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1、1速冻冷藏对鲜地汁中梓醇含量的影响*崔瑛 段红福 （河南中医学院 河南郑州 450008）摘要 目的:观察速冻冷藏对鲜地汁中梓醇含量的影响。方法:应用速冻冷藏的 方法对鲜地汁进行保鲜，用 HPLC 测定鲜地汁中梓醇含量。结果:保鲜贮存期至 少可达 3 个月。结论:速冻保鲜技术可用于地黄鲜汁的保鲜。 关键词 速冻冷藏；鲜地汁；梓醇 鲜地黄为玄参科植物地黄 Rehmannia glutinosa Libosoh.的新鲜块根。鲜地黄 性寒，味苦、甘，偏于清热生津，凉血止血，其中的活性成分梓醇含量也较生 地和熟地最高1。鲜地汁取汁应用古已有之，张仲景方中用鲜黄计三方：百合 地黄汤、防己地黄汤、炙甘草汤
2、，用于治疗百合病、狂妄证、心动悸证等2。 但地黄鲜品不易保存，限制了鲜品的使用。我们采用鲜地黄榨汁、速冻冷藏方 法对鲜地黄保鲜，并考察了此条件下鲜地汁中梓醇含量的变化。 1 仪器与材料岛津LC10A液相色谱仪；UVD紫外检测器；HW-2000色谱工作站；梓醇 对照品(批号110808-200508，中国药品生物制品检定所)；鲜地黄样品购自武陟 县西陶镇张武村，85-5品种,经鉴定为玄参科植物地黄Rehmannia glutinosa Libosch.的新鲜块根；甲醇、乙腈为色谱纯，水为自制双蒸水；其他试剂均为分 析纯。 2 方法与结果 2.1 色谱条件 色谱柱为Platisil C18柱(4.
3、6 mm 250mm，5m)；流动相为 乙腈-0.1%磷酸水溶液（1:99）；检测波长210nm；流速1.0ml/min；柱温：25。 理论塔板数按梓醇计不低于5000。进样10l在此条件下，样品中的梓醇与其他 峰分离良好，保留时间为14.4min。结果见图1：A B A.对照品溶液 B供试品溶液 2.2 对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的梓醇对照品约1mg，精密称定， 置5ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。 2.3 供试品溶液的制备 2.3.1 鲜地黄汁的制备 取一定量鲜地黄，去除泥土和坏死部分，用纱布擦 干，切成1cm的片块，称重，置沸水中1min，捞出用吹
4、风机吹干，用果菜榨汁机 榨汁，用容器收集，密封，置冰箱里速冻，-18冷冻储藏。根据获汁体积计算 榨汁率：出汁率 = 获汁总量/药材重量100%。 2.3.2 梓醇含量测定 取鲜地汁解冻，置离心管内离心（2500转/min,15min）， 精密量取上清液1ml置带盖三角烧瓶中，精密加入30ml甲醇，称重，超声230min，补重，取甲醇超声液置带盖离心管内，离心（3000转/min，15min）,取 上清液10ml置蒸发皿中浓缩至近干，用流动相定容至10ml，作为供试品溶液备 用。 2.4 标准曲线的绘 取对照品溶液(0.519mg/ml)，按上述色谱条件，分别进样 2，4，6，8，l0l，测得梓
5、醇峰面积，以梓醇含量为横坐标，以峰面积为纵坐 标，绘制标准曲线。标准曲线为：Y=97890X +2079.2(r=0.9998)。结果表明，梓 醇在1.038g5.19g 时与峰面积呈良好线性关系。结果见表1。表 1 标准曲线测定结果2.5 精密度实验 精密吸取同一浓度对照品溶液，按上述色谱条件，重复进 样5次，依法测定,结果梓醇峰面积RSD为0.71%。结果见表2。表 2 精密度实验结果测定次数 峰面积 RSD（%）1 2030112 199976 3 202398 0.714 1998945 200830 2.6 重复性实验 取同一批样品同时制备5份，按照上述色谱条件进行测定， 计算相对标
6、准偏差RSD为1.88%。结果见表3。表 3 重复性实验结果测定次数 峰面积 RSD(%)1 3292282 3188623 326664 1.884 3341865 321300 2.7 稳定性实验 取同一批样品，分别于0，2，4，6，8 ，10,12h，按上述 色谱条件，进行测定。结果梓醇峰面积RSD为1.35。结果表明，梓醇含量在 12h内基本稳定。结果见表4。表 4 稳定性实验结果 测定时间(h) 峰面积 RSD(%)梓醇进样量 (l) 峰面积积分值2 102622 4 205349 6 311226 8 403993 10 51134730 329228 2 328932 4 324
7、068 6 320570 1.35 8 318581 10 320904 12 319992 2.8 加样回收实验 分别取已知含量的地黄鲜汁1ml，共5份，分别精密加入梓 醇对照品，按供试品溶液制备方法制备，依法测定，结果平均回收率为 103.19 ，RSD为1.22。结果见表5。 表 5 加样回收率实验结果 供试品梓醇 加入对照品梓 测定结果 回收率 平均回 RSD 含量/mg 醇的量/mg /mg (%) 收率(%) (%) 3.25 3.41 6.77 103.23 3.51 3.90 7.45 101.03 3.45 3.55 7.15 104.23 103.19 1.22 3.57
8、3.61 7.31 103.60 3.48 3.36 6.97 103.872.9 样品测定 按“2.3.2”项下方法制备供试品溶液，共5批，平均出汁率为 56%，分别按上述色谱条件每隔一个月测定一次梓醇含量，以外标法计算梓醇含 量，结果见表6。 表 6 不同时间鲜地汁中梓醇含量3 讨论 由表6数据可知在冷冻保存的条件下，地黄鲜汁中梓醇含量在三个 月内基本保持稳定。只是在观察中有些样品颜色有所加深。速冻保鲜技术是以 物料中的水分快速结晶为基础,迅速降低物料温度的一种加工技术3。它能保证 物料的原有成分和性质不变,而且成本较低,具备工业化生产的条件。杨桦3等 用这种方法保存储藏地黄，并以梓醇为指
9、标进行含量测定，结果表明梓醇含量 在6个月内基本稳定。我们采用速冻保鲜方法保存鲜地黄汁，经对其中梓醇含量 测定，在三个月内基本稳定，证明这种方法可行。该方法简单易行，成本低， 值得推广。 参考文献：参考文献： 1王宏洁,金亚红等.鲜、生、熟地黄药材中3种活性成分含量的比较.中华 中医药学会四大怀药与地道药材研究论坛暨中药炮制分会第二届第五次 学术会议与第三届会员代表大会论文集峰面积梓醇含量（mg/ml）批次 0月 1月 2月0 月 1 月 2 月 1 299230 275762 284719 9.31 8.72 9.21 2 285095 214028 231365 8.87 6.77 7.48 3 245724 241041 243616 7.65 7.62 7.88 4 256878 263220 276629 8.00 8.32 8.94 5 334111 351691 360925 10.40 11.12 11.6742王毅.张仲景应用地黄剖析.中国中医基础医学杂志，2006,12(12):943 3杨桦,郝近大等.速冻保鲜技术用于生姜、地黄、石斛保鲜的实验研究.中 国中药杂志,2000,25(5):277*基金项目：国家自然基金项目，编号：30772794
