《Graves病患者生物大分子氧化损伤的研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《Graves病患者生物大分子氧化损伤的研究（41页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、兰州医学院硕士学位论文Graves病患者生物大分子氧化损伤的研究姓名：孙蔚明申请学位级别：硕士专业：内分泌及代谢病指导教师：汤旭磊;高林2003.6.1G r a v e s ，病患者生物大分子氧化损伤的研究摘要目的：观察G r a v e s 病( G D ) 患者体内氧化和抗氧化状态及生物大分子的氧化损伤情况。评价抗氧化剂对G D 患者外周血单个核细胞D N A 损伤的体外修复作用。方法：检测G D 初发组、G D 治疗组各3 1 例患者血浆总抗氧化能力( 1 A C ) 、超氧化物歧化酶( S o D ) 、过氧化氢酶( C A T ) 、谷胱甘肽过氧化物酶( G S H P x ) 活
2、性及血浆丙二醛( M D A ) 和巯基( s H ) 含量，与3 l 例正常对照比较。其中T A C 检测采用菲罗啉比色法；S O D 活性的检测用黄嘌呤氧化酶法：C A T 的测定用可见光法；G S H - P x 活性及S H 含量的检测采用二硫硝基苯甲酸比色法；血浆M D A 含量的检测用硫代巴比妥酸比色法。用单细胞凝胶电泳( S C G E ) 检测G D 患者外周血单个核细胞D N A 的损伤情况( 结果用彗星率表示) 。同时观察了槲皮素、褪黑素、N - 乙酰半胱氨酸( N A C ) 及维生素C 对G D 初发患者外周血单个核细胞D N A损伤的体外修复情况。兰卅医学兢硬士学位论
3、文结果：G D 初发组血浆T A C 水平、S O D 、G S H - P x 活性及S H含量较对照组明显降低( p O 0 5 ) ，M D A 含麓及彗攫率明驻升高( P 0 0 5 ) ；G D 治疗组T A C 、S O D 、G P x 的活性较初发组明显升高( P O 0 5 ) ；但与对照组比较T A C 活性仍低，差异有显著性( 尸 0 0 5 ) 。( 见表2 )3 G D 初发组、治疗组与对照组血浆丙二醛和巯基的含量及彗星率的比较兰州医学院硕士学位论文表3 G D 患者和对照组血浆丙二醛和巯基的含量及彗星率的比较T a b l e 3 T h el e v d so f
4、 M D A ，S Ha n dt h en u m b e ro f m i g r a t e dc 懋l l si np a t i e n t sw i t hG j r a ：V e S d i s e a s ea n dh e a l t h yc o n t r o l s组别例数M D A ( t u o F L )S H ( m m o W )彗星率( )对照组3 14 7 1 士1 1 90 2 9 士8 3 0 E - 0 29 8 2 士3 1 9G D 初发组3 1O 2 2 - 士7 8 0 E - 0 2 2 3 6 9 - i ：5 5 1 4G D 治疗组3
5、 15 4 1 士1 3 1 0 2 趾8 5 4 E - 0 2 1 2 8 l 士4 1 9 ”4 P 0 0 1V S c o n t r o lg r o u p ： o o i 坩G Du n t r e a t e dg r o u pG D 初发组与对照组比较M D A 含量及彗星率明显升高( P O 0 1 ) ，S H含量明显降低( P O 0 1 ) ；G D 治疗组M D A 含量及彗星率较初发组明显下降( P O 0 1 ) ，S H 含量明显升高( P O 0 1 ) ；较对照组彗星率仍高，差异有显著性( P 0 0 1 ) 。4 彗星率与总抗氯化能力及丙二醛含量的相
6、关性分析相关性分析表明，G D 初发患者彗星率与- I A c 成负相关关系( ，：一0 5 9 9 ，P 0 0 1 ) ，与M D A 成正相关关系( ，= o 4 6 3 ，P 0 0 1 ) ；G D 治疗组彗星率与T A C 仍成负相关关系( ，= 一0 4 2 9 ，P 0 0 5 ) ，与M D A 成正相关关系( ，2 0 4 0 2 ，P 0 0 5 ) 。见图l - 4 。1 2兰型堕堂堕塑主兰竺笙苎4 0 鳞2 5 吾2 0 莹1 5 苗1 0 l5O! I0T A C ( U m 1 )1 5图1G D 未治疗组患者P B M C 彗星率与血浆总抗氧化能力的相关性F m
7、 gC o r r e l a t i o nb e t w e e nc o m e tp e r c e n t a g eo f P B M Ca n dp l a s m aT A Ci np a t i t sw i t hu n t r e a t e dG r a v e s7d i s e a s e051 0 M D A ( u m o l L )图2G D 未治疗组患者P 8 M c 彗星率与血浆丙二醛含量的相奚性F - 9 2C o r r e I a t i 。nb e t w e e nc o m e tp e r c e n t a g eo f P B M Ca
8、n dp l a s m aM D Ai np a t i e n t sw i t hu n t r e a t e dG r a v e s d i s e a s e1 3驺如”加：2加，O摹_)曩oa3-。d苗98兰州医学院硕士学位论文3 0rO51 01 5T A C ( U m 1 )图3G D 治疗组患者P B M C 彗星率与血浆总抗氧化能力的相关性F i 9 3C o r r e l a t i o nb e t w nc o m e tp e r c e n t a g eo f P B M Ca n dp l a s m aT A Ci np a t i e n t sw
