《HPLC-ELSD测定醒脑再造胶囊中黄芪甲苷的含量》由会员分享，可在线阅读，更多相关《HPLC-ELSD测定醒脑再造胶囊中黄芪甲苷的含量（6页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1HPLC-ELSD 测定醒脑再造胶囊中黄芪甲苷的含量【摘要】 目的 建立醒脑再造胶囊中黄芪甲苷的含量测定方法。方法 采用 HPLC-ELSD 法,Phenomenex Gemini C18 色谱柱(250 mm4.60 mm,5 m),流动相：乙腈-水(3664)；流速：1.0 mL/min；漂移管温度：105 ；载气流速： 2.7 L/min。结果 黄芪甲苷在 0.4862.43 g范围内呈线性关系,r0.999 7；平均回收率为 100.5%(n6),RSD0.3%。结论 本方法准确、灵敏度高、重复性好,可作为该药品的质量检测标准。 【关键词】 醒脑再造胶囊；黄芪甲苷；高效液相色谱 -蒸
2、发光散射检测法；含量测定Abstract：Objective To establish a quantitative method for Astraloside in Xingnao Zaizao Capsules by HPLC-ELSD. Methods HPLC-ELSD separation was achieved on Phenomenex Gemini C18 column (250 mm4.60 mm, 5 m) and mobile phase consisted of acetonitrile-water (3664). The flow rate was 1.0 mL/
3、min, drift tube temperature was 105 , and gas flow rate was 2.7 L/min. Results The calibration curve was linear in the range of 0.4862.43 g (r0.999 7). The average recovery rate was 100.5% (n6), RSD was 0.3%. 2Conclusion The method is rapid, accurate and reliable, and the method can be used as the q
4、uality standard for Xingnao Zaizao Capsules.Key words：Xingnao Zaizao Capsules；Astraloside；HPLC-ELSD；content determination醒脑再造胶囊收载于卫生部药品标准中药成方制剂第 4 册,具有化痰醒脑、祛风活络功效。用于神志不清、语言蹇涩、口角流涎、肾虚痿痹、筋骨酸痛、手足拘挛、半身不遂及脑血栓形成的恢复期和后遗症1。参照 2005 年版中华人民共和国药典 (一部)中黄芪甲苷的含量测定方法2,本试验建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)测定醒脑再造胶囊中黄芪甲苷的含量
5、。本方法准确,灵敏度高 ,重复性好 ,可用于醒脑再造胶囊的质量控制。1 仪器与试药日本岛津 LC-10AT VP 高效液相色谱仪,日立 ALLTECH ELSD2000 型蒸发光散射检测器,SPD-10AT VP 型自动进样器。黄芪甲苷对照品由中国药品生物制品检定所提供(批号 110781-200512；规格： 20 mg,供含量测定用) 。醒脑再造胶囊由吉林华侨药业股份有限公司提供(批号 20060903、20061010、20061221) 。3乙腈为色谱纯,水为纯化水, 其他试剂均为分析纯。2 方法与结果2.1 色谱条件色谱柱：Phenomenex Gemini C18(250 mm4.
6、60 mm,5 m),流动相：乙腈-水(3664)；流速：1.0 mL/min；柱温：40 ；日立 ALLTECH ELSD2000 型蒸发光散射检测器,漂移管温度：105 ；载气流速：2.7 L/min3；理论塔板数以黄芪甲苷峰计算应不低于 4 000,分离度(R)1.5。2.2 对照品溶液的制备精密称取黄芪甲苷对照品适量,加甲醇制成每 1 mL 含 0.1 mg 的溶液作为对照品溶液。2.3 供试品溶液的制备取装量差异项下的本品,混匀,研细, 取约 0.7 g,置索氏提取器中,加甲醇适量,冷浸过夜 ,再加甲醇适量 ,加热回流 4 h。提取液回收甲醇并浓缩至干,残渣加水 10 mL,微热使溶
7、解, 用水饱和的正丁醇振摇提取44 次, 每次 40 mL。合并正丁醇提取液,用氨试液充分洗涤 2 次,每次40 mL。弃去氨液, 正丁醇液蒸干, 残渣加水 10 mL 使溶解,放冷。通过 D101 型大孔吸附树脂柱(内径 1.5 cm,长 12 cm),以水 50 mL 洗脱, 弃去水液, 再用 40%乙醇 30 mL 洗脱,弃去洗脱液,继用 70%乙醇80 mL 洗脱,收集洗脱液 ,蒸干,用甲醇溶解并转移至 5 mL 量瓶内,加甲醇至刻度,摇匀, 即得。黄芪甲苷对照品、样品和阴性对照色谱图见图 1。2.4 线性关系考察精密称取黄芪甲苷对照品的甲醇溶液(0.097 2 mg/mL),分别精密
8、吸取 5、10、15 、20、25 L测定, 以对照品质量的自然对数为横坐标, 以峰面积的自然对数为纵坐标, 绘制标准曲线。结果表明,黄芪甲苷在 0.4862.43 g范围内线性关系良好,其线性对数方程为：Y 1.952 6X13.628 6(r0.999 7)。2.5 稳定性试验取醒脑再造胶囊(批号 20060903),按“2.3” 项下方法制备供试品溶液,分别于配制后 0、2 、4、8、12、24 h 精密吸取样品溶液20 L,注入液相色谱仪,测定峰面积。结果表明,黄芪甲苷在 24 h 内基本稳定,RSD1.0%。52.6 精密度试验精密吸取供试液 20 L,注入液相色谱仪,重复进样 6
9、次,结果RSD 0.6%。2.7 重复性试验分别取同一批样品 6 份, 按“2.3”项下方法制备供试液,测定,含量为 0.203 7 mg/粒,结果 RSD1.1%。2.8 加样回收率试验精密称取已知含量的同批供试品(批号 20060903,含量为0.203 7 mg/粒)6 份, 分别精密加入对照品溶液(0.101 6 mg/mL) 2.0 mL,依法测定 ,计算平均回收率为 100.5%,RSD0.3%,结果见表1。表 1 加样回收率试验结果（略）2.9 样品测定(见表 2)表 2 黄芪甲苷含量测定结果（略）3 讨论6在色谱条件的选择过程中,曾对乙腈-水(3268)、乙腈-水(3466)、
10、乙腈 -水(3664)流动相做了系列比较,结果表明,采用乙腈-水(3664)作为流动相系统分离效果好,峰形对称,保留时间适宜,杂质峰达到基线分离,阴性无干扰, 因此,本试验采用乙腈-水(3664)作为流动相。不同的样品需要不同的条件,蒸发光散射检测器的载气流速和漂移管温度对结果影响比较大,是影响本试验结果的重要参数,本试验选择的条件可获得理想的信噪比和基线。【参考文献】1 中华人民共和国卫生部.卫生部药品标准中药成方制剂(第 4 册)S. 1991.218.2 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)S.北京：化学工业出版社,2005.212.3 马艳蓉, 刘 泓,柴国林,等.HPLC-ELSD 测定黄芪中黄芪甲苷含量及相关试验条件选择的探讨J.现代中药研究与实践,2003,17(6)：1719.
