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1、 诊断试剂系列新品原料推荐诊断试剂系列新品原料推荐 1、酶法检测糖化血红蛋白、酶法检测糖化血红蛋白 糖化血红蛋白(HbA1c)是目前糖尿病(DM)实验诊断方法中最常用的血糖监控指标,它主要反映患者近 23 个月血糖控制的总体水平，自上世纪 70 年代以来已广泛的应用于 DM 诊疗的各个方面。糖化血红蛋白的临床实验室检测方法则已从最初的电泳法、色谱法等发展到如今的免疫比浊法、化学发光法和酶法。 近两年应用酶法测定糖化血红蛋白在各实验室相继展开， 直接酶法具有良好精密度及准确度，不易受其他因素干扰，结果准确可靠，方法简便易行。 检测原理：特殊蛋白酶分解血红蛋白（Hemoglobin, Hb），3-
2、5 分钟内果糖基氨基酸从 Hb 分离，后经果糖基氨基酸氧化酶(Fructosaminase, FAOD)产生 H2O2，H2O2与 POD 与色原 N-(羧甲基氨羰基)-4，4-二甲氨基二苯胺钠盐(DA-64)反应，在 751nm 测吸光度改变。 2、CNP-NAG 应用于肾损伤早期检测应用于肾损伤早期检测 N- 乙酰-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG-ase）在尿中活性的测定，在临床上应用已有 20 多年的历史。实践证明，它是能早期发现肾脏损害成绩最好的尿酶。尿中此酶主要来自肾近曲小管上皮细胞，分子量约130-140kd，尿中 NAG-ase 活性升高，除前列腺炎和精液混入外，是各种肾实质早期损伤
3、的敏感标志物。参阅 20 多年来中外文献，测定 NAG-ase 可以提供许多重要的临床信息。 NAG(EC3.2.1.30)是一种溶酶体酶，广泛分布于人体各组织中，但在前列腺和肾脏近端肾小管中含量最高。NAG 分子量约为 130-140kd，在正常情况下，血清中 NAG 不能通过肾小球滤过从尿中排泄。尿中 NAG 活性升高，除前列腺炎和精液混入外，常是肾脏损害的标志。尿液 NAG 总活性及其同工酶是目前临床上最常用的测定指标。 检测原理：样品中的 NAG 作用于底物 2-氯-4-硝基苯-N-乙酰-D-氨基葡糖糖苷(CNP-NAG)，水解游离出 CNP，其生成速度与样品中酶活性在一定范围内成正比
4、，可在 400-405nm 测定每分钟吸光度的变化（A/分），计算 NAG 的活性。由于色团的 pKa 为 5.5，与 NAG-ase 的最适反应 pH4.8接近，可在反应条件下直接显色，无需再行碱化，具备了速率法测定的条件。 （1）、性质稳定，干粉可长期保存，制成工作液，条件合适也可稳定至少一周 （2）、操作简单、省时，无需逐个测样品空白，也不必碱化呈色 （3）、有足够的灵敏度，可支持临床检出其相应的目标物。 （4）、有较高的准确性和精密度。 3、CNP-AFU 和和 M-G-CNP-AFU 应用于原发性肝癌检测应用于原发性肝癌检测 原发性肝癌（PHC）是我国常见的恶性肿瘤之一，是一种恶性程
5、度高、进展快、预后差、侵袭性强的恶性肿瘤，其死亡率在消化系统恶性肿瘤中列第 3 位，仅次于胃癌和食管癌。早诊断、早治疗，是延长生存期、降低死亡率的关键。甲胎蛋白（AFP）是诊断 PHC 的重要指标，但 30%40%的 PHC 患者 AFP 阴性，因此寻找更特异、敏感的肿瘤标志物和诊断方法是研究肝癌的重要课题。 -L-岩藻糖苷酶(-L-Fucosidase, AFU)是一种溶酶体酸性水解酶，存在于人体肝、胰、脑、肺、肾纤维细胞等溶酶体内，以肝肾含量最高，它主要水解含有岩藻糖的脂质，粘蛋白及粘多糖. 正常组织糖苷酶的释放率变化很小(孕妇除外)， 从而使血清糖苷酶维持在一定范围内. 血清 AFU 水
