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1、血球计数仪白细胞通道计数时间延长对计数结果的影响AbbottCELL-DYN 1700 属三分类血球计数仪,是美国雅培公司产品,该仪器操作方便、质量精良、重复性好、故障率低,深受检验医生信任。随着测量标本数量的增加,血浆蛋白质会在钻石小孔上附着,导致钻石孔的孔径缩小,体现在血球仪的屏幕信息会显示出计数时间(Count time)的延长。当进行大批量体检测量时计数时间的延长更为明显。本研究旨在了解计数时间延长对血球计数结果的影响,以确定执行血球仪冲洗维护的时间标准,形成血球计数仪维护操作规程。1 材料与方法1.1 研究对象 标本来源为门诊患者标本,共 40 例;Abbott 公司原装校正血球,批
2、号: 16861。仪器:AbbottCELL-DYN 1700 三分类血球计数仪。试剂: Abbott 原装稀释液,冲洗液和溶血素。1.2 方法 抽取清晨空腹静脉血 1mL,置于 EDTA-K2 真空采血管中,温和混匀,室温保存;列入测试的检测项目包括:白细胞总数(WBC,109/L);淋巴细胞绝对值(LYM,109/L);单核细胞+嗜酸粒细胞+嗜碱粒细胞绝对值(MID,109/L);中性粒细胞绝对值(GRAN,109/ L);淋巴细胞百分数(L,% );单核细胞+嗜酸粒细胞+嗜碱粒细胞百分数(M,% );中性粒细胞百分数(G,% )。当大批量体检标本进行测定时,随检测标本的增多计数时间延长较
3、快速。将 40 例标本在白细胞通道计数时间的秒数处于 4. 504. 99(标记为 I)、5. 005. 49(标记为 II)、5. 506. 00(标记为 III)3 个时间段时插入体检队列中分别进行 3 次重复测定;同时将 Abbott 原装校正血球作为标本插入检测队列中一并进行测量,每管重复测量 10 次。以上 3 个时间梯度的重复测量过程均历时不超过 4 小时1。1.3 统计学处理 用 SPSS 13. 0 统计软件包,对不同计数时间段的血球计数结果作重复测量的方差分析(RepeatedMeasure),以 A=0. 05 为检验水准。2 结果2.1 Abbott 原装校正血球在 3
4、个计数时间段的重复测量结果 见表 1。2.2 40 例临床随机标本在 3 个计数时间段的重复测量结果 见表 2。2.3 40 例临床全血标本在 3 个计数时间段的 WBC 计数均值的变化 见图 1。3 讨论应用库尔特原理(Coulter)对血细胞进行分类计数,测量时,稀释后的样品液进入测量室左边,在测量室的右边上部接一负压装置,用以吸取样品液,在负压的抽吸下使稀释后的血细胞成单行通过测量室内的红宝石计数孔到达测量室右边。在宝石孔左右两边各放置一个电极,并在电极之间加一个恒定的电流。血细胞连续不断地通过小孔,就会产生一连串的电压脉冲。白细胞的脉冲幅度大,红细胞次之,血小板最小。利用以上规律,就能
5、很容易地将血细胞分类计数2。由于计数的小孔非常小,直径大概仅有几十微米(Lm),而血液稀释后形成的细胞悬液中除了正常的细胞外,有可能有纤维蛋白、血凝块以及各种杂质。因此,小孔堵塞就成为各种血球计数仪不可避免的常见故障。特别是血液中的纤维蛋白,在每次计数的过程中,都会有少量积累在小孔内侧。随着蛋白的不断积累,部分堵塞程度的不断增加,其计数时间会越来越长3,并出现相应的计数偏差。当积累达到一定程度,便会经历由部分堵塞渐进至完全堵塞。Abbott 原装校正血球因其质量精良,稳定性好而作为对照,与标本进行平行测定;结果显示临床标本组和 Abbott 原装校正血球组的检验项目中 WBC、L、GRAN、G
6、、MID、M 在 3 个计数时间段差异均有统计学意义(P0. 05),LYM 在 3 个计数时间段两组均无差异; 40 例随机临床标本组和 Abbott 原装校正血球组 3 个时段的统计检验结果一致。两组结果变化趋势的比较分析,WBC、GRAN 随计数时间延长均逐渐下降;MID、LYM 随计数时间延长变化不定。重复测量结果显示,以 A=0. 05 为检验水准,对 40 例随机临床标本 3 个计数时间段之间进行两两比较,与比较 P=0. 000,与比较 P=0. 001,与比较 P=0. 000,均有显著性差异。因此可以认为,随计数时间的延长,上机测量的全血标本的 WBC 计数值将会呈现出下降的趋势。当计数时间超出 5 秒后,应及时用酶液进行除蛋白冲洗,将计数时间降到 5 秒以下,是保证检验结果准确的重要步骤。对于计数时间的界定,不同品牌应用库尔物原理的血球计数仪可能会有差异,但遵循相同的原理和思路。本实验仅观察记录和统计 WBC 通道检测项目的计数结果,而随 RBC 通道计数时间延长对 RBC 相关测定结果的影响未作研究。
