《Agilent 1290 超高效液相色谱仪标准操作规程》由会员分享，可在线阅读，更多相关《Agilent 1290 超高效液相色谱仪标准操作规程（5页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、AgilentAgilent 12901290 超高效液相色谱仪标准操作超高效液相色谱仪标准操作 规程规程 目目 的的：制定 Agilent 1290 超高效液相色谱仪使用操作规程，确保操作人员能正确规范地操作液相色谱仪。 范范 围围：适用于 Agilent1290 超高效液相色谱仪的使用。 规规 程程：1 开机 1.1 打开计算机，进入 Windows 画面。 1.2 打开 1290INFINITY HPLC 各模块电源。 1.3 待各模块自检完成后，双击“Instrument 1 Online”图标，化学工作站自动与 12001290INFINITY HPLC 通讯。1.4 从“View”
2、菜单中选择“方法和运行控制”画面， 点击”视图”菜单中的“样品视图“系统视图” ， 使其命令前有“”标志，来调用所需的界面。1.5 点击泵下面的瓶图标，选择瓶填充如下图所示，输入溶剂的实际体积和瓶体积。 也可输入停泵的体积。点击“Ok” 。1.6 从菜单 “视图”中，选中“在线信号” ，选中“信号窗口 1” ，然后点击“改变” 钮，将所要绘图的信号移到右边的框中，点击“确定” 。(如同时检测二个信号，则重复选中“信号窗口 2”)2 排气 2.1 首先在方法编辑中，泵的参数设置部分，选好需要排空的通道（保证是开的） 2.2 点击仪器状态视图中泵的图标，选择控制，出现如下图2.3 勾上吹扫，并且输
3、入流速，时间，比例就可以 purge 泵头。排空的时候阀会自动切换，无需人为介入。 2.4 当我们发现泵头里面有气泡出不来的时候，选择预备-开。然后点击确定。此时泵会用很强烈的方式朝外泵液体，并持续 20 次自动停止。 3 编辑数据采集方法 3.1 开始编辑完整方法： 从“方法”菜单中选择“编辑完整方法” 项，如下图所示选中除“数据分析 ”外的三项，点击“确定” ，进入下一画面。3.2 方法信息： 在“方法注释”中加入方法的信息（如：This is for test!） 。 点击 “确定” ， 进入下一画面。 3.3 进样方式选择 根据自动进样器的类型，选择合适的进样方式。3.4 泵参数设定：
4、 在“流速”处输入流量，如 1.5ml/min，停止时间：10 min。在“溶剂B”处输入 70.0，(A=100-B) ，也可“插入 ”一行“时间表” ，编辑梯度。在“压力限”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。3.5 自动进样器参数设定: 选择合适的进样方式， 如图所示，进样体积 1.0ul ，标准进样”-只能输入进样体积，此方式无洗针功能。 “洗针进样”-可以输入进样体积和洗瓶位置，此方式针从样品瓶抽完样品后，会在针座旁边中洗针。3.6 柱温箱参数设定: 在“温度”下面的空白方框内输入所需温度，如：40 度。并选中它，点击“更多信息” 键，如图所示，选中“与左侧相同” ，使柱温箱的温度左
5、右一致。3.7 DAD 检测器参数设定: 检测波长: 254nm，带宽=4nm， 参比波长=360nm，带宽=100nm; 检测波长：一般选择最大吸收处的波长。样品带宽： 一般选择最大吸收值一半处的整个宽度。参比波长：一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区域 。 参比带宽： 至少要与样品信号的带宽相等， 许多情况下用100nm 作为缺省值。峰宽（响应时间） ：其值尽可能接近要测的窄峰峰宽。狭缝-狭缝窄，光谱分辨率高；宽时，噪音低。同时可以输入采集光谱方式，步长，范围，阈值。选中所用的灯。 可以开启光学单元温度控制;可以设定 8 通道信号等。 3.8 FLD 检测器参数设定: 色谱条件： 响应
