《不同疾病来源及高盐诱导Hpylori长期感染MGs致多脏器病变作用的研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《不同疾病来源及高盐诱导Hpylori长期感染MGs致多脏器病变作用的研究（78页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、不同疾病来源及高盐诱导H p y l o r i 长期感染M G s 致多脏器病变作用的研究T h eP a t h o g e n i c i t yo fD i f f e r e mH p y l o r iS t r a i n so nM u l t i p l eO r g a n so fM o n g o l i a ng e r b i l s导论文课题起止时间：至QQ 2 生12 月二2Q ! 至生圣旦论文完成时间：2Q12 生垒旦：中国医科大学( 辽宁)20 12 年5 月洲II III III II III I I II II Y 2 0 9 13 8 2中国医科大学研
2、究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。论文作者签名：趟圣坠日期：2 P ，j 乎中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保证毕业离校后，发表论
3、文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容( 保密内容除外) ，以采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签名：指导教师签名：目录一、摘要中文论著摘要l英文论著摘要5二、英文缩略语l O三、论文论文一前言lI 一刖吾l材料与方法12实验结果2 2讨论3 4结论3 6论文二前言4 I 。日U 舌材料与方法4 2实验结果4 5讨论5 5结论5 8四、参考文献5 9五、本研究创新性的自我评价6 2六、附录综述6 3在学期间科研成
4、绩7 3致 射7 4个人简介7 5中文论著摘要不同疾病来源及高盐诱导H p y l o r i 长期感染M G s 致多脏器病变作用的研究刖吾幽门螺杆菌( H e l i c o b a c t e r p y l o r i ，H p y l o r i ) 在全球人群中的感染率高达5 0 ，它与慢性胃炎、消化性溃疡及胃癌的发生密切相关。H p y l o r i 感染宿主后可产生不同的临床结局，大部分人无任何症状，少数发展为胃炎及消化性溃疡等疾病，极少数发展为胃癌。研究不同菌株的致病能力，对于了解H p y l o r i 感染宿主的病理过程，合理有效的对其进行防治具有重要意义。蒙古沙土鼠
5、( M o n g o l i a ng e r b i l s , M G s ) 腺胃结构和功能与人类极其相似，极少患自发性胃炎，且不是H p y l o r i 的自然宿主，是目前已知的研究人类胃疾病唯一的动物模型。利用M G s 模型研究不同来源H p y l o r i 致病变能力是当前研究的热点。大量研究资料表明不同H p y l o r i 分离株致M G s 胃粘膜损伤能力存在较大差异，即使是同一家族菌株因某一关键基因突变，致病能力也明显不同。此外，有学者认为H p y l o r i 通过对免疫系统的长期慢性刺激，不仅可导致人类胃部病变，还可能与胃外多脏器病变的发生相关。然而
6、，在所有胃外病变中，除特发性血小板减少性紫癜发生与H p y l o r i 感染被广泛接受外，其他疾病与H p y l o r i 感染之间的关系，尚缺乏直接证据。迄今，H p y l o r i 长期感染导致M G s 的致病作用，仅聚焦在胃部病变，H p y l o r i 是否能导致M G s 胃外多脏器病变，尚未见报道。高盐饮食与H p y l o r i 感染之间关系密切，高盐可造成胃粘膜短暂性的损伤，破坏粘膜表面粘液屏障，利于H p y l o r i 在胃内定植。H p y l o r i 与1 0 高盐饮食协同作用，可以促进M G s 胃粘膜i N O S 及C O X 2
7、表达水平。摄入过量氯化钠可以增强H p y l o r i 在胃黏膜的定植能力，且能增加H p y l o r i 在胃粘膜的定植数量，进而参与胃疾病恶性转化。然而，高盐环境诱导培养H p y l o r i 是否改变其致病能力及其机制尚不清楚。J o h nT e ta l 用含不同盐浓度( 0 2 5 一2 ) 培养基培养H p y l o r i2 6 6 9 5 ，发现其c a g A 转录水平及蛋白表达随盐浓度升高而增加，2 盐浓度导致H p y l o r i 生长缓慢。H a n a nG a n e z ，e ta l 则发现，经高盐诱导后G 2 7H p y l o r i菌
