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1、分类号：U D C ：R 7 3 4 2密级：重庆医科大学硕士学位论文论文题目作者姓名V E c a d h e r i n 对非小细胞肺癌侵袭、转移作用 的初步研究顾雪霜指导教师姓名( 职称、单位名称)陈虹教授重庆医科大学附属第一医院申请学位级别硕士学科、专业名称内科学( 呼吸内科)论文答辩年月2 0 1 3 年0 5 月2 0 1 3 年0 4 月重庆医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得重庆医科大学或其他教育机构的学位
2、或证书而使用过的材料，与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。学位论文作者签名：碑两霸日期：7 p I 乡牛1 弓学位论文版权使用授权书本人完全了解重庆医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属重庆医科大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为重庆医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容( 保密内容除外) ，并编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他手段
3、保存论文。保密论文在解密后适用本授权书。论文作者签名：矽扎雪角 指导教师签名：帆 日期：z o l5 笨4 目码日目录英汉缩略语名词对照- - - - - - - - - - - - 1中文摘要- - - - - - - - - - - - - - - - - 3英文摘要- - - - - - - - 一- - - - - - - - 7论文正文：V E - c a d h e r ；n 对非小细胞肺癌侵袭、转移作用的初步研究- - 1 0前言- - - - - - - - - - - - - - - - 1 0嗣吾。- - - - - - 1第一部分V E - c a d h e rin 在
4、不同侵袭性能非小细胞肺癌细胞株的表达和意义- 121 材料- - - - - - - - - - - - 1 22 方法- - - - - - - - - - - - - - - - 1 53 结果- - - - - - - - - - - - - - - - - - - 2 04 讨论- - - - - - - - - - - - - - 2 15 参考文献- - - - - - - - - - - - - - - - - 2 2第二部分沉默V E c a d h e rin 对i I I E , J , 细胞肺癌细胞株侵袭、迁移的影响- 2 41 材料- - - - - - - - - -
5、 - 2 42 方法- - - - - - - - - - 一- - - - - - - 2 53 结果- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 2 74 讨论- - - - - - - - - - - - - - - 2 95 参考文献- - - - - - - - - - - - - - 3 0全文总结- - - - - - - - - - - - - - - - 3 2文献综述- - - - - - - - - - - - - - - - 3 3致谢- - - - - - - - - - - - - - 4 4攻读硕士期间发表的论文- - - -
6、 - - - - 4 5重庆医科大学硕士研究生学位论文英汉缩略语名词对照英文缩写英文全称V E c a d h e r i nV a s c u l a re n d o t h e l i a lc a d h e r i nN S C L CC C CV E G FT N F O r ,P A FS R FV ME M TA Pb pc D N AD A Bd d H 2 0D E P CD M S 0D N Ad N T PE BE C LE D TAF B SF C MN o n - s m a l lc e l ll u n gc a n c e rc a t e n i n - c
7、 a d h e r i nc o m p l e xv a s c u l a re n d o t h e l i a lg r o w t hf a c t o rt u m o rn e c r o s i sf a c t o r aP l a t e l e ta c t i v a t i n gf a c t o rS e r u mr e s p o n s ef a c t o ra s c u i o g e n i cM i m i c r ye p i t h e l i a l m e s e n e h y m a l t r a n s i t i o n ，a
8、 m m o n i u mp e r s u l f a t eb a s ep a i rC o m p l e m e n t a r yD N Ad i a m i n o h e n z i d i n e中文全称血管内皮钙粘蛋白非小细胞肺癌钙粘蛋白复合体血管内皮生长因子肿瘤坏死因子u血小板活化因子血清反应蛋白肿瘤血管生成拟态上皮间质转化过硫酸铵碱基对互补脱氧核糖核酸二氨基联苯胺D o u b l ed i s t i l l e dw a t e r双蒸水D i e t h y lp y r o c a r b o n a t e焦磷酸二乙酯D i m e t h y lS u l
