《羟甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂抗心室重塑作用及其机制的研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《羟甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂抗心室重塑作用及其机制的研究（85页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、华中科技大学博士学位论文羟甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂抗心室重塑作用及其机制的研 究姓名：刘宇宏申请学位级别：博士专业：内科学指导教师：曾秋棠20050501华中科技大掌同济医学院2 0 0 2 级博士掌位论文羟甲基戊二酰辅酶A 还原酶抑制剂抗心室 重塑作用及其机制的研究华中科技大学同济学院附属协和医院心血管病研究所博士学位申请者刘宇宏博上生导师曾秋棠教授摘要第一部分氟伐他汀对心肌梗死大鼠左室重塑和功能的影响目的探讨羟甲基戊二酰辅酶A ( H M G C o A ) 还原酶抑制剂氟伐他汀对急性心肌梗死f A M I ) 大鼠左室结构和功能的影响。方法雌性S D 大鼠A M I 术后6 h 随机
2、分为：( D A M I 对照组：氟伐他汀组；另设：假手术组直接灌胃给药8 周后行高频多普勒超声、血流动力学、心脏重塑指标测定。结果与假手术组相比，心肌梗死对照组左室舒张末期内径( L V E D D ) 、左室舒张末期容积( L V E D V ) 、E 峰、E 峰减速度、E A 、庄室舒张术J Y , ( L V E D P ) 、左、右心室心肌肥厚指数均明显增加伊 5 0c o m p l e r ed a t aw e r eo b t a in e di n3 3r a t s ，w h i c hw e r ec o m p r is e do f lA M IC O n t r
3、o I 锄= 1 2 ) f l u v a s t a t i n = I1 ) a n ds h a m o p e r a t e dg r o u p s ( n = 1 0 ) R e s u l t sC o m p a r e dw i t hs h a m o p e r a t e dg r o u p ，l e f tv e n t r i c u l a re n d 一5华中科技大掌同济医掌院2 0 0 2 级博士掌位论文d i a s t o l i cd i m e n s i o n ( L V E D D ) ，l e f tv e n t r i c u l
4、a re n d d i a s t o l i cv o e m e ( L V E D V )E - w a v e ，E - w a v ed e c e l e r a t i o n ，E - w a v e A w a v ev e l o c it yr a t i o ，l e f tv e n t r i c u l a ro n dd i a s t o l i cp r e s s u r e ( L V E D P ) ，r e l a t i v ew e i g h t ( L V R W ) a n dr i g h tv e n t r i c u l a rr
5、 e l a t i v ew e i g h t ( R V R W ) w e r ea 1 1s i g n i f i c a n t l yi n c r e a s e d ( a llP5 0 ，c o m p l e r ed a t aw e r eo b t a i n e din3 3r a t s w h i c hw e r ec o m p r i s e do fA M Ic o n t r o l ( 7 = 1 2 ) ，f l u v a s t a t i n ( n2 n ) a n ds h a m o p e r a t e dg r o u p s
6、 = l O ) R e s u l t sC o m p a r e dw i t hs h a m o p e r a t e dg r o u p ，M D Aw e r es i g n if i c a n t l yin c r e a s e di nA M Ig r o u p ，w h i l eT A O Cw e r eS i g n if i c a n t l yd e c r e a s e d I nc o m p a r i S O I lw i t hA M Ig r o u p ，M D Aw e r eS i g n i f i c a n t l yd
7、e c r e a s e d ，w h iIeT A O Cw o r es i g n i f i c a r lL f Yi n c r e a s e di nf l u v a s t a t i Ug r o u p C o n c l u s i o nT h es t u d ys u g g e s t st h a tf l u v a s t a t i nc a na t t e n u a t et h ea c t i v i t yo fo x i d a t i v ef r e er a d i c a ld u et oh e a r tf a i l u
8、r ei nr a t s T hism a yb eo l l eo f m e c h a niS m So fi to nt r e a t i n gh e a r tf a i l u r e K e y w o r d sh e a r tf a flu r e ：o x i d a t i v es t r e s s ：f l u v a s t a t i nE x p e r i m e n tl l IE f f e c to f f l u v a s t a t i no nt h ee x p r e s s i o no f m y o c a r d i a l
