《IPEX综合征及XLP1临床与分子特点分析》由会员分享，可在线阅读，更多相关《IPEX综合征及XLP1临床与分子特点分析（57页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、分类号：U D C ：R 5 9 3 3 l密级：重庆医科大学硕士学位论文论文题目I P E X 综合征及X L P 一1 临床与分子特点分析作者姓名罗晓波指导教师姓名( 职称、单位名称)赵晓东教授重庆医科大学附属儿童医院申请学位级别硕士学科、专业名称J L 科学论文答辩年月2 0 1 3 年5 月2 0 1 3 年5 月1 煳嬲 重庆医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得重庆医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料
2、，与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。学位论文作者签名：飞瓯刁爻日期：2 0 f 弓4 J 8学位论文版权使用授权书本人完全了解重庆医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属重庆医科大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为重庆医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容( 保密内容除外) ，并编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他手段保存论文。保密论
3、文在解密后适用本授权书。论文作者签名：指导教师签名：呵晚波j 房内研乙 A ) ，导致F O X P 3 蛋白3 2 3 位氨基酸由谷氨酸替换为赖氨酸( G l u 3 2 3 L y s ) ，突变基因的转录产物中除了一部分为错义突变外，还形成了多种异常拼接体，部分为缺失第8 号外显子，部分同时缺失7 、8 号外显子，另有部分完全或部分缺失5 号外显子及部分l l 号外显子。患儿母亲为该突变的携带者。1 0 02重庆医科大学硕士研究生学位论文例正常儿童F O X P 3 基因相同位点未见变异。结论：通过临床、免疫学筛查、基因分析及流式细胞术，确诊一例发生F O X P 3 多种不同异常拼接及
4、错义突变的I P E X 患儿，为此前未报到的新发突变，对早发顽固性腹泻、湿疹、内分泌功能异常伴自身免疫现象及不明肾脏损害婴幼儿，应考虑I P E X 可能并进行T r e g 流式细胞术快速筛查及F O X P 3 基因分析以最终确诊。关键词：原发性免疫缺陷病，调节性T 细胞，F O X P 3 ，X 连锁多内分泌腺病、肠病伴免疫失调综合征第二部分：X L P - 1 型患者临床、基因和蛋白表达分析目的：探讨S H 2 D 1 A 基因突变所致X L P 1 型患儿的临床及分子特征，为临床甄别和诊断此病提供信息。方法：对1 5 例临床疑诊为X L P - 1 型的男性患儿，收集归纳临床资料和
5、相关实验室检查结果，采取患儿及其亲属新鲜外周血进行流式细胞术检测P B M C 内S A P 蛋白的表达，提取外周血D N A 和R N A ，P C R法扩增S H 2 D 1 A 基因c D N A 序列直接进行测序。在N C B I 基因库比对目的序列，发现突变位点后扩增相应外显子及或进行T A 克隆进一步分析确定突变类型，同时对相关亲属进行基因分析。结果：通过对1 5 例疑诊X L P 1 型患儿的基因和蛋白检测，发现3例来自无血缘关系的不同家族的患儿存在S H 2 D 1 A 基因突变，除外1 2重庆医科大学硕士研究生学位论文例。3 例突变均除外了基因多态性可能，其中2 例为新发突变
6、。患儿l的母亲、外祖母及患儿2 的母亲为致病突变的携带者。行流式细胞术检测的患儿1 和2 ，S A P 蛋白表达均明显降低。患者1 的母亲S A P 蛋白表达为双峰，患者2 的母亲蛋白表达正常。结论：本研究通过对患儿进行临床表现和免疫学初筛，同时借助基因序列分析和流式蛋白检测，确诊了3 例S H 2 D 1 A 基因不同突变的患者。对于符合X L P 一1 型临床表现的患儿应尽快进行S A P 蛋白检测和S H 2 D 1 A 基因分析。关键词：X 连锁淋巴细胞异常增生综合征，S H 2 D 1 A 基因，S A P蛋白，基因突变4重庆医科大学硕士研究生学位论文C L I N I C A LA
7、 N DM O L E C U L A RA N A L Y S I SO FI P E XA 1 N DX L P 1A B S T R A C TP a r to n e ：An o v e lF O X P 3g e n em u t a t i o nw i t hv a r i a n tt r a n s c r i p ti naC h i n e s ep a t i e n tw i t hi m m u n ed y s r e g u l a t i o n ，p o l y e n d o c r i n o p a t h y e n t e r o p a t h
8、y , X l i n k e ds y n d r o m eo b je c t i v e ：T oi n v e s t i g a t et h ec l i n i c a lc h a r a c t e r i s t i c s g e n e t i cv a r i a t i o no fF O X P 3g e n e ，f r e q u e n c yo fr e g u l a t o r yTc e l l s ( T r e g ) a n de x p r e s s i o no fF O X P 3p r o t e i ni nt h ep e r
