卡巴胆碱后处理对人胃黏膜上皮细胞缺氧复氧损伤的保护作用及其机制研究

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1、研究生个人简介韩红霞,女,汉族,出生年月:1 9 8 3 年l1 月,已婚。2 0 1 0 年7 月毕业于郧阳医学院,获临床医学专业学士学位。于2 0 1 0 年9 月就读于徐州医学院,攻读内科学( 消化系病) 专业,专业学位。在校期间修满2 6 5 个学分,通过国家英语六级考试,并通过临床医师资格考试,以第一作者撰写论文一篇,综述一篇,以共同作者发表论文一篇。1 H o n g X i aH a n ,S u J u a nF e i ,J i a n - F uZ h a n g ,Z h a n g - B oL i u ,S h e n g - P i n gZ h u ,Q i u

2、- J uD o n g ,Z h i F e n gG a o ,S h i - H u iW a n g ,X u a n X u a nX i o n g T h ep r o t e c t i v ee f f e c to fc a r b a m y l c h o l i n ep o s t c o n d i t i o n i n ga g a i n s th y p o x i a r e o x y g e n a t i o ni n j u r yi nh u m a ng a s t r i ce p i t h e l i a lc e l l s C a

3、n a d i a nJ o u m a lo fP h y s i o l o g ya n dP h a r m a c o l o g y ( u n d e rr e v i e w ) 2 韩红霞,费素娟,张建福胆碱能抗炎通路在消化系疾病方面的研究进展医学综述( 己录稿) 3 Z h a n g B oL i u ,S u - J u a nF e i ,S h e n g - P i n gZ h u ,J i n - Z h o uZ h u ,H o n g - X i aH a n ,Q i u 4 uD o n g ,J i a n F uZ h a n g P r o t

4、 e c t i o no fg h r e l i np o s t c o n d i t i o n i n go nh y p o x i “r e o x y g e n a t i o ni ng a s t r i ce p i t h e l i a lc e l l s W o r l dJG a s t r o e n t e r 0 1 2 0 1 2 ,1 8 ( 3 8 ) :5 3 7 7 5 3 8 8 目录缩略词表1中文摘要2A b s t r a c t 4材料和方法81材料82 方法1 0结果1 5讨论2 8结论3 1参考文献3 2综述3 7攻读硕士学位期间

5、发表学术论文题目4 6临床培训小结4 7致谢4 9论文独创性声明5 0论文使用授权声明5 0论文审阅认定书5 1徐州医学院硕士学位论文缩略词B C I PB S AC G R PD M S OD M E MG I I Uh G E S 1H RK RL D HM O D SM T TN B TP B Sp - E R KS D S P A G EV R l缩略词表A b b r e v i a t i o n英文全称中文全称5 - b r o m o - 4 - c h l o r o - 3 - i n d e o l y l p h o s p h a t e5 - 溴_ 4 一氯一3 一

6、吲哚磷酸B o v i n es e r u ma l b u m i n牛血清白蛋白C a l c i t o n i ng e n e - r e l a t e dp e p t i d e降钙素基因相关肽D i m e t h y ls u l f o x i d e二甲基亚砜D u l b e c c o M o d i f i e dE a g l eM e d i aD u l b e c c o 改良培养基G a s t r i ci s c h e m i a r e p e r f u s i o ni n j u r y胃缺血再灌注损伤H u m a ng a s t r

7、 i ce p i t h e l i a lc e l ll i n e s人胃粘膜上皮细胞系H y p o x i a r e o x y g e n a t i o n缺氧复氧K r e b s R i n g e rb i c a r b o n a t es o l u t i o nK r e b s 碳酸氢盐缓冲液L a c t a t ed e h y d r o g e n a t e乳酸脱氢酶M u l t i p l eo r g a nd y s f u n c t i o ns y n d r o m e多器官功能障碍综合征3 - ( 4 ,5 - d i m e t

8、 h y l t h a z 0 1 2 y 1 ) 2 ,5 一d i p h e n 四甲基偶氮唑蓝一y lt e t r a z o l i u mb r o m i d eN i t r o b l u et e t r a z o l i u mc h l o r i d e氮蓝四唑P h o s p h a t eb u f f e r e ds a l i n e磷酸盐缓冲液P h o s p h o r y l a t i v ee x t r a c e l l u l a r 磷酸化细胞外信号转导s i g n a l - r e g u l a t e dk i n a