6、平测定以往主要用于该酶缺陷引起的岩藻糖酶缺陷病. 近年来发现肝癌患者血清 AFU 水平有别于其他肝胆疾病，呈显著性升高，在动物实验中观察到 morris 鼠肝癌组织中 AFU 活力较正常肝脏高 7 倍，可作为一项肝癌非特异性标志物用于本病的诊断，其阳性率为 73.9%81%，特异性为 90%. 在 AFU 阳性与阴性肝癌患者中，AFU 阳性率之间无明显差异。 检测原理：2-氯-4-硝基苯基-L-岩藻糖苷（2-Chloro-4-nitrophenyl-Alpha-L- Fucopyranoside, CNP-AFU）被样本中的 -L-岩藻糖苷酶作用水解产生 2-氯-4-硝基苯（CNP）, 或者
7、MG-2-氯-对硝基苯酚-L-岩藻糖苷(M-G-CNP-AFU)被样本中的 -L-岩藻糖苷酶的作用，水解产生 MG 和 CNP。测定 CNP 的吸光度的增加量即可以得到 AFU 的活性。 CNP-L-FucosideH2O CNP-L-岩藻糖 或 MG-CNP-L-FucosideH2O MGCNP-L-岩藻糖 4、GPDA 检测检测 甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶（Glycyl Proline Dipeptidyl Aminopeptidase.GPDA）广泛分布于人的肾脏、结缔组织、唾液腺、淋巴结等组织和人的血清、唾液中。主要功能为分解来自胶原的多肽，对维护结缔组织和上皮细胞的结构与功能具有重要
8、价值。 自从七十年代，血清 GPDA 测定被应用于临床以来，GPDA 的临床价值得到了深入的研究和广泛的临床应用。临床上主要应用在胃癌的辅助诊断、胃癌是否产生肝转移的鉴别;同时在原发性肝癌、继发性肝癌中临床价值得到了广泛的应用1-3。随着 GPDA 的广泛使用，在其他疾病，例在乳腺癌、肾早期损害、类风湿病等等疾病中的研究得到长足的发展。 检测原理：在碱性条件下，GPDA 催化底物甘氨酰-脯氨酰-对硝基苯胺对甲苯磺酸盐（Gly-Pro p-nitroanilide p-toluenesulfonate salt, H-Gly-Pro-Pna）水解，生成甘氨酰脯氨酸和黄色的对硝基苯胺，后者可引起在
9、特定波长下吸光度的升高，吸光度升高速率与 GPDA 活性成正比。 5、亮氨酸氨基肽酶测定、亮氨酸氨基肽酶测定 亮氨酸氨基肽酶(Leucine aminopeptidase, LAP)是一种蛋白分解酶,能水解肽链 N 端并由亮氨酸与其他氨基酸形成肽键的酶,广泛分布于肝、胰、肾等组织中。当人体肝、胆、胰等组织有病变时,均可出现血清 LAP 水平升高。测定血清亮氨酸氨基转肽酶可作为肝病诊断的又一项指标,对淤胆性肝炎的鉴别诊断、肝道梗阻及胰腺癌的诊断有价值。其肝癌的检出阳性率较 ADA 高，比 GGT 反映肝脏疾病更加灵敏。亮氨酸氨基肽酶（LAP）的检测也可早期反映肾损害的性质和程度，并为临床鉴别肾小
10、球、肾小管损伤提供可能的帮助；其亦可作为妊娠合并 ICP 及孕妇和胎儿健康情况动态监测的一项有效指标。 检测原理：采用 L-亮氨酸对硝基苯胺盐酸盐(L-Leucine-p-nitroanilide, H-Leu-Pna-HCl, CAS16010-98-3)作为底物,经 LAP 水解，通过检测对硝基苯胺(P-nitroaniline)来测定 LAP 的活性。 具有以下优点:速率法、测试速度快、操作简便、适用于全自动生化分析仪。 6、脯氨酸肽酶、脯氨酸肽酶(PLD)检测检测 血清脯氨酸肽酶(Prolidase，PLD)或脯肽酶，是一种广泛存在于人体各组织和细胞的亚氨基肽酶，它催化含有 C-末端或
11、 2 肽的水解，对胶原合成和细胞生长过程中的再循环起重要作用。其血中水平变化与肝损害程度及肝病慢性化密切相关。 脯氨酸肽酶全称为亚氨基 2 肽酶，是由两个相同的亚单位组成的二聚体，其分子量为 97kD。每个亚单位由 492 氨基酸组成，富含。人 PLD 基因位于 19 号染色体短臂上。整个基因长达 140Kb 以上，包括 14 个内含子和 15 个外显子。内含子长度从 1.050Kb，占全部基因的 98.60%；外显子长度从 455286p，共约 1.9Kb，仅占全部基因的 1.4%。人 PLD表达从 5末端开始，开放读码框架 1.47bp，编码 493 氨基酸。起始为蛋氨酰基，它随后脱落，位
