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1、药学院药学院 BSL-2 生物安全实验室管理规范调整方案生物安全实验室管理规范调整方案-试行试行一、实验室管理一、实验室管理1、实验室使用：实验室实行预约使用制度：把三个独立操作间划分为三个预约单元，网上开放预约，每个使用者通过预约使用。2、实验室进出：实行安装门禁系统管理，凭校园卡刷卡登记出入3、实验事项： 按 BSL-2 实验室管理规程二、实验室准入：二、实验室准入：1、实验室准入： 进入实验室前，需报备实验方案，并进行生物实验室安全操作培训，经考核及格，允许进入。2、实验室培训： 参考 BSL-2 实验室管理规程、BSL-2 实验室工作规定、BSL-2 实验室意外事故的处理规定、BSL-
2、2 核心区管理规章制度三、实验室收费三、实验室收费1、实行三个预约单元单独收费。收费标准参考其它学院的标准并结合本实验室年均维护成本，每年二次合并大型仪器使用收费。收费标准：服服 务务 项项 目目校内价校内价校外价校外价1短期使用(1-2 人/课题组，每室限 2 个相同内容 课题组同时实验）60 元/天120 元/天2占用实验室（因一个实验周期内病原体不能交 叉，如无人进入但需进行培养操作等即为占用）60 元/天120 元/天3BSL-2 操 作室长期使用1000 元/月2000 元/月4消毒剂和其它消毒用基本消耗品、培养瓶（板） 、实验试剂、 细胞株、实验动物等、 个人一次性防护装备（一次性
3、乳胶 手套、鞋套等）按要求自备附件附件 1：药学院药学院 BSL-2BSL-2 生物安全实验室申请书生物安全实验室申请书申请书编号: 申请日期： 年 月 日 申请人姓名申请人单位申请人信息联系人姓名联系人电话及邮箱课题名称课题信息 课题负责 人及邮箱项目编号（经费来源） 需有明确的经费支持姓 名来源培训时间联系电话及邮箱参与实验 人员病原体名称病原体类别病原体来源 是否为人畜共患病病原病原是否具有高致病性病原体信息计划开始日期 年 月 日计划结束日期 年 月 日病原获得方法与感染效力，传染等级（是否符合级生物安全要求） 、易感动物及其可能的 传播途径论述一旦发生该病原污染，计划以何种方式快速处
4、理减少扩散，及安全保护措施保证： 本人在 BSL-2 实验室内开展的一切实验活动将与本申请书内容一致，并且，由于本人 原因而发生病原危害及传染病扩散责任将由本人（本实验室）承担。保证人： 年 月 日中心实验室意见：签章年 月 日附件附件 2：BSL-2 生物安全实验室操作规程生物安全实验室操作规程1. 目的目的加强 BSL-2 实验室生物安全管理，规范实验人员仪器设备、实验操作行为， 确保 BSL-2 实验室工作安全运行。2适用范围适用范围适用于 BSL-2 实验室的管理与操作。3职责职责31 实验人员：严格执行 BSL-2 实验室相关管理规定，规范操作行为。 32 实验室负责人：监督执行 B
5、SL-2 实验室相关管理规定，及时纠正违规操作行为，发现 不安全隐患及时上报。 33 科室负责人：监督并定期抽查 BSL-2 实验室管理规定执行情况，及时发现并解决 BSL-2 实验室运行中出现的问题。4准入要求准入要求41 只有经过授权的人员才允许进入 BSL-2 实验室工作区。 42 16 岁以下儿童禁止进入 BSL-2 实验室工作区。 43 实验人员要接受相应预防性生物制品的免疫接种。 44 禁止将无关动物带入实验区。 45 外单位人员来访、参观、进修，必须经中心主管部门批准，未经批准不得进入 BSL-2 实验室工作区。 46 外来人员进入 BSL-2 实验室，须由本室人员陪同，在严格遵
