广东省人民医院临床病原微生物标本送检指南

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1、1广东省人民医院临床病原微生物标本送检指南广东省人民医院临床病原微生物标本送检指南病原学诊断是现代医学的特征，病原学诊断的水平是医院素质的标志。在感染性疾病的诊断和治疗中，正确采集标本明确病原学诊断至关重要。本指南分为标本采集指征、采集时机和方法、送检方法、检测发报告时间和送检标本注意事项五部分。一、标本采集指征：一、标本采集指征：（一）血及骨髓标本的采集指征：感染性疾病拟诊菌血症（一）血及骨髓标本的采集指征：感染性疾病拟诊菌血症1、血培养指征：1.1 寒战、发热（38）或低体温（36） ；1.2 白细胞增多（计数10.0109/L） ，特别有“核左移”时；1.3 发热并肝脾肿大、关节疼痛；1

2、.4 危重疾病：皮肤粘膜出血、昏迷、多器官衰竭，血压降低，C 反应蛋白升高及呼吸加快，血液病患者出现粒细胞减少，血小板减少等；1.5 重症肺炎、心内膜、骨髓、中枢神经等重要器官感染；1.6 老年菌血症患者，可能不发热或低体温，如伴有全身不适、肌痛或中风，可能是感染性心内膜炎的重要指征，应行血培养；1.7 新生儿败血症，因血培养阳性率低，应行尿液和脑脊液培养；1.8 肺炎链球菌与流感嗜血杆菌菌血症的患儿（特别是 2 岁以下的幼儿）一般多见于门诊，常伴有明显发热（38.5）和白细胞增多（20109/L） ，应行咽拭子培养。小儿咽部肺炎链球菌常与下呼吸道感染病原菌一致。2、骨髓培养标本采集指征：骨髓

3、培养和血培养的送检指征基本相同，而骨髓培养阳性率高。抗炎治疗无效，多次血培养阴性，病原菌不明确时，应行骨髓培养。当骨髓炎时或长期使用抗菌药物患者，亦应行骨髓培养。（二）尿液标本的采集指征：（二）尿液标本的采集指征：1、不明原因的发热，感染部位不明确时。2、有泌尿系感染症状：尿频、尿急、尿痛等。23、肉眼脓尿或血尿，尿道有脓性分泌物者。4、尿常规检查表现为白细胞或亚硝酸盐阳性。5、留置导尿管的患者出现发热并具备上述第 4 条。6、膀胱排空功能受损、疑合并有尿路感染。7、泌尿系统疾病手术前、疑尿路感染者。8、术前插尿管，病人清醒后主诉有尿路刺激症状者。（三）粪便标本常规检查及培养指征：（三）粪便标

4、本常规检查及培养指征：1、腹泻：1.1 黏液、脓、血粪便；1.2 发热；1.3 里急后重；1.4 严重和持续性腹痛；1.5 有不洁饮食史，曾去过卫生条件差的地区、肠道传染病疫区，或与肠道传染病患者接触；1.6 肠道传染病检疫和隔离；1.7 粪便直接涂片白细胞增多的炎性肠病2、高热惊厥：多见于婴幼儿和小儿中毒性菌痢、即便没有腹泻等消化道症状，也应行肛拭子送检。（四）痰、上呼吸道和支气管冲洗液标本的采集指征（四）痰、上呼吸道和支气管冲洗液标本的采集指征：当发热咳嗽、咳痰、痰量增多、痰中带血或脓痰、痰有恶臭、呼吸困难等提示支气管或肺部感染体征。（五）采集导管相关感染标本的指征：（五）采集导管相关感染

5、标本的指征：当有如下指征之一，怀疑置入血管内导管相关感染时：1、静脉穿刺部位红肿发炎或有分泌物。2、导管插入处周围皮肤红肿热痛并除外理化因素所致。3、经血管介入操作，发热38，局部有压痛，无其它原因可解释。4、长时间留置静脉导管、肠外营养（经深静脉导管）伴不明原因发热。3有以上情况之一需进行导管尖端培养和血培养，应同时在同侧及对侧抽血对照做血培养，以鉴别导管尖段寄植菌或导致血液感染性疾病。（六）其它（六）其它：1、怀疑白喉、百日咳、识别金黄色葡萄球菌携带者、为预防溶血性链球菌感染、免疫性疾病如急性肾小球肾炎、风湿热等需做鼻咽分泌物培养。2、当女性患者出现阴道分泌物增多，异味恶臭，外阴瘙痒、灼痛

