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1、其它胃粘膜中S u r v i V i n 与c y c Ii n D l 表达及其相关性湖南衡阳南华大学附属第二医院消化内科( 4 2 10 0 1 )成洪震张明亮严悦卿刘可轩S u r v i v i n 是凋亡抑制蛋白( i n h i b i t o ro fa p o p t o s i sp r o t e i n ，I A t ) 家族成员之一，正常或成熟组织不表达，在各种人体肿瘤组织中广泛表达，其独特的结构和生物学功能在肿瘤分子生物学研究中日益受到重视，C y c l i n D l 与肿瘤发生发展密切相关。本研究应用免疫组织化学染色( s P 法)检测1 2 例慢性浅表性胃炎
2、( C S G ) 、3 2 例胃粘膜肠上皮化生( I M ) 、3 2 例异型增生( 1 9 y s p l u s i a ) 和5 0 例胃癌组织( G C ) 中S u r v i v i n 与c y c l i n D l 表达，探讨两者表达在胃癌发生发展过程中的作用。材料与方法1 材料来源收集南华大学附属第一、第二医院病理科2 0 0 2 年1 月一2 0 0 4 年5 月存档石蜡标本9 0 例，其中 C S G l 2 例，I M 3 2 例，D y s 3 2 例均为胃粘膜活检标本，5 0 例G C 为手术切除胃癌标本。其中蹦组轻度1 0 例、中度1 2 例、重度l O 例；
3、D y s 组轻度1 1 例、中度“例、重度l o 例：癌前病变患者年龄2 7 - 7 8岁，平均5 3 岁：男3 5 例，女2 5 例。G C 组低分化3 5 例、高分化1 5 例；早期癌1 4 例。中晚期癌3 6 例；患者年龄3 2 - 7 4 岁，平均5 3 2 岁；男2 8 例，女1 7 例。所有胃癌患者临床资料来自住院病历，其余患者资料来自胃镜检查申请单。所有存档标本均经常规福尔马林固定，石蜡包埋连续切片，并经两位经验丰富的病理科医师复查确诊。所有患者术前均未予化疗及放疗。2 主要试剂S u r v i v i n 兔抗人多克隆抗体、C y c l i n D l 鼠抗人单克隆抗体、
4、广谱超敏S P 试剂盒、D A B 显色试剂盒均购于福州迈新生物技术有限公司3 免疫组织化学染色所取标本石蜡包埋组织，做成4 u m 厚l 勺连续切片，采用S - P 法，染色步骤参照试剂说明书。S u r v i v i n 和C y c l i n D l 试剂工作浓度为l ：1 5 0 ，检测前处理采用微波抗原修复，选用D A B 显色，以P B s 代替一抗作阴性对照，以已知的S u r v i v i n 和c y c l i n D l 阳性片作阳性对照。4 结果判定标准S u r v i v i n 蛋白阳性染色定位于细胞浆，C y c l i n D l 阳性染色主要位于胞核，
5、已抗体在胞浆或胞核出现棕黄色颗粒为阳性信号。两种抗体染色结果判定：每例标本随机计数l o 个高倍视野，计数每个高倍视野中1 0 0 个细胞中的阳性细胞数，取其平均数求其百分率作为结果。S u r v i v i n 及C y c l i n D l 阳性细胞数 O 0 5 ) 。表l 不同胃粘膜中S u r v i v i n 、C y c l i n D l 表达率删例数i 磊型墅矿C S G1 208 3 ( 1 1 2 ) 蹦3 22 1 9 ( 7 3 2 )1 5 ，6 ( 5 3 2 )D y s3 23 7 5 ( 1 2 3 2 )3 4 4 ( 11 3 2 )G C5 05
6、 4 0 ( 2 7 5 0 ) *4 8 0 ( 2 4 5 0 ) + +。，与同抗体I M 组比较，p 0 0 54 0 63 7 ，9 O 0 55 7 14 3 7 O 0 54 1 14 2 8 O 0 54 4 42 3 500 56 2 52 22 00 56 0 0 O 0 5 O 0 5 0 0 5 O 0 50 0 5 ) ，而组织分化差异具有统计学意义( p 0 5 ) ：C y c l i n D l 表达在肿瘤分化程度、血管浸润及淋巴结转移方面差异有显著性( p 0 0 5 ) 。 讨论S u r v i v i n ：基因除在胚胎组织和胸腺组织外，正常成熟组织均无
