乌贼墨中抗菌及抗肿瘤生理活性物质的研究

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1、上海水产大学硕士学位论文乌贼墨中抗菌及抗肿瘤生理活性物质的研究姓名:杜铁平申请学位级别:硕士专业:水产品加工及贮藏工程指导教师:周培根2003.5.16摘要本文主要侧重从乌贼加工副产物的和用角度磁发,对鸟贼墨中的生携活性嬲矮进行研究,以裳为乌贼加工中废弃物的综合利朋提供线索。重煮磷究了乌贼墨中婉辫瘸活赣耪霞静提取及冀抗瓣瘸活毪和乌贼墨申撬煎活牲物质的提取及其抗藤活性。第一部分为鸟贼蹩蒸本成分的确定和乌贼墨率骚自多糖( P G s )纯他及摭肿瘤活性研究。乌贼墨缝脱脂制成丙酮干粉,然后采糟T r i s - H C l 缓洚溶液播撵,通过燕交试验虢定提取互嫠,焉提取盼糨蟹是多糖对肿瘤缨胞傲体外细

2、胞毒实验,结果表明乌贼墨提取物蛋自多糖对黑人窗颈癌细脆无明显的髂外缁脆毒作瘸。第二部分对乌贼墨抗菌活性进行了研究。乌贼墨中抗菌活性物震麓提敢分离方法,裰撵M o e h i z u k i 翁方法藕侔改变。乌贼墨中挽菌活性物质为黄色吸潮性粉寒,该物成的褥率为O 。5 2 。对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有摔菌作用,并对其攘菌特性遴行研究;将该提取物与溶菌酶的部分性质进行比较,得出该提取物与溶菌酶性覆存在鼹著差异;将该提取裙进行鑫罢橱,发瑷该提玻物主要包含两个组分。关键谣:乌贼墨;抗胖瘸活性;抗菌活性;分离;提取上海水产大学硕士学位论文A b s t r a c tT h i sp r o j e

3、c tw a sc o n c e m e da b o u tt h eu t i l i z a t i o no fc u t t l e f i s hi n kw h i c hi st h eb y p r o d u c to fc u t t l e f i s hp r o c e s s i n g T h eb i o a c t i v t i a ls u b s t a n c e so fc u t t l e f i s hi n kw e r es t u d i e d A 1 1t h e s ew o r kw e r ed o n et of i n

4、daw a yt og o o du s eo ft h ew a s t eo fc u t t l e f i s hp r o c e s s i n g T h ep a p e ri sm a i n l yc o m p o s e do f t w op a r t sF i r s t l y , t h ee s s e n t i a lc o n t e n t so fc u t t l e f i s hi n kw e r ed e t e r m i n e d ,t h eP G sw e r ep u r i f i e da n dp r e p a r e

5、 df r o mc u t t l e f i s hi n ka n dt h ea n t i t u m o r a i lc h a r a c t e r so ft h i ss u b s t a n c ew e r es t u d i e di nt h ef i r s tp a r to ft h i sp a p e rT h ec u t t l e f i s hi n kw a sd e g r e a s e di na c e t o n ea n dab l a c kp o w d e rw a so b t a i n e d 。T h e nt h

6、 eb l a c kp o w d e rw a se x t r a c t e dw i t hT r i s - H e lb u f f e r , t h eo r t h o g o n a lt r a i lw a sd o n et od e t e r m i n ee x t r a c t i o np r o c e s s i n g T h ec r u d eP G sp o w d e rw a so b t a i n e da n da n t i t u m o re x p e r i m e n to nt u m o rc e l l si nv

7、 i t r ow a sd o n e ,i tw a sf o u n dt h a tt h eP G sd i dn o ts h o wt h ed i r e c tc y t o t o x i ca c t i v i t y T h ea n t i b a c t e r i a le f f e c to ft h ee x t r a c tf r o mi n k s a co fc u t t l e f i s ho nb a c t e r i aw a ss t u d i e di nt h i sp a r t T h ee x t r a c t i o

8、 nm e t h o dw a sm o d i f i e db a s e do nt h a to fM o c h i z u k i 。T h ee x t r a c tw a sy e l l o wh y g r o s c o p i cp o w d e ra n di t sy i e l do b t a i n e d0 5 2 T h ee x t r a c th a dt h ea n t i b a c t e r i a le f f e c to nS t a p h k l o c o c c u sa u r e u sa n dE s c h e

9、r i c h i ac o l i S o m eo ft h ec h a r a c t e r so ft h ea n t i b a c t e r i a ls u b s t a n c ew e r es t u d i e d C o m p a r i n gt h i ss u b s t a n c ew i t hl y s o z y m e ,i tw a sf o u n dt h a tt h ed i f f e r e n tb e t w e e nt h e mw a si ne v i d e n c e上海水产大学硕士学位论文T h i sp o

10、 w d 嚣w a sf i l t e rb yD E A ES e p h a r o s eC L - 6 Bg e lc o l u m n ,t w om a i n l yf r a c t i o n sw e r eo b t a i n e d 。K e y w o r d s :c u t t l e f i s hi n k ;a n t i t o u m o r ;a n t i b a c t e r i a l ;s e p a r a t i o n ;e x t r a c t i o nJ 二海水产大学硕士学位论文日U孬乌贼( C u t t l e f i