8、株逐渐开始停止繁殖，并最终死亡。H p y l o r i 生长的最适盐浓度是O 5 一1 ，2 盐浓度抑制其生长。结果提示，H p y l o r i 对高盐环境的耐受能力可能存在菌株的异质性，2 6 6 9 5 菌株更易耐受高盐刺激。我室前期研究发现，高盐诱导培养H p y l o r i 生物学特性发生了改变，其A T P 活力下降、毒力基因转录及表达能力下降，但仍然具有强效尿素酶活性及细胞定植能力。目前关于高盐诱导H p y l o r i 菌株致病能力的研究，仍停留在体外实验阶段，体内实验研究尚未见报道。综上，本研究拟应用不同疾病来源及高盐诱导H p y l o r i 菌株长期感染
9、M G s ，深入探讨胃癌及胃炎分离H p y l o r i 菌株致M G s 多脏器致病变作用，同时，探讨高盐诱导前后H p y l o r i 菌株致M G s 多脏器病变能力的变化，旨在鉴别与胃癌发生密切相关的H p y l o r i 菌株，为深入探讨不同疾病来源H p y l o r i 可能的致病机制提供实验基础。同时，为阐明高盐诱导H p y l o r i 菌株致病能力的变化以及H p y l o r i 与胃外疾病的关系提供动物实验证据。目的1 、探讨胃癌及胃炎分离H p y l o r i 菌株致M G s 多脏器致病变作用，以期鉴别与胃癌发生密切相关的H p y l o
10、 r i 菌株。2 、探讨高盐诱导前后不同疾病来源H p y l o r i 菌株致M G s 多脏器病变能力的变化，以期阐明高盐环境对H p y l o r i 致病变作用的影响。3 、为H p y l o r i 与胃外疾病的关系研究提供动物实验证据。方法1 、建立不同疾病来源及高盐诱导H p y l o r i 长期感染的M G s 模型分别经灌胃接种B 9 7 5 ( 浅表性胃炎分离株) 、4 8 5 4 ( 胃癌分离株) 、国际标准株A T C C 4 3 5 0 4 、B 9 7 5 高盐诱导株、4 8 5 4 高盐诱导株及A T C C 4 3 5 0 4 高盐诱导株感染蒙古沙土
11、鼠，在感染后1 3 周、2 6 周及7 3 周对M G s 进行解剖。2 、不同疾病来源H p y l o r i 基因型检测采用P C R 方法，检测不同疾病来源H p y l o r i 菌株基因型e a g A 、e a g G 、c a g E 、c a g M ，c a g T ，v a c A s l ，v a e A m l ，v a c A m 2 ，i c e A l ，i c e A 2 ，o i p A ，P P I a s e ，u r e B ，21 6 s 和h r g A ，分析这些基因型的遗传差异；3 、不同疾病来源及高盐诱- 导H p y l o r i 在M
12、 G s 胃粘膜定植能力的判定采用抗H p y l o r i i g G 抗体进行免疫组化染色，判定H p y l o r i 感染情况。4 、不同疾病来源及高盐诱导H p y l o r i 长期感染致M G s 多脏器病变作用的研究采用H E 染色，对M G s 多脏器病变进行组织病理学评价，观察比较不同疾病来源及高盐诱导H p y l o r i 菌株对M G s 多脏器的致病变能力差异；采用A B P A S 、G i e m s a染色及免疫组化染色( P C N A ) 方法，比较不同疾病来源及高盐诱导H p y l o r i 菌株致M G s 胃粘膜增殖及肠化生差异；采用日本
13、N D P 扫描系统，对M G s 胃粘膜不同部位进行测量，比较不同疾病来源及高赫诱导H p y l o r i 菌株对M G s 胃粘膜厚度差异。结果l 、不同疾病来源及高盐诱导H p y l o r i 菌株均能在M G s 胃粘膜定植，随感染时间的延长，定植能力逐渐下降，4 8 5 4 组及B 9 7 5 组H p y l o r i 定植能力未见明显差异，高盐诱导后，两株H p y l o r i 菌株定植能力均下降。2 、感染H p y l o r i 后第1 3 周，4 8 5 4 组M G s 粘膜糜烂溃疡发生率( 8 0 ) ，与1 3 周相比，第2 6 及7 3 周粘膜糜烂溃
14、疡发生率下降；第1 3 周，B 9 7 5 组粘膜糜烂溃疡发生率4 0 ，2 6 7 3 周粘膜糜烂溃疡发生率下降。高盐诱导后，4 8 5 4 组及B 9 7 5 组M G s 粘膜糜烂溃疡发生率及严重程度均增加。3 、不同疾病来源H p y l o r i 对M G s 胃粘膜的致病变能力存在差异，胃癌分离株导致M G s 胃粘膜炎症、糜烂溃疡、小凹上皮增生、肠化生及腺体萎缩发生率明显高于胃炎分离株。胃癌分离株还能导致粘膜发生异型增生及粘膜相关淋巴组织淋巴瘤。4 、高盐诱导前后不同疾病来源H p y l o r i 长期感染致M G s 病变能力存在差异，不同疾病H p y l o r i 分离株导致M G