9、 i t ht r e a t e dG r a v e s d i s e a s e02468M D A ( p m o l L )1 0图4G D 治疗组患者P B M c 彗星率与血浆丙二醛含量的相关性F i 9 4C o r r e l a t i o nb e t w e e nc o m e tp e r c e n t a g eo f P B M Ca n dp l a s m aM D Ai np a t i e n t sw i t hI r e a t e dG r a v f ：s d i s e a s e1 4摹v菩8-苗98如”加加，0摹_)p*暑oQ甚厶苗县o
10、o兰州医学院硕士学位论文5 抗氧化剂对G D 初发患者外周血单个核细胞D N A 损伤的体外修复5 1 槲皮素、褪黑素及N A C 在不同时间点对G D 患者外周血单个核细胞D N A损伤的修复作用如图5 所示，2 小时后抗氧化剂可降低G D 初发患者彗星率，4 小时的修复作用好，6 小时台盼兰染色细胞存活率小于8 0 。01234T n n e ( h )m e l a t o n i n ( 1 0 p m o l L )N A C ( I O O p m o t L )牛r 血( 1 0 m o I 几)未处理图5 抗氧化荆不同时间对G D 病患者外周血单个棱细胞D N A 损伤的修复作
11、用F i 9 5 T h et i m ec u r v e so f t h ee f f e c t so f l m f i o x i d s n t so nD N Ad a m a g et oP B M Ci np a t i e n t sw i t hG r a v e s d i s e a s e如“加：2m，0暴_)oM暑口03J煞_譬Ious 2 不潮浓度的抗氧化物质对G D 患者辨周血举个核细胞D N A 损伤豹体外修复抗鬣纯搦蕨对O D 患者羚璃盘鼙令核蠲麓佟焉霹小时，D N A 矮伤瀚谚复情况见表4 。璇羞热入趋槲皮素、褪黑索及N A C 浓度熊加大，彗星率下降
12、，其中槲皮素和褪黑素浓度增至1 0 p m o l L ，N A C 浓度增拦1 0 0 I H t r n o P L 时，彗星率的降低差异有显著髋( P O 0 5 ) ( 鬻6 - s ) 。l 、1 0 、1 0 0 ；t m o l L 维生索C 对D N A 的损伤无影确，l o 一0 0 。t t m o l L 缝生素C 可加麓其损伤( 图9 ) 。袁霹。不商浓度霹辘戴绍耪震砖G D 患者跨簿血单夸辕细毙D N A 疆伤翡体外修复T a b l e4 T h ee f f e c t so f a n t i o x i d a m sO nD N Ad a m a g et
13、oP B M Ci np a f i e n t s 谢t hG r a v e s d i s e a s eI P O 0 5 “ P S O 脚。班。1 6兰塑墨堂堕堡主堂竺笙兰3 5一 琵蓍2 ，0 。耋1 ： 0 011 01 0 0Q u e r c e t i n ( um o l L )P 0 0 5v s 0t t m o l L ，n = 5图6 不同浓度槲皮素对G D 病患者外周血单个核细胞D N A 损伤的修复作用F i g 6 T h ee f f e c to f q u e r c e t i nO l lD N Ad a m a g et oP B M Ci n
14、p a t i e n t sw i t hG r a v e s d i s e a s e喜。3 。5 眭薹1 0 。 0 O11 01 0 01 0 0 0 M e l a t o r 血( 哪儿)P 0 0 5v s 0t _ t m o l L ，n = 5图7 不同浓度褪黑素对G D 病患者外用血单个棱细胞D N A 损伤的修复作用F i g 7 T h ee f f e c to f m e l a t o n i nO BD N Ad a m a g et oP B M Ci np a t i e n t sw i gG r a v e s d i s e a s e1 7木T
15、 上一上U兰州医学院硕士学位论文3 0r拿2 5詈2。0薹1 0 。0 Ol1 01 0 0l O o oN A C ( 肛m o l L ) O 0 5V S 0i 咀m o l L , n = 5图8 不同浓度N A c 对G D 病患者外用血单个核细胞D N A 损伤的修复作用F i g 8 T h ee f f e c to f N - a c e t y l c y s t e i n eo nD N Ad a m a g et oP B M Ci np a f i e n t sw i t hG r a v e sd i s e a s e011 01 0 01 0 0 0 V i
16、 t a m 砬( m r o V L ) o 0 5V S 0 ) _ L m o l Ln = 5图9 不同浓度堆生素C 对G D 痛患者外用血单个棱细胞D N A 损伤的修复作用F i g 9 T h ee f f e c to f V i t a m i nCo nD N Ad a m a g et oP B M Ci np a t i e n t sw i t hG r a v e s d i 哪e1 8柏“如笛”m，O 摹vDM丑岛舢窖9山苗昌oU兰州医学院硕士学位论文讨论一、G D 患者体内存在氧化，抗氧化失衡及生物大分子的氧化损伤正常情况下机体氧化抗氧化保持动态的平衡，自由基增多会诱导抗氧化酶( S O D 、C A T 、G S H P x