11、 s h ) 属于软体动物f ( 肋“mM o l l u s c a ) 头足纲( ( :l a s sC e p h a l o p o d e ) 鸟贼日( S e p i o i d e a c f i 力乌贼科( S e p i d a c K i 砖r t e i n ) 乌贼属( S e p i aL i n n a e u s ) 的一种海洋动物,具有较高营养和多种药用功能。其种类繁多,常见的有:金鸟贼( S e p i ae s c u l e n t aH o y l e ) 、虎斑乌贼( S e p i a p h a r a o n i sE h r e n b e r

12、 g ) 、自斑乌贼( S e p i a l a t i m a n u s Q u o ye t G a i m r d ) 、拟目乌贼( S e p i a 啦i d a s G r a y ) 、曼氏无针鸟贼( S e p i a l l am a i n d r o n id eR o c h e b r u n e ) 等。每1 0 0 9 乌贼鲜品含:蛋白质1 7 1 9 ,脂肪O4 9 ,碳水化合物O2 9 ,热量3 0 7 k J ,灰分1 3 9 ,钙1 0 4 m g ,磷1 0 9 m g ,铁微量,维生素A1 2 0 国际单位,核黄素0 0 7 m g 。同外在研究乌

13、贼墨时将动物来源范围定为整个乌贼类动物,但是据中国药用动物志记载,我国作为药用的乌贼仅为乌贼科的乌贼属动物金乌贼( S e p i ae s c u l e n t aH o y l e ) 、针乌贼( s e p i aA n d r e a n a ) 、无针乌贼属的曼氏无针乌贼( S e p i a l l a,”“i 胛d r o n id eR o c h e b r u n e ) 2 1 。表0 一l 几种常见的乌贼在中国近海的地理分布T a b0 1T h ed i s t r i b a t i o no f t h ec o m m o nc u t t l e f i s

14、 h e sa tC h i n e s en e a rs e a种名分布金乌贼虎斑乌贼白斑乌贼拟日乌贼罗氏鸟贼针乌贼曼氏无针乌贼渤海黄海东海南海及菲律宾海域东海南海东海南海东海南海东海南海黄海日本北部海岸北到H 本海,南到马来群岛海域,西到印度东海岸乌贼的图片:图0 1 乌贼F i g0 1C u t t l e f i s h三二海水产大学硬圭学位论文鸟贼类的避年产量情况岛贼是我国近海重要的头足动物,是我闲重要的海洋濑照资源。磐陵若全球交疆,褥更魉骞牵毽予鸟簸蕊生长、繁殖,乌酸鹣瓷添会逛步加强1 3 。4 l 。表0 - 2 我国及全球1 9 9 4 - - - 2 0 0 0 年乌贼辅

15、捞统计产量( 葶位m t )T a b0 * 2T h ec a p t u r ep r o d u c t i o no f c u t t l e f i s ho f c h i n aa n da l lt h ew o r l d ( U n i tr o t )从表0 - 2 褥出,从t 9 9 4 年到2 0 0 0 年我国和全球乌贼总产量有增有减,但毂体t 擎上秀趋势。1 鸟贼墨的化学性质乌贼墨存在于墨囊中,是乌贼遇到天敌时喷出来染黑周围水域的黑色物质,以溪毳0 天敌褫鹭窝寐疼天敬溪觉,乌藏罐笼方式述叟。不强乌虢豹麓泞懿量巧i 黼,其干重的变化范围约为1 1 0 克,墨汁约占

16、全部乌贼体重的1 2 8 。墨汁是由肉H 艇看巧i 到的熙色颗粒构成的粘稠的混悬液,每毫升约2 0 0 毫克颗粒,乌贼墨颗粒成璩壁,惑经在9 0 2 5 0 h m 之润蛩l 。乌簸墨静伍学成分是黑色素翻鬣鑫多耱复台体,黑色素怒引哚醌( 吲哚5 ,6 醌与2 羧基吲哚,5 ,6 - 醌) 的雾聚物,与蛋结合或爿i 结合 4 J 。乌贼墨汁中粗蛋自含爨为1 0 0 8 ,椒脂肪含量为1 3 4 。其中,尽铤和瑟耱酸含量占憨穗耱熬4 3 4 ,鬻耱酸主要缀成楚涟酸帮稼藕漓酸,酒酸止i 总脂肪酸的2 63 5 ;岛贼墨中含1 6 种氨基酸,总量达9 9 2 2 ,以天f J 冬氨酸含最最,盏鸟贼墨黑色素扫描显微镜观察显示是幽黑色素单体堆积而成的I ”,由x 一鸯孝线光瞧子髓谱遴一步疆究表鹤糕龟素包菇5 ,6 - 二羟基萌舔程5 ,二羟上海水产大学硕士学位论文基吲哚2 羧酸组成的结构【9 】。通过M A L D L M S 图谱,并和黑色素的图谱相比教,鉴定乌贼墨黑色素中含有分

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