9、 f o x i d e二甲基亚砜D e o x y n u c l e i ca c i d脱氧核糖核酸D e o x y r b o n u c e o s i d et r i p h o s p h a t e脱氧核糖核苷三磷酸E t h i d u mb r o m i d ee l e c t r o c h e m i l u m i n e s c e n c e溴化乙锭电化学发光E t h y l e n ed i a m i n et e t r a a c e t i ca c i d乙二胺四乙酸F e t a Ib o v i n es e r u m胎牛血清F l o
10、 wc y t o m e t e r流式细胞术G A P D HG l y c e r a i d e h y d e p3 磷酸甘油醛脱氢酶h o s p h a t e d e h y d r o g e n a s eH o u r小时重庆医科大学硕士研究生学位论文Lm gm AM i nm Lm R N An gN S C L CO DP A G EP B SP C RP IP M S FP V D FR N AR N A ir p mL i t e rm i l l i g r a mM i l l i a m p e r eM i n u t eM i l l i l i t e
11、 rM e s s e n g e rr i b o n u c l e i ca c i dn a n o g r a mN o n s m a l lc e l ll u n gc a n c e rO p t i c a ld e n s i t yP o l y a c r y l a m i d ee l e c t r o p h o r e s i sP h o s p h a t e b u f f e r e ds a li n eP o l y m e r a s ec h a i nr e a c t i o nP r o p i d i u mi o d i d ep
12、h e n y l m e t h y ls u l f o n y lf l u o r i d ep o l y ( v i n y l i d e n ef l u o r i d e )R i b o n u c l e i ca c i dR N Ai n t e r f e r e n c eR o u n dp e rm i n u t e升毫克毫安分钟毫升信使核糖核酸纳克非小细胞肺癌光密度聚丙烯酰胺凝胶电泳磷酸盐缓冲生理盐水聚合酶链反应碘化丙啶苯甲基磺酰氟聚偏二氟乙烯核糖核酸R N A 干扰每分钟转速R T - P C RR e v e r s et r a n s c r i
13、 p i t i o np o l y m e r a s ec h a i n 逆转录聚合酶链反应r e a c t i o nSS D Ss i R N AT B ET B S TT r i sS e c o n dS o d i u md o d e c y ls u l f a t e秒十二烷基磺酸钠S m a l li n t e r f e r e n c er i b o n u c l e i c a c i d小干扰核糖核酸T r i s b o r a t eE D7 么T r i s b u f f e r e ds a l i n et w e e n 2 0三羟甲基氨
14、基甲烷硼酸乙二胺四乙酸三乙醇胺缓冲液吐温一2 0T r i ( s h y d r o x y m e t h y l ) a m i n o m e t h a n e三羟甲基氨基甲烷重庆医科大学硕士研究生学位论文V E c a d h e rin 对非小细胞肺癌侵袭、转移作用的初步研究摘要研究背景：肺癌侵袭转移机制复杂，尚未完全明确，寻找新的作用于肺癌侵袭、转移的基因对于肺癌的治疗和预防均有着重要的意义。血管内皮钙粘蛋白( v a s c u l a re n d o t h e l i a lc a d h e r i n ，V E c a d h e r i n ) 是特异性表达于血管
15、内皮的钙粘蛋白，促进乳腺癌、直肠癌等多种肿瘤的血管形成。我们研究小组前期发现在非小细胞肺癌( n o n s m a l lc e l ll u n gc a n c e r ，N S C L C ) q b ，V E c a d h e r i n 与肿瘤血管生成密切相关，我们推测V E c a d h e r i n 在N S C L C 的侵袭、转移中起着重要作用，且目前国内外在V E c a d h e r i n 与N S C L C 侵袭、转移作用方面的报道研究甚少。研究目的：探讨V E c a d h e r i n 在不同侵袭性能非小细胞肺癌( N S C L C ) 细胞株的表达及沉默V E c a d h e r i n 对N S C L C 细胞株侵袭、迁移的影响。研究方法：1 通过定量P C R 及w e s t e r nb l o t 检测V E c a d h e r i n 在高侵袭性能的N S C L C 细胞株P G 、中度侵袭性能的N S C L C 细胞株H 1 2 9 9 及低侵袭性能的的N S C L C 细胞株P A 中m R N A 及蛋白的表达；2