7、表达，但在各种人体肿瘤组织中均有过量表达。已有研究表明S u r v i v i n 具有抑制细胞凋亡、调节细胞周期、参与血管形成等功能对恶性肿瘤细胞的发生、发展和预后密切相关，是肿瘤特异性敏感性很高的瘤标。本实验结果显示，在慢性浅表性胃炎中未见表达，肠上皮化生、异型增生及胃癌组织中表达呈逐渐递增趋势，阳性率分别为2 1 9 、3 7 5 和5 4 ，说明S u 州v i n 在癌组织中的表达是一个渐进的过程，随着癌前细胞向癌细胞转化，其表达逐渐升高，这与S a m l a 在结肠癌和G r o s s m a n 在皮肤癌中的研究结果相类似。董吉顺等川研究显示，S l H v i v i n
8、 在4 6 例正常胃黏膜和异型增生细胞中均无阳性表达，与本实验结果不同，这是否与实验条件、组织抗体来源不同等因素有关还不清楚，还需要进一步研究。s u r v i v i n 在胃癌前病变中的表达，说明S u r v i v i n 异常表达发生在胃癌早期，使其可能作为一个较为早期的肿瘤标志物应用于临床诊断。S u r v i v i n 在高低分化胃癌组织中的表达率分别为2 9 4 和6 0 6 ，差异有显著性( p 0 0 5 ) ，提示s u r v i v i n 蛋白阳性表达率在一定程度上反映了胃癌的恶性程度，可以作为预后不良的参数指标。S u r v i v i n 表达与胃癌临床
9、分期和淋巴结转移血管浸润无明显关系，与国内学者在肺癌、子宫颈癌等研究结果一致，这提示在胃癌的进展过程中还受其他基因调控，是多基因参与多因素共同作用的结果。C y c l i n D l 主要功能是- _ G I S 期的转换而促进细胞周期，在G l 期进展中起限速控制作用，过表 达可使G l 期缩短，并降低细胞对有丝分裂原的依赖，促进细胞增殖。C y c l i n D l 在i C S G S 嘲表达， 肠上皮化生、异型增生中其表达逐渐上调，说明其异常表达是胃癌发生中的早期分子事件。本研究亦显示，早期与晚期胃癌之间C y c l i I f f ) l 表达率无显著性差异，说明t C y c
10、 l i n D l 过度表达存在于胃癌发生发展的整个过程。低分化、有血管浸润和淋巴结转移的胃癌, C y c l i n D l 表达率与高分化、无血管浸润和淋巴结转移比较具有显着性差异( p 0 0 5 ) ，随着分化程度降低和转移的发生C ) c l i n D l 表达上调，C y c l i n D l ：过表达在胃癌发生及发展中起墓要作用。因此检测c y c h n D l 基因与蛋白变化对判断胃癌的转移和恶性程度及评估预后有重要意义。本实验胃癌中s u r v i v i n 与C ) c l i n D l 的表达里正相关( 店0 0 5 ) ，表明两者在胃癌的发展中可能起协同
11、作用。有研究结果表明由于S u r v i v i n f 毙J 通过与( D K 4 结合，从而阻止p 2 1 ”发挥细胞增生抑制作用，C y c l i n D l 也能竞争抑制p 2 l ”17 0 ”的负性调节G l ，S 转换点作用，但两者间的具体作用机制尚待进一步阐明。朱红霞等研究表明，S u r v i v i n 的高表达可以引起l C y c l i n D l 蛋白表达水平 增高，突变型S u r v i v i n 可以引起C ) c 1 n D l 蛋白水平下调。提示：S u r v i v i n ：抑制细胞凋亡的同时，可能通过促使C y c l i n D l 的过表达，影响细胞周期的进行，使细胞持续增殖，导致肿瘤的形成。 参考文献( 略)消化道疾病的临床合理用药江西省靖安县中医院( 3 3 0 6 0 0 )吴剑消化道组织结构均为四层，即粘膜层，粘膜下层，肌层和浆膜层。消化道的生理功能为接纳，分解，消化食物和吸收食物中的营养成分，同时将食物残渣排出体外。因为粘膜层在表层，时刻接受食物以及消化液，故最易发生病变。冈此消化道疾病的病理特点是以粘膜层的炎性充血，水肿，继而糜烂，出血甚至产生溃疡为最常见。另外食物的运行依靠消化道肌层的平滑肌的不断收缩使消化道蠕动将食物以及食物残渣从食道一直送到直肠最后排出体外。而平滑肌的运动功能受2 0 l