6、、尿频、尿急、性交痛等生殖道感染疾病时，需留取阴道拭子、子宫颈分泌物、宫颈内拭子、子宫内抽吸物等送检微生物。3、当出现局部脓液，怀疑需氧菌和厌氧菌混合性感染（尤其是深部脓肿） ，有时即使皮肤甲沟感染也需留取脓汁及病灶渗出物送检。怀疑细菌、真菌、结核菌等脑膜炎或中枢神经系统感染的应采集脑脊液标本进行病原学分离鉴定。4、感染性疾患病原学诊断不明时，有手术标本应送检微生物，有条件时，应取相关部位活体组织送检。怀疑感染性胸膜炎、腹膜炎，关节炎或滑膜炎可取穿刺液送检微生物。对怀疑胆道感染或伤寒、副伤寒带菌者可做胆汁培养。二、采集标本的时机和方法：采集标本的时机和方法：所有标本尽量在感染的急性期和使用抗生

7、素前采集，使用过抗生素及正在使用抗生素的病人，最好在用药间隙病人抗生素药物浓度低峰时采集；血培养尽可能连续采血 2-3 次以上，提高标本阳性率；分次抽血时最好选择不同的静脉，减少标本污染的机率。（一）血和骨髓标本：（一）血和骨髓标本：1、一般情况下应在病人发热初期或发热高峰时采集。原则上应选择在抗菌药物应用之前，在 24 小时内采集 23 份血标本；对已用药而病情不允许停药的患者，应在下次用药前采集；对于使用了抗生素的病人病情允许停药的患者，应停药 2 天采集。2、血培养病原菌阳性、敏感抗生素应用 35 天后应该复查血培养，更改抗生素方案之前尽可能进行各种标本的病原菌复检。43、对间歇寒战或发

8、热病人，应在寒战或体温高峰到来之前 0.51 小时采集血液，或于寒战或发热后 1 小时进行。4、怀疑感染性心内膜炎，应采集 3 份血标本作血培养，每 2 份标本之间至少间隔 1 小时。抽血时间及当时体温与血培养阳性率无明确关联。通常在 12小时内采集 3 份血标本，如果 24 小时后阴性，再次采集 3 份以上血标本。5、可疑急性原发菌血症、真菌菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎、肺炎，应在不同部位采集 23 份血标本。6、怀疑为布鲁菌病应在预期发热前取血。7、怀疑为细菌性脑膜炎者应在发热的头 12 天内抽血。颅内感染腰穿脊液及脑室引流管近颅端均应送检，标签注明。8、为提高血液标本微生物检出率、避免

9、污染，建议抽血针头用后弃置，换一未使用过的消毒针头将血液注入培养瓶内。（二）尿标本：（二）尿标本：以首次晨尿为最佳，必要时视情况随时留取。尿细菌培养标本按常规应于病人使用抗生素之前或停药 5 日以上，留取清晨第一次清洁中段尿，保证尿在膀胱内有 68 小时停留时间，取到尿标本后要在 1 小时之内做尿细菌培养（否则应冷藏在 4冰箱内） 。急性肾盂肾炎或慢性肾盂肾炎急性发作者，按尿细菌培养的常规，原则上应于入院次日留尿液标本。做细菌培养之后，才能开始抗生素治疗。由于尿频，即使在入院次日晨留尿也达不到尿在膀胱内保留 68 小时的要求者，可考虑即刻留尿。尿频尿急无法忍尿者应考虑在最大忍尿后留标本。中段尿

10、采集应注意清洁尿道口，弃去前段尿再留中段尿。（三）痰及咽试子标本：（三）痰及咽试子标本：1、痰：在患者新入院时有咳嗽咳痰或必要时即可送检，通常以晨痰最好；也有报道建议送痰标本 3 次可提高阳性率：即时痰(就诊时咳出的痰)、晨痰(早晨起床后深咳出的痰)、夜间痰(就诊夜间咳出的痰)。晨痰自然咳痰法应注意：患者清晨起床后，用清水反复漱口后深呼吸几次5用力自气管咳出第一口痰于灭菌容器内，立即送检。2、纤支镜取痰送检：病原菌用保护刷防污染。3、鼻咽拭子：于抗菌药物治疗前为好，亦多以晨起后采集为宜。（四）粪便标本：（四）粪便标本：腹泻病人应在急性期用药之前采集新鲜粪便。（五）导管相关感染标本方法（五）导管

11、相关感染标本方法、导管尖端培养：无菌方法将导管尖端剪下，置于灭菌干燥试管中送检。（1）穿刺皮肤周围彻底清洁消毒后拔管；（2）用无菌剪剪下导管尖端 5cm，置于无菌容器中，立即送检。2、血培养:同普通血培养。3、导管路径血培养:如暂不允许拔除导管时,在导管穿行的路径上采血，取 0.5ml 血标本，分别滴注到巧克力琼脂培养皿上进行培养。（六）其它：（六）其它：标本如伤口分泌物、脑脊液、骨髓、胸腹水、胆汁等均以感染急性期及时留取为最佳。三、送检方法三、送检方法（一）普通细菌培养：（一）普通细菌培养：标本类型标本类型 采集采集方法方法采集容器及采集容器及 采集量采集量运送及保存运送及保存报告报告 时间

