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1、中国环境诱变剂学会第1 4 届学术交流会议论文集常B E A S _ 2 B 细胞的染色体数目绝大部分均为二倍体核型( 2 n = 4 6 ) ，而且能够在传代过程中保持该核型的稳定性；而诱导细胞已经不同程度的失去了正常二倍体核型( 2 n ：4 6 ) ，出现了大量亚二倍体( 2 n &4 n ) 细胞，多倍体核型约占2 0 1 0 0 。采用多个构成比比较的卡方检验发现，两组构成具有显著性差异( P 0 0 5 ) ，说明在本次诱导浓度下，D N A 损伤作用并不明显。D N A 加合物测定：正常对照组D N A 加合物1 7 ：L - O 6 个结合物1 0 8 核苷酸，D M S O
2、组在2 0 4 - - - 0 7 个结合物1 0 8 核苷酸，煤焦沥青组在1 9 - X - 0 8 个结合物1 0 8 核苷酸。3 组之间差异无统计学意义( 尸 o 0 5 ) 。结论煤焦沥青的主要成分以多环芳烃为主，在体外作用于支气管上皮细胞B E A S 2 B 经过诱导传代培养可以引起细胞形态改变，G 2 M 期细胞明显增多，形成细胞克隆的能力明显增强，核型分析显示出现明显的染色体不稳定现象，单细胞凝胶电泳显示煤焦沥青对于B E A S 2 B 细胞没有明显的D N A 损伤作用，D N A加合物测定也显示煤焦沥青组并没有明显的增加，提示煤焦沥青诱导的细胞恶性转化可能是通过其他机制。
3、人工神经网络技术联合多种肿瘤标志在肺癌预警中的应用聂广金冯斐斐吴拥军吴逸明郑州大学公共卫生学浣郑州4 5 0 0 0 1背景与目的据卫生部统计显示，近年来肿瘤的死亡率居各种死因首位，并呈逐年上升的趋势。而位于前五位的分别是肺癌、肝癌、胃癌、食管癌和结直肠癌，因此肺癌和消化道肿瘤成为危害我国国民健康的主要杀手。虽然在防治肿瘤方面做了大量工作，但肿瘤的发病率和死亡率仍然居高不下。其原因可能是一方面在肿瘤一级预防和二级预防上投入不够，缺乏行之有效的社区预防干预措施；另一方面目前仍然缺乏肿瘤早期诊断技术。很多肿瘤患者临床确诊时已是中晚期，此时治疗效果和预后差，这是导致肿瘤死亡率居高不下的主要原因。因此
4、早期发现、早期诊断和早期治疗仍然是提高肿瘤患者生存率，降低死亡率，改善预后的主要措施。目前肿瘤诊断的主要方法有影像学诊断、血清免疫学诊断和细胞学与组织病理学诊断。但由于活检人员和病理医生的主观因素、活检的创伤性以及活检时病人的合作意愿等因素的影响，造成肿瘤患者的漏诊、误诊等现象时有发生。肿瘤标志的出现为人们早期发现肿瘤带来了曙光，然而随着实践的不断深入，发现单个肿瘤标志仍然无法承担起早期诊断肿瘤的重任。于是人们将希望寄于多种肿瘤标志的联合检测，并不断更新肿瘤标志的检测技术。这种努力使得肿瘤诊断率有所高，也使得肿瘤早期发现成为可能。近几年人们从统计学角度卜做了大量研究，希肇能建立一种基于多肿瘤标
5、志检测数据的较大样本最的智能诊断模型，来克服。些人为主观凼素和个体因素的影响，进一步提高肿瘤诊断率。人工神经网络( a r t i f i c i a ln e u r a ln e t w o r k , A N N ) 是模拟人脑的组织结构和运行机制的一种非线性信息2 3 2中国环境诱变剂学会第1 4 届学术交流会议论文集处理工程系统，它具有大规模并行处理能力和分布式信息存储能力，并具有良好的自适应性、自组织性以及很强的自学习功能、联想功能和容错功能。目前己广泛应用于疾病智能诊断系统构建、疾病危险因素的筛查、疾病风险评估以及基因识别和蛋白质结构分析等领域。近几年，将A N N 技术联合多肿