9、i p h e r a lm o n o n u c l e a rc e l l s ( P B M C s ) i na2m o n t h o l dm a l ep a t i e n tw i t hs e v e r ea n de a r l y o n s e td i a r r h e a ，s u b c l i n i c a lh y p o t h y r o i d i s m ，t h y r o i d i t i s ，i m m u n et h r o m b o c y t o p e n i cp u r p u r aa n da u t o i
10、m m u n eh e m o l y t i ca n e m i a M e t h o d s ：T h ep a t i e n tw a sh i g h l ys u s p e c t e dw i t hI P E Xs y n d r o m ea n dw a ss u b j e c t e dt od e t e c t i o no fF O X P 3p r o t e i ne x p r e s s i o no nC D 4 + C D 2 5 + Tc e l l sa n dt h ef r e q u e n c yo fT r e gi nC D 4
11、 + Tc e l l sb yf l o wc y t o m e t r y F O X P 3g e n ea n di t st r a n s c r i p t sw e r ea m p l i f i c a t e db yP C R T h eP C Rp r o d u c t sw e r ec l o n e da n ds e q u e n c e d O n eh u n d r e dh e a l t h yc o n t r o l sw e r ea l s oe n r o l l e di nt h i ss t u d yt oe x c l u
12、d eS N RR e s u l t s ：T h ep a t i e n ts h o w e ds i g n i f i c a n t l yr e d u c e df r e q u e n c yo fT r e gb u tn o r m a le x p r e s s i o no fF O X P 3p r o t e i ni nh i sp e r i p h e r a lb l o o dw h e nc o m p a r e dw i t hh e a l t h yc o n t r o l s AG As u b s t i t u t i o nl
13、o c a t e di nt h el a s tn u c l e o t i d eo fe x o n8r e s u l t i n gi nE 3 2 3 Ks u b s t i t u t i o nw a si d e n t i f i e d w h i c h5重庆医科大学硕士研究生学位论文a l s or e s u l t e di ns e v e r a ld i s e a s e c a u s i n gt r a n s c r i p tv a r i a t i o n s T h ep a t i e n t Sm o t h e rw a si
14、d e n t i f i e da sac a r r i e ro ft h es a m em u t a t i o n N om u t a t i o nw a sf o u n da tt h es a m es i t eo fF O X P 3g e n ei nt h eh e a l t h yc o n t r o l s C o n c l u s i o n ：An o v e ls p l i c er e c o g n i z i n gs i t em u t a t i o no fF O X P 3w a si d e n t i f i e di na
15、C h i n e s eI P E Xs y n d r o mp a t i e n tw i t hd e c r e a s e df r e q u e n c yo fT r e g P a t i e n tw i t hs e v e r ea n de a r l y o n s e td i a r r h e a ，s u b c l i n i c a lh y p o t h 3 r o i d i s m ，t h y r o i d i t i s ，i m m u n et h r o m b o c y t o p e n i cp u r p u r aa
16、n da u t o i m m u n eh e m o l y t i ca n e m i as h o u l db es u s p e c t e da sI P E Xa n dF O X P 3g e n ea n a l y s i ss h o u l db ep e r f o r m e df o rf i n a ld i a g n o s i s 。K e yw o r d s ：I m m u n o l o g i cd e f i c i e n c ys y n d r o m e ，F O X P 3 ，R e g u l a t o r yTc e l l s ，I m m u n ed y s r e g u l a t i o n ，p o l y e n d o c r i n o p a t h y ；e n t e r o p a t h y , X l i n k e ds y n d r o m eP a r tt w o ：C l i n i c a l ，g e n e