12、时间备注备注血液、骨血液、骨 髓髓一、消毒：1、按常规消毒培养瓶盖橡皮 塞。2、按常规消毒穿刺部位。 二、采血次数： 1、急性败血症：24h 内在不同部位抽血 3 次或多次。 2、感染性心内膜炎：应用抗生素之前至 少采血三次，间隔 1 小时以上，分别行需 氧、厌氧培养；应用抗生素之后至少停药 三天再采血行细菌培养。 3、发热待查：间隔1 h 于不同部位采1、需氧培 养用需氧瓶 (蓝色瓶盖)、 厌氧用厌氧 瓶(黄色瓶 盖)； 2、真菌培 养用需氧瓶；3、成人每室温7 天1、未抽血 的培养瓶 室温保存。2、抽血后 未能及时 送检的培 养瓶应室 温保存， 避免冷藏623 份血，24 h 内不超过 3

13、 次，若培养 24 h 阴性再采 23 份血。份采血量为 510 ml； 4、儿童每 份采血量为1-5 ml 5、骨髓为1-2ml以影响细 菌生长。 3、患者标 签切勿贴 在条形码 上。脑脊液脑脊液1、由临床医生无菌操作采集；2、如果只 有一管 CSF 应该将其先送往微生物实验室； 3、脑脓肿的抽吸物或活检组织有必要检 测厌氧菌或寄生虫。1、消毒试管 2、最低要求 量为 2 ml室温（不能 冰冻）3-5 天细菌培养 标本不能 冷藏穿刺液穿刺液 ( (如胸腹如胸腹 水、心包水、心包 液、关节液、关节 液、胆汁液、胆汁 等等) )由临床医生无菌操作采集1、消毒试管 2、采集量为10 ml室温（保存

14、 时间大于 2 小时则放 4冰箱）3-5 天为防止穿 刺液凝固， 建议在消 毒试管中 预先加入 肝素女性中段女性中段 尿尿取晨尿（1 小时内送至细菌室）：1.用肥 皂和水清洗尿道口；2.用无菌纱布块轻洗； 3.分开阴唇，排尿；4.在排出几毫升尿后， 不要停止，接取中段部分的尿液。1、消毒试管 2、采集量为10 ml保存时间大 于 1 小时则 放 4冰箱3-5 天男性中段男性中段 尿尿取晨尿（1 小时内送至细菌室）：1.用肥 皂和水清洗龟头；2.用无菌纱布块轻洗； 3.回拉开包皮，排尿；4.在排出几毫升尿 后，不要停止，接取中段部分的尿液。1、消毒试管 2、采集量为10 ml保存时间大 于 1

15、小时则 放 4冰箱3-5 天粪便粪便尽量挑取有脓血部分转入运输培养基中运 送。 肛拭子培养小儿菌痢尤其要做1、专用粪便 培养基； 2、采集量大 于 2 g室温（保存 时间大于 2 小时则放 4冰箱）3-5 天痰，支气痰，支气 管肺泡灌管肺泡灌 洗液，支洗液，支 气管刷取气管刷取 物物取晨痰：1、要在护士或医生的指导下取 标本。2、先要让患者用凉开水清洗或漱 口以清除口腔内的正常菌群。3、指导患 者深咳嗽以获得下呼吸道的标本，放入一 无菌的容器中。4 、儿科患者不会咳出痰， 由医生决定获取标本方式由医生决定获取标本方式。1、专用无菌 痰杯 2、采集量1 ml室温3-5 天咽拭子咽拭子1、用一压舌

16、板压住舌 2、用无菌拭子在后咽部，扁桃体，及发 炎部取标本。1、消毒试管 2、适量室温3-5 天生殖道分生殖道分 泌物（精泌物（精 液、前列液、前列 腺液、阴腺液、阴清洗外尿道后采集标本，一小时内送到微 生物实验室。1、消毒试管 2、适量室温3-5 天7道宫颈分道宫颈分 泌物等）泌物等）脓液及创脓液及创 口分泌物口分泌物1 用无菌生理盐水擦洗去表面的渗出物。 2 抽取组织或脓液标本优于拭子标本。如 果不得不用拭子，则一只作培养，一只作 革兰氏染色。1、用消毒试 管 2、适量室温3-5 天（二）（二） 、其他细菌检测：、其他细菌检测：项目名称项目名称标本类型标本类型采集采集方法方法标本容器标本容器标本量标本量发报告时间发报告时间号菌培养号菌培养粪便取水样便碱性蛋白胨 水适量36 小时抗酸杆菌培养抗酸杆菌培养 （无药敏）（无药敏）各类标本参见各类标本采集消毒试管适量60 天涂片找抗酸杆菌涂片找抗酸杆菌各类标本（浆膜腔 液用抗凝管）尿标本取 24 小时 尿沉渣消毒试管10-15ml1 天涂片找细菌、真涂片找细菌、