6、瘤标志用于构建肿瘤智能诊断系统成为研究的热点。该课题组前期研究筛选出了对肺癌具有较高特异性的血清癌胚抗原( C a r c i n o e m b r y o n i ca n t i g e n , C E A ) 、神经元特异性烯醇化酶( N e u r o n - s p e c i f i c e n o l a s e ，N S E ) 、胃泌素( G a i n ) 、唾液酸( s i a l i ca c i d , S A ) 、铜锌比值( C u Z n ) 和血清钙离子浓度等6 种肺癌肿瘤标志组成肺癌最佳肿瘤标志组合，并应用A N N 技术建立了肺癌智能诊断系统。该研究在上
7、述基础上，扩大样本量，检测6 肿瘤标志，并完善A N N 联合6 种肺癌肿瘤标志的肺癌诊断系统，以考察本课题组前期建立的肺癌智能诊断系统的可靠性和稳定性以及结果的重现性，为肺癌的临床辅助诊断和作业场所、社区肺癌高危人群筛检提供更加坚实的理论依据。同时考察A N N 联合6 种肺癌肿瘤标志对胃癌的鉴别诊断能力，以评估A N N 联合6 种肺癌肿瘤标志应用于其他肿瘤鉴别诊断的可行性。材料与方法收集6 l 例正常人、5 3 例肺部良性疾病患者、6 7 例肺癌患者、5 5 例胃部良性疾病患者和4 7 例胃癌患者的血清标本。采用放射免疫法测定C E A 、N S E 和胃泌素的表达水平；采用偶氮砷I I
8、 I 终点法钙离子测定试剂盒测定血清的钙离子浓度：采用原子吸收分光光度法( 石墨炉法和火焰法) 测定血清铜离子和锌离子含量，并计算铜锌比值( C u Z n ) ；采用改良的间苯二酚法测定血清S A 浓度。对测得的5 组2 8 3 例患者的基本资料和6 种肿瘤标志数据进行整理，利用S P S S l 2 0 做描述性统计分析、卡方检验以及方差分析。将上述数据归一化处理，并将各组随机的分为训练集和测试集。利用训练集分别在M m l a b 7 0 和S P S S l 2 0 平台上构建A N N 诊断模型和l o g i s t i c 回归诊断模型，并对相应的测试集进行预测诊断。利用受试者工
9、作特征曲线( R O C ) 分析比较纳入基本资料前后和数据合并前后A N N 模型与相应的l o g i s t i c 回归模型在鉴别诊断肺癌以及胃癌能力方面的优劣。结果1 正常人组，肺良性疾病组和肺癌组在现病史和家族史，生活习惯以及居住环境等基本资料方面，除了烹调方式外，在3 组中的分布差异有统计学意义( P o 0 5 ) 外，其他各组两两比较水平差异均有统计学意义( 尸 o 0 5 ) ；而对测试集，纳入基本资料前后A N N 模型鉴别诊断肺癌的A U C 分别为0 8 8 和1 O ，均大于纳入基本资料前后l o g i s t i c 回归模型诊断肺癌的A U c 的0 8 2
10、和0 9 ，但纳入前后A U C 相比较差异均无统计学意义( 尸= 加0 5 ) ；与本课题组先前的研究数据合并扩大样本量后，对于总样本而言，A N N 模型预测肺癌的A U C 为1 0 ，l o g i s t i c 回归模型为1 0 ，两者比较差异无统计学意义( J P o 0 5 ) ，而对测试集而言，A N N 模型预测肺癌的A U C 为0 9 5 ，l o g i s t i c 回归模型预测肺癌的A U C 为O 8 5 ，两者比较差异有统计学意义( P o 0 5 ) ：A N N 模型鉴别诊断肺癌与胃癌的A U C 为0 9 2 ，l o g i s t i c 回模型鉴