12、于第 2 位的基因此封闭成为 N-末端的最终氨基酸，故其原单位仅剩 492 个氨基酸。 检测原理：PLD 活性的测定方法较多其中比较有实用价值的测定方法是分光光度比色法，其基本原理是以甘氨酰一 L 一脯氨酸为底物在脯氨酸肽酶的作用下释放出脯氨酸： 然后通过脯氨酸与茚三酮反应生成紫红色化合物来测定所释放出的脯氨酸量，以产物脯氨酸的量来反映PLD 的活性。 7、血管紧张素转化酶活性的测定、血管紧张素转化酶活性的测定 血管紧张素转化酶(Angiotensin-converting enzyme, ACE)是一种结合糖蛋白，含有锌元素，属二肽羧肽酶。可使血管紧张素 I 形成具有升血作用的血管紧张素 I
13、I，后者使血管进一步收缩、血压升高。血管紧张素转化酶也可使具有降压作用的舒缓激肽灭活，还可能直接作用于肾上腺皮质促进醛固酮的分泌。是肾素-醛固酮系统及缓激肽系统的重要调节因素。血清血管紧张素 I 转化酶活性的测定常用于结节病的诊断和活动性诊断。 检测原理：底物 N-3-(2-呋喃基)丙烯酰-L-苯丙氨酰-甘氨酰-甘氨酸(N-3-(2-Furyl)acryloyl-L-phenylalanyl-glycyl -glycine, FAPGG)最大吸收峰在 340nm。血管紧张素转化酶酶解 FAPGG 生产 FAP 及 GG，从而发生在 340 nm 处吸光度的下降变化，可进行连续监测法。通过测定
14、FAPGG 在 340nm 处吸光度下降的速度可计算出血管紧张素转换酶的活性。 FAPGG ACE FAP + GG 8、胱抑素、胱抑素 C 水平测定水平测定 胱抑素 C， 也称半胱氨酸蛋白酶抑制剂 C( Cystatin C)是一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂， 也被称为 -微量蛋白及 -后球蛋白，广泛存在于各种组织的有核细胞和体液中,是一种低分子量、碱性非糖化蛋白质，分子量为 13.3KD，由 122 个氨基酸残基组成,可由机体所有有核细胞产生，产生率恒定。循环中的胱抑素 C 仅经肾小球滤过而被清除，是一种反映肾小球滤过率变化的内源性标志物, 相关产品：相关产品： 货号货号 简称简称 英文名称英文
15、名称 中文名称中文名称 CAS# / EC# 备注备注/用途用途/纯度纯度 酶酶 100616 ACO Acyl-CoA Oxidase 酰基辅酶 A 氧化酶 EC 1.3.3.6 用于游离脂肪酸浓度检测,主要催化长链脂肪酸-辅酶 A 的氧化反应 100618 ACS Acyl-CoA synthetase 酰基辅酶 A 合成酶 EC 6.2.1.3 用于游离脂肪酸浓度检测 102025 ADA Adenosine Deaminase 腺苷脱氨酶 EC 3.5.4.4 1020 SAHAdenosylhomocysteinase 腺苷高半胱氨酸 EC 可以可逆25 H 水解酶 3.3.1.1
16、地催化 S-腺苷高半胱氨酸分解成腺苷和高半胱氨酸。 108368 ASO Ascorbate oxidase 抗坏血酸氧化酶 EC 1.10.3.3 用于抗坏血酸浓度检测或者消除临床诊断中抗坏血酸的干扰 178588 BOD Bilirubin oxidase 胆红素氧化酶 EC 1.3.3.5 用于胆红素浓度的检测 116983 CAT Catalase 过氧化氢酶 121955 CHER Cholesterol esterase 胆固醇酯酶 121988 CHOD Cholesterol Oxidase 胆固醇氧化酶 121977 CRH Creatinase 肌酸酶 EC 3.5.3.3 和肌酐、肌氨酸氧化酶可用于肌酐和肌酸的酶法检测