9、s e激酶P r o p i d i u mi o d i d e碘化丙啶S o d i u md o d e c y l s u l f a t e十二烷基磺酸钠聚丙烯V a n i l l o i dr e c e p t o rs u b t y p e1辣椒素受体亚型1徐州医学院硕士学位论文卡巴胆碱后处理对人胃黏膜上皮细胞缺氧复氧损伤的保护作用及其机制研究中文摘要目的探讨卡巴胆碱后处理对人胃黏膜上皮细胞缺氧复氧损伤的保护作用并初步探讨其机制。方法体外培养人胃黏膜上皮细胞系( h - G E S 1 ) ,建立胃缺氧复氧( h y p o x i a r e o x y g e n a

10、t i o n ,H R ) 损伤模型。实验分组如下:正常对照组( N ) 、2 h 缺氧8 h 复氧组( H R ) 、D M S O 溶剂后处理对照组( V - P ) 、1 0 4m o l L 卡巴胆碱后处理组( C A R P ) 、M 受体拮抗剂a t r o p i n e + 卡巴胆碱后处理组( A + C A R - P ) 、辣椒素受体拮抗剂c a p s a z e p i n e + 卡巴胆碱后处理组( C + C A R - P ) 和E R l 通路阻滞剂P D 9 8 0 5 9 +卡巴胆碱后处理组( P D + C A R P ) 。采用M T T 法检测细胞存

11、活率,H o e c h s d 3 2 5 8 荧光染色观察凋亡细胞核的形态学变化,P I 双染流式细胞术检测细胞凋亡百分率,可见光分光光度法测定胞浆乳酸脱氢酶( 1 a c t a t ed e h y d r o g e n a t e ,L D H ) 漏出量,免疫细胞化学法检测辣椒素受体的亚型1 ( v a n i l l o i dr e c e p t o rs u b t y p e l ,V R l ) 及降钙素基因相关肽( c a l c i t o n i ng e n e - r e l a t e dp e p f i d e ,C G R P ) 的表达,免疫印迹法

12、测定胞浆B c l - 2 、B a x 、磷酸化细胞外信号转导激酶( p h o s p h o r y l a t i v ee x t r a c e l l u l a rs i g n a l r e g u l a t e dk i n a s e ,p - E R K ) 的表达。结果根据预实验结果,指定缺氧2 h 复氧8 h 为随后实验中的缺氧复氧模型,1 0 4m o l L 为本实验中卡巴胆碱的用药剂量。实验结果如下:( 1 ) 与H R 组比较,C A R P 组的细胞存活率升高,差异具有统计学意义( P 0 0 5 v s H R ) ,71 6 0 硅14 4 ( p

13、 ,0 0 5 v s I - V R ) ,7 4 9 0 o 4 6 7 1 5徐州医学院硕士学位论文p 0 0 5 v s H R ) 。在缺氧2 h 复氧8 h 情况下,H R 组与V - P 组细胞存活率分别为6 6 5 a = 5 9 ,6 6 4 哆钍5 6 ( f k 0 O l v s N ) ;在C A R P 组O o 6 ,1 0 4 ,1 0 。2t o o l L ) ,细胞存活率依次为7 0 5 0 社9 8 ( P 0 0 5 v s H R ) ,7 9 4 a :4 7 衅0 Olv s H R ) ,8 4 5 0 社1 0 4 ( P 0 0 5 ) 。

14、在缺氧2 h 复氧8 h 情况下,C A R - P 组( 1 0 。6 、1 0 4 、1 0 。2 m o l L 1 与H 瓜组比较,细胞存活率升高,差异具有统计学意义,且1 0 。4m o l L 与1 0 2m o l L 两个浓度组与H R 组比较,细胞存活率显著升高( 氏0 0 1 ) 。在缺氧2 h 复氧1 6 h 情况下,C A R P 组( 1 0 。6 、1 0 4 、1 0 。2 m o 儿) 与H 瓜组比较,细胞存活率升高,差异具有统计学意义( 氏0 0 1 ,n = 6 ,T a b 1 ) 。T a b 1E f f e c t so fd i f f e r e n td o s e so fc a r b a c h o lp o s t c o n d i t i o n i n gi nd i f f e r e n tr e p e r f u s i o nt i m e so nc e l lv i a b i l i t yi nh y p o x i a r e o x y g e n a t i o n q n

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