11、别诊断肺癌和胃癌的A U C 为O 8 9 ，二者比较差异无统计学意义( P 川0 5 ) 。结论1 A N N 联合6 种肿瘤标志的肺癌诊断预测模型具有较高的灵敏度和特异度，证实了本课题组先前建立的A N N 肺癌预测模型具有良好的重现性和稳定性；肺癌患者基本临床资料如现病史，肿瘤家族史以及居住环境等基础资料对提高A N N 联合肿瘤标志诊断肺癌的灵敏度和特异度有重要意义。2 A N N 联合6 种肿瘤标志不仅能鉴别肺癌，肺良性疾病和正常人，对鉴别胃癌患者、胃良性疾病患者同样具有良好的鉴别能力，而且还可区分肺癌和胃癌患者。3 A N N 联合6 种肿瘤标志的肿瘤诊断模型在小样本量时与传统的统
12、计分类方法l o g i s t i c 回归分析具有相同的分类预测能力。而在处理大样本量、非线性的数据时A N N 模型在鉴别肺癌时更具有优势。M A P K 抑制剂对镉致N R K 细胞凋亡基因表达水平的作用研究徐新云，丁利平，周丽袁建辉，黄海燕深圳市疾病预防控制中心深# 1 1 5 t $ 0 2 0E - m a i l ：x y x u 2 0 0 8 1 6 3 c o r n目的镉是常见的职业毒物和环境污染物之一，长期接触镉有致癌危险，镉可引起肾细胞损伤和细胞凋亡。丝裂原活化蛋白激酶( m i t o g e n - a c t i v a t e d p r o t e i n
13、 k i n a s e ，简称M A P K ) 属于生物体内的一类蛋白激酶，是目前国内外研究的信号转导通路之一，与机体多种生理病理过程密切相关，参与细胞增殖、分化、转化、炎症、凋亡等多种细胞反应，与许多疾病发生发展有明显关系。本文主要探讨用镉染毒N R K 肾细胞后凋亡基因B c l 2 、B a x 和C a s p a s e 3 的m R N A 表达水平，以及M A P K 抑制剂对镉染毒后凋亡基因表达水平的影响。方法用不同剂量C d C i 2 ( O ，2 5 M ，5 v t ，1 0 肛M ) 染毒大鼠N R K 细胞1 2 h ，p 3 8 M A P K 抑制剂S B
14、2 0 3 5 8 0l O 斗M和E R K l 2 抑制剂P D 9 8 0 5 9l O p M 预处理N R K 细胞0 5h 后再加入1 0 肛MC d C l 2 染毒细胞，用M T T 方法检测细胞存活率，S Y B RG r e e nl 荧光定量P C R 检测B c l 一2 、B a x 和C a s p a s e 一3 的m R N A 表达水平。结果N R K 细胞染镉后细胞存活率随染毒剂量增加而下降，p 3 8 M A P K 抑制剂和E R K l 2 抑制剂加入组比单纯染镉组的细胞存活率升高。实时荧光定量P C R 检测N R K 细胞染镉后B a x 基因和C a s p a s e 一3 基因表达比对照组明显增强，而B c l 2 基因表达显著降低。加入p 3 8 M A P K 抑制剂S B 2 0 3 5 8 0 后，B c l 2 基因表达比单纯染镉1 0 p M 组明显升高，但B a x 基因和C a s p a s e 3 基因表达比单纯染镉1 0 # , t 组明显下降。加入E R K I 2抑制剂P D 9 8 0 5 9 ，也出现B c l 2 基因表达增加，B a x 基因和C a s p a s e 3 基因表达下降。