9、I L - l Ba n dT G F l 3 1i nr a t sw i t hh e a r tf a i l u r ea f t e ra c u t em y o c a r d i a li n f a r c t i o nO b j e c t i v eT oi n v e s t i g a t et h ee f t e c to l f l u v a s t a t i n ( F V ) o nt h ee x p r e s s i o no fI L 一1Bm R N Aa n d T G F f l , o fl e f tv e n t r i c u l
10、 a r ( L V ) m y o c a r d i u mi nr a t sw i t hh e a r tf a i l u r ea f t e ra c u t em y o c a r d i a Ii n f a r c t i O R ( A M I ) a n de x p l o r ei t sp o s s i h l ep r o t e c t i v em e c h a n i s mO Nt r e a t i n gh e a r tf a i l u r e M e t h o d sS i Xh o u r sa f t e rli g a t i
11、n gl e f tc o r o u a r ya t “ t e r y s u r v i v i n gh I f l l华中科技大掌同济医掌院2 0 0 2 懿曩士荨啦论文f e m a I e S Dr a t sw e r er a n d o m l ya s s i g n e dt o ：A M Ic o n t r o l ；F V ；s h a m o p e r a t e dg r o u p A f t e r8w e e k so ft h e r a p yw i t hd r u g sb yg a s t r i cg a v a g e ，W ea s
12、s e s s e dt h ee x p r e s s i o no fI L - 1Bm R N Aa n d T G F l 3 1p r o t e i ni nt h ein f a r c t e da n dn o n i n f a r c t e da r e a ( I A 。N I A ) R e s u l t sC o m p a r e dw i t hs h a m o p e r a t e dg r o u p ，I L 一1Bm R N Aa n dT G F f l li nN I Aw e r ea 1 1s i g n i f i c a n t l
13、yi n c r e a s e di nA M Ig r o u p ( a l lP 5 0 的大鼠，最终获得完整资料的大鼠3 3 只，假手术组、A M I 对照组及氟伐他汀组分别为1 0 、1 2 、1 1 只。2多普勒超声评估j 假手术组相比，A M I 对照组的左室舒张末期内径、左室舒张术期容积、E峰、E 峰减速度和E A 比值有意义增加( P 均 O 0 5 ) 。表2 大鼠血流动力学和心童重塑指标改变( 孑s )注：与假手术组相比，1 净 1 8 。R N A 浓度( u g m 1 ) = 2 6 0 r i m 吸收值稀释度X 4 0 。调整浓度至终浓度5 u g u l ，
14、置一7 0 。C 保存备用。 c D N A 合成( 1 ) 将2 u g 上述提取的R N A j2 5 n g ( 3 p m 0 1 ) c D N A 引物加到1 5 m l 离心管内，加水至9 0 u l 。混匀后，加1 0 u l3 m o l L N a A c ，p H 5 5 ，以及2 0 0 u l 无水乙醇，混匀后华中科技大掌同济医掌院2 0 0 2 级博士掌位论文置- 2 0 过夜或一7 0 。C 1 5 m i n 。( 2 ) 以1 5 0 0 0 r r a i n 于4 “ C 离心1 5m i n ，弃上清。( 3 ) ) 3 1 12 0 0 u 1 7 0
15、 乙醇，混匀，室温下1 5 0 0 0 r m i n 离心5m i n ，弃上清，将沉淀抽干。( 4 ) 将沉淀溶于下列溶液中：1 2 u l水4 u l4 0 0 m m o l LT r i s H C L ，p H 8 34 u l4 0 0 m m o l LK C L加热至9 0 。C ，然后缓慢冷却至6 7 。C ；一般在烧杯巾放4 0 0 m 1 9 0 “ C 的水，冷却至6 7 即可。( 5 ) 离心1 m i n ，5 2 。C 孵育3 h r ，再离心l m i n 使液体集中在管底。( 6 ) 向管内加入2 9 u l 逆转录缓冲液和O 5 u l ( 1 6 U )
16、 A M V 反转录酶，混合后胃4 2 水浴l l l r 。逆转录缓冲液：25 u l4 0 0 m m o l LT r i s H C L ，p H 8 32 5 u l4 0 0 m m o l LK C Llu l3 0 0 m m o l LM g C l 25 u l10 0 m m o l LD T T5 u l5 m m o l 几K C L5 u l5 m m o l L4 d m2 u l2 m g m l 放线菌素D1 1 u lH 2 01 0 uR N A 酶制剂( 7 ) 加1 5 0 m l1 0 0 m m o l LT r i s - H C L l O m m o l LE D T A ，p H 7 5 ，混匀，再加2 0 0 u l饱和酚，振摇l m i n 。室温1 0 0 0 0 r m i n 离心5 m i n ，然后将水相转至新管。( 8 ) D H2 0 0 u l2 4
