
10、位点的验证8 74 2 6R T P C R 实验。8 84 2 7Q P C R 实验8 84 。2 。8 敲除突变株的获得8 94 。2 9 生长曲线的测定方法9 04 。2 1 0 死活孢子染色实验9 04 3 实验结果和分析9 04 。3 1H W l 突变株社会学行为能力分析9 04 3 2H W 1 突变株插入位点的确定以及插入单一性的验证。9 34 。3 3Y L H 0 4 0 2 插入转座子对插入基因以及上下游基因的影响9 44 3 4Y L H 0 4 0 2 突变株发育阶段的三儿彳B 一2 7 4 2 5 表达水平的初步分析9 S4 。3 。5D K l 6 2 2 中与
11、H W 1 的L I L A B _ 2 7 4 2 5 同源基因的比较9 6山东大学博士学位论文4 3 6D K l 6 2 2 中M X A N3 8 4 8 基因的插入失活突变株性质分析9 74 3 7Y L l 0 0 1 应答盐调控和社会学行为的分析9 84 3 8Y L l 0 11 社会学行为的变化9 94 3 9M X A N3 8 4 4 - M X A N3 8 5 0 基因簇中单个基因敲除突变株社会学行为分析。1 0 34 3 1 0 本章小结1 0 4第五章M f i d v u sH W 一1 中在淡水和海水条件下差异表达的外膜蛋白功能的初步探索。1 0 75 1 实验材料1 0 85 1 ，1 菌株及质粒1 0 85 1 2 培养慕1 1 05 。1 3 实验试剂1 1 05 1 。4 仪器设备及耗材1 1 05 2 实验方法。