6、守有关规定的条件下方可 进入，同时填写外来人员进出实验室特殊区域登记表 。 47 限制免疫耐受者进入实验室。 48 限制正在接受免疫抑制剂者进入实验室。 49 严禁在实验室内吸烟、饮食、化妆等。5进入程序进入程序51 进入 BSL-2 实验室，伸手打开缓冲间内空调和生物安全柜按钮，使实验室和生物安全 柜净化 10 分钟以上。 方可进入实验室进行实验。 。 52 将实验所需材料和物品放入生物安全柜中。 53 进入 BSL-2 实验室缓冲区，关闭外门，在工作服外加穿 BSL-2 实验室专用罩衣（紧 口，后系带） ，戴一次性口罩、帽子和戴两层手套, 换穿 BSL-2 实验室专用鞋。需要时打开照明按钮
7、。 54 进入实验室工作区，首先打开照明按钮，打开前玻璃门，调节到要求的高度。将实验 所需物品一次性放入实验台内，摆放要有秩序且要相对区分清洁物与污染物，净化生物生 物安全柜 10 分钟左右。 55 观察实验区负压表指示数值是否在工作要求范围内，如不能满足要求则进行负压调节。 观察温湿度计，填写温湿度计使用记录。 56 实验人员手臂放进生物安全柜内大约 1 分钟后，即可按无菌要求进行实验操作。 57 完成整个实验操作后，将使用过的物品进行分类处理。消毒整个工作台面，再让排风 至少运行 10 分钟。 58 放下前玻璃门，打开生物生物安全柜紫外线灯进行毒。 59 离开实验操作区前脱去第二层手套放到
8、指定容器内消毒处理。 510 填写仪器使用记录。6实验后物品、污染物处理实验后物品、污染物处理61 对不可回收的污染物品小心包扎后，在高压灭菌器内按规定要求进行高压灭菌处理。 然后按医用垃圾交中心统一处理。 62 对可回收的污染物品小心包扎后，在高压灭菌器内按规定要求进行高压灭菌处理。之 后转入洗刷间进行洗刷。 63 对一次性实验用品放入容器内高压灭菌，然后按医用垃圾交中心统一处理。 64 对不可高压灭菌处理的物品，应选择适当的消毒剂进行浸泡消毒。可回收的物品，送 洗刷室；不可回收的物品，按中心“三废”处理的有关规定执行。7出实验室程序出实验室程序71 打开实验室内门，出来后随手关闭。将实验室
9、专用罩衣脱下，挂在缓冲区，待稍后进 行紫外线消毒。脱掉一次性帽子、口罩和手套，放入待消毒的垃圾筒内，按门锁按钮，打 开外门，更换拖鞋，打开紫外线按钮，同时关闭排风按钮，然后关闭外门。注：若进入时 打开照明，则此时应关闭。 72 如实验过程中在传递窗传递过污染性物品，在实验后应进行紫外线消毒。 73 待消毒完毕后（至少 30 分钟） ，关闭生物安全柜和紫外线按钮。8注意事项注意事项8.1 应保持实验室环境清洁。 8.2 工作台内部空间需用消毒剂擦洗，如消毒剂具有腐蚀性，要用自来水清洗台面，以避 免腐蚀。 8.3 操作台内的实验器具应避免阻挡前后的穿孔网格，并且避免把东西卷入其中。所有的 操作应该
10、在距离前面的格栅约 10 厘米以内的工作面上进行。 8.4 操作时应动作缓慢，减少不必要的手和手臂伸进和伸出空气屏障，以免影响气流。 8.5 工作台在操作时，应尽量减少实验室内开门、关门，人员走动等情况，以免影响室内 气流。 8.6 通常情况下，在生物安全柜里面不要使用酒精灯或类似的明火，因为他们会破坏气流 模式、损坏 HEPA 过滤器，并且有火灾的危险（除非有特殊的要求） 。 8.7 警报灯或警铃响时切勿继续操作。 8.8 一旦工作台在操作时出现意外事故，须在这些东西搬出之前，连同工作台在内进行全 面消毒，如果溢出的污水或液体集中在排液槽中，必须采取紧急措施将污水排出。同时填写实验室潜在危险
11、材料溢出或浅出记录 。 89 试验结束后将试验物品移出生物安全柜，不得将生物安全柜当成储物箱。9 维护保养维护保养9.1 当生物安全柜移动后或实验室布局改动时，应该由有经验的工作人员对生物安全柜的 屏障作用重新进行测试。 9.2 半年一次生物安全柜内沉降菌检测：生物安全柜消毒清洁后，紫外线照射 30 分钟，开 前门通风十分钟后，于工作台面中部均匀放置两块已制好、经检验无菌的普通营养琼脂培 养皿，打开培养皿盖，使培养基表面暴露 30 分钟，再将培养皿盖盖上后倒置，取出放36培养箱培养 24 小时以上，用肉眼直接进行菌落计数，以1 为合格。 9.3 检查前玻璃驱动装置的松紧度。 9.4 每年请厂商