6、时间=4s. 停止时间： 4min。 激发波长:200-700nm，步长为 1nm，或零级。 发射波长: 280-900nm， 步长为 1nm，或零级。 PMT:多数应用适当的设定值为 10，若高浓度样品峰被切平头，则减少 PMT 值。 “峰宽”：大多数应用设为 4s，只有快速分析采用小的设定值。 多波长及光谱（激发） 。 多波长及光谱（发射） 。 同时可以输入范围、步长、采集光谱。 点击“确定”进入下一画面。3.9 运行时选项表 在“ 运行时选项表 ”中，选中“ 数据采集” ，点击“确定” 。3.10 保存方法 从“方法”菜单，选中“方法另存为” ，输入一方法名，如“测试” ，点击“确定。4
7、 单次样品运行 从“运行控制”菜单中，选择“样品信息”选项，如下图所示，输入操作者名称，如“安装工程师” ；在“数据文件 ”中选择“手动”或“前缀/计数器” 。点击“确定” ，从“系统视图 菜单启动系统。 等仪器准备好，基线平稳，从“运行控制”菜单中选择“运行方法” ，进样。(若无自动样器，则基线平稳后，进样并搬动手动进样阀，启动运行。)5 面积百分比数据处理 5.1 选择界面 从“视图”菜单中，点击“数据分析”进入数据分析画面。5.2 调用信号 从“文件”菜单选择“调用信号” ，选中您的数据文件名，如下图所示。点击“ 确定” ，则数据被调出。5.3 做谱图优化： 从“图形”菜单中选择“信号选
8、项” ，如下图所示。从“范围” 中选择“满量程” 或“自动量程” 及合适的时间范围或选择“自定义量程” 调整。反复进行，直到图的比例合适为止。点击“ 确定” 。5.4 积分优化: 从“积分”菜单中选择“积分事件”选项，如下图所示。选择合适的“斜率灵敏度” ， “峰宽” ， “最小峰面积” ， “最小峰高” 。 从“积分”菜单中选择“积分”选项， 则数据被积分。 如积分结果不理想，则修改相应的积分参数，直到满意为止。 点击左边“”图标，将积分参数存入方法。5.5 打印报告: 从“报告”菜单中选择“设定报告”选项，进入如下图所示画面。 点击“定量结果”框中“计算”右侧的黑三角，选中“面积百分比”
9、，其它选项不变。 点击“ 确定” 。从“报告”菜单中选择“打印报告” ，则报告结果将打印到屏幕上，如想输出到打印机上，则点击“报告” 底部的“打印”钮。6 关机 关机前，先关灯，用相应的溶剂充分冲洗系统。 退出化学工作站，依提示关泵，及其它窗口，关闭计算机（用 shut down 关）。 关闭 Agilent 1290 各模块电源开关。 7 定量数据处理 7.1 点击“方法”菜单，选择“调用方法 L.” ，在方法目录中选择要进行定量设定的方法，该方法是经过积分和谱图优化过的方法。点击“确定” ，则选择的方法被调出。7.2 从“文件”菜单中选择“调用信号”选项， 选中标样的数据文件名， 点击 “
10、确定” ，则数据被调出。检查确认积分和谱图优化的参数是否合适。7.3 从“校正”菜单中选择， “新建校正表”按钮，进入以下画面， 确认选项在“自动设定” ；级别为“1” ，点击“确定” 。若要信号单独计算，则选择前面的空白框。7.4 在覆盖现有校准表中对话框中，选择“是（Y） ” 。若方法中没有旧的校准表，无此项。 7.5 则所有积过分的峰，其保留时间、峰面积按序显示在校准表中。如图所示，依次输入化合物的名称、含量，校准曲线显示在右下方。可以设定参考峰等。若用内标方法定量，还须选择内标，点击“内标“下的区域，选择那个峰作为内标峰，指定每个色谱峰以那个内标为参比。点击“确定” 。 7.6 在删除
11、含量为零的行对话框中选择“是（Y） ” 。则校准表中未输入含量的峰从表中删除。 7.7 点击“校准”菜单，选择“校准设置”按钮，进入以下画面，输入单位：如“%” ；其它项不变。点击“确定” 。 7.8 打印报告: 从“报告”菜单中选择“ 指定报告”选项。点击“定量结果”框中“定量”右侧的黑三角，选中“外标法” ，其它选项不变。点击“确定” 。-若是用内标法定量，则选“内标法” 。 从“报告”菜单中选择“打印报告“，则报告结果将打印到屏幕上，如想输出到打印机上，则点击“报告“ 底部的“打印”钮。-可以选择打印到文件中，如 PDF 格式。 7.9 若有多个浓度标样，则依次调出校准数据，调出每一个校准数据后，点击“校准”菜单，选择“添加级别“，第 2 级数入”2“，类推。 在校准表中输入每级的组份浓度。 7.10 在方法菜单中，选择“运行时选项表” ，确认“数据分析选项”也被选中，点击“确定” 。点击“保存”按钮，存储修改的方法。此方法包含校准表，建立完毕。 参考依据参考依据： Agilent1290 超高效液相色谱仪使用操作说明书。 附附 件件： 无。
