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1、 毕业设计(论文)摘 要本次研究采用的是海藻酸钠为载体,利用包埋法固定葡萄糖淀粉酶。研究得出了制备时的给酶量、氯化钙浓度、形成时间对固定化酶的影响,在此基础上,也进一步研究了固定化酶的米氏常数和重复使用稳定性。在单因素实验基础上,通过三因素三水平正交试验得出,氯化钙浓度为 2%,形成时间为 3.5h,给酶量为 22mg 是最佳组合,单位质量的酶活力为 12151U/g。游离酶的 Km为 2.50mg/ml,固定化酶的 Km为 3.63mg/ml。通过固定化之后,酶对底物的亲和力降低了。随着使用次数的增加,酶活性逐渐降低,但是每次反应10min,在使用 10 次之后,酶活性还有原来的 50%。关
2、键词关键词:海藻酸钠;葡萄糖淀粉酶;固定化酶毕业设计(论文)IAbstractThis study uses the sodium alginate as the carrier, the glucamylase was immobilized using the method of embedding . In this experiment, we know the influence of the amount of enzyme, concentration of calcium chloride and curing time on immobilized enzyme. On th
3、is basis, we make further study on Michaelis constant and the stability of repeated use of the immobilized enzyme. On the basis of single factor experiment, we do the three factors and three levels orthogonal test. When the concentration of calcium chloride is 2%, the curing time is 3.5h and the amo
4、unt of enzyme is 22mg, we can get the best combination, unit mass of enzyme activity is 12151 u/g. The Km of free enzyme is 2.50 mg/ml, the Km of immobilized enzyme is 3.63 mg/ml. After the immobilization, enzyme reduces the affinity to the substrate. With the increase of use, enzyme activity decrea
5、ses gradually. Immobilized enzyme retained 50% activity after 10 reuses with 10 min of each reaction time.Keywords: calcium alginate; glucamylase; immobilized enzyme毕业设计(论文)目 录摘 要 .IAbstract.II1 绪论.11.1 葡萄糖淀粉酶的简介.11.1.1 葡萄糖淀粉酶的性质.11.1.2 葡萄糖淀粉酶与淀粉的反应.11.1.3 葡萄糖淀粉酶与 -淀粉酶 .11.2 酶固定化的方法.11.2.1 吸附法.11.2.
6、2 包埋法.21.2.3 交联法.21.2.4 结合法.21.3 载体材料的介绍.21.3.1 海藻酸钠的性质.21.3.2 海藻酸钠与氯化钙的反应.21.4 总体操作流程.31.5 研究目的和意义.32 海藻酸钙固定化葡萄糖淀粉酶的方法研究.52.1 材料.52.1.1 实验材料和试剂.52.1.2 仪器与设备.52.2 测定方法.62.2.1 斐林试剂的标定.62.2.2 游离酶活力的测定.62.2.3 固定化酶活力的测定.72.3 试验方法.72.3.1 固定化酶的制备.72.3.2 海藻酸钙包埋法固定化葡萄糖淀粉酶的研究.7毕业设计(论文)I2.3.3 正交试验.82.4 结果与讨论.82.4.1 固定化酶.82.4.2 给酶量的确定.92.4.3 CaCl2浓度的确定.102.4.4 形成时间的确定.112.4.5 正交试验.122.5 小结.143 海藻酸钙固定化葡萄糖淀粉酶特性的研究.153.1 材料和方法.153.1.1 实验材料和试剂.153.1.2 仪器与设备.153.2 测定方法.