12、对生物安全柜进行风速、洁净度检测一次。 9.5 根据需要更换紫外灯管和照明灯管。杀菌灯工作超过一定时间后会失去效果，当工作 台灯照强度低于每平方厘米 40 微瓦时，就应更换新的杀菌灯。 （可用紫外线灯表来测定工 作台表面的灯照强度） 9.6 应根据需要更换高效过滤器（HEPA） ，由专业人员进行操作。 （高效空气过滤器的寿命 取决于如何使用它。在实验室的正常条件下，可以预测本过滤器至少可以使用五年。 ） 9.7 在开始工作之前要让生物安全柜的风机至少运行 3-5 分钟使生物安全柜内的空气进行 净化。 9.8 定期对生物安全柜的工作台面、内壁（不包括送风滤器扩散板）和观察窗的内表面用 消毒剂（7
13、5%酒精或 1g/L 有效氯）擦拭。再用无菌蒸馏水进行擦拭以清除残余的消毒剂。 9.9 注意避免物品或液体进入格栅下面。经常用柔性的清洁剂或玻璃专用清洁剂清洗箱体 外表面和玻璃。 9.10 每月消毒一次工作台下面的托盘。编写：编写： 审核：审核： 批准批准 ： 批准日期：批准日期： 年年 月月 日日BSL-2BSL-2生物安全实验室工作规定生物安全实验室工作规定生物安全实验室的分级标准：生物安全实验室的分级标准：一级一级 对人体、动物或环境危害较低，不具有对健康成人、动植物致病的致 病因子。二级二级 对人体、动植物或环境具有中等危害或具有潜在危险的致病因子， 对健康成人、动物和环境不会造成严重
14、危害。有有效的预防和治疗措施。三级三级 对人体、动植物或环境具有高度危险性，主要通过气溶胶使人传染上 严重的甚至是致命疾病，或对动植物和环境具有高度危害的致病因子。通常有 预防治疗措施。四级四级 对人体、动植物或环境具有高度危险性，通过气溶胶途径传播或 传播途径不明，或未知的、危险的致病因子。没有预防治疗措施。一、实验人员须知一、实验人员须知 1、进行 BSL-2 实验，应事先与实验室联系，填写BSL-2 实验申请表 ，经批准后方可进 行。 2、开始实验，请提前 20 分钟运行空调机组和紫外灯杀菌，开空调机组顺序是：开排风机 开空调循环风机开空调冷热源机组。 3、实验中所需的器械、物品均需严格
15、消毒后方可带入实验室。 4、 实验人员进入实验室，需按照实验室规定的程序进入。 （1） 、人员进入前必须穿好防护服。（2） 、操作时，手不可直接接触动物和消毒灭菌过的物品。操作前必须戴上灭菌过的、 完好的乳胶手套或消毒过的浸塑手套。操作中手套不能接触安物安全柜内未经消毒的物品。（3） 、操作时，人员尽量不要停留在回风口的位置， 。（4） 、操作时，使用生物安全柜要严格按照其操作说明书操作，遇生物安全柜报警等情 况，应立即停止实验并迅速撤离实验室，由专业人员排除故障后，方能进入实验室开始实 验。 5、开实验室时，立即关闭空调机组，关机顺序是：关空调冷热源机组关空调循环风机 关排风机。最后将紫外灯打开杀菌消毒。 6、BSL-2 实验管理者原则上应每天观察空调设备的，如发现有异常情况应及时通知专业公 司处理，严禁空调设备存在故障时进行实验，严禁非专业人员擅自对空调机组的工作状况 进行随意调整。 7、 非实验人员不得擅自进入 BSL-2 实验室。 8、 实验后，不必要的仪器、物品、样本或死亡的动物，经过专用消毒器灭菌后方可带出 实验室。 9、 实验者不得擅自搬动动物实验室的设备，如有损坏者，按价赔偿。 10、 实验全部结束，实验者应立即通知实验室管理人员，以便及时清理、消毒并做好迎接 新课题的一切准备工作。二、实验室的例行清洁卫生和例行消毒规定
