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1、运动营养学实验报告运动营养学实验报告 姓名：_ 学号：_ 日期：_实验名称尿中核黄素的测定实验目的掌握荧光法测试尿中核黄素的方法和意义实验原理含有核黄素的溶液在紫外线下发黄绿色荧光，在稀溶液中荧光强度与核黄素浓度 成正比。核黄素可被低亚硫酸钠还原而失去荧光，故测定还原前后的荧光强度可 去除干扰性荧光物质的影响。主要仪器 和试剂仪器：970型荧光分光光度计、500ml烧杯、500ml量筒、镜头纸、加样枪、试管 、药匙、 试剂：1. 酸性水：取浓硫酸0.3ml，加蒸馏水至200ml 2. 核黄素标准储备液：准确称取25mg核黄素，溶于1000ml容量瓶中，用酸性水 稀释到刻度，移入棕色试剂瓶中，储
2、存在4冰箱中。 3. 核黄素标准工作液：取4.0ml核黄素标准储备液上清，用酸性水稀释到100ml ，移入棕色瓶中，用时现配。 4. 低亚硫酸钠实验主要步骤1. 样品：取尿样1.0ml，加酸性水19ml于一具塞试管内，混匀，在激发波长420nm和 发射波长530nm处测定荧光强度，记下读数A。然后取30mg低亚硫酸钠直接加入比 色杯内，摇匀，立即测定荧光强度，记下读数B。 2. 内标准：取尿样1.0ml加核黄素标准应用液1.5ml，加酸性水17.5ml，混匀，在同 样情况下测定荧光强度，记下读数C。取30mg低亚硫酸钠直接加入比色杯内，摇 匀，立即测定荧光强度，记下读数D。实验结果尿中核黄素含
3、量=-445.493-(-546.744)/-144.711-(- 543.011)15155=591g分析与讨论1、由于对仪器使用不是很熟悉，蒸馏过程中出现暂停现象。 2、因为有样品的对照滴定时估测到所需滴定的量，使操作变得简便。结论受试者尿中核黄素含量为591ug备注：受试者姓名： 性别： 尿液是否稀释：否课课后思考后思考题题 1.1. 维生素维生素B2B2的测试过程中有哪些注意事项？为什么？的测试过程中有哪些注意事项？为什么？ 答：1. 由于核黄素余光分解，整个操作应在避光实验室中进行。 2. 做内标准的目的是去除尿中可能存在的有荧光的物质。 3. 使用荧光剂时应用荧光红纳校正。 荧光红
4、纳溶液的配制：溶解25.0mg荧光红钠于少量水中，搅拌使其溶解后加水 至250ml，此为储备液。取0.25ml加水稀释成250ml，此为工作液。 校正步骤：先选择所需激发波长和发射波长，校正仪器零点，然后用荧光红钠 工作也校正荧光计，使指针在某一刻度，再测定样品的荧光强度。 2.2. 营养和运动对机体维生素营养和运动对机体维生素B2B2的影响都有哪些？的影响都有哪些？ 答：机体对维生素B2的需求似乎同能量的消耗或肌肉活动有关。维生素B2缺乏主要 发生在素食主义者身上。如果膳食里未含奶类食品或其他动物脂肪的话，那么机体 就有可能缺少维生素B2。 维生素B2与机体的有氧代谢能力关系密切。运动会导致机体对维生素B2的需求 量增加，尤其是生长发育期的儿童少年、控体重、减体重以及素食或不吃动物蛋白 的运动者，更要注意的是维生素B2的营养状况。核黄素主要存在于动物内脏中（如 肝、肾、心等），牛奶及蛋类含核黄素也较多，坚果类食品（如核桃、栗子、松子 、花生、瓜子等）含量也不错。若缺乏维生素B2，可适量补充以上食物。 3.3. 为何加入低亚硫酸钠？为何加入低亚硫酸钠？ 答：核黄素可被低亚硫酸钠还原而失去荧光，故测定还原前后的荧光强度可去除干 扰性荧光物质的影响。
