IFKine驴抗小鼠IgG抗绿色荧光标记(IF实验优化)

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1、 http:/IFKineIFKine 驴抗小鼠驴抗小鼠 IgGIgG 二抗,绿色荧光标记(二抗,绿色荧光标记(IFIF 实验优化)实验优化)IFKineIFKine GreenGreen AffiniPureAffiniPure DonkeyDonkey Anti-MouseAnti-Mouse IgGIgG(H+LH+L)应用类型:1:50 - 1:400 适用于大部分应用免疫原:小鼠 IgG来源宿主:驴反应性:该 IFKine 驴抗小鼠 IgG 二抗,绿色荧光标记(IF 实验优化)与小鼠 IgG 分子有特异性反应,经过特殊处理,与人、兔、山羊等种属来源的蛋白样本或抗体几乎没有交叉反应。保

2、存建议:在-20稳定保存 1 年IFKine Green 是一种新型绿色荧光团,其最大吸收波长在 493nm,相应的最大发射波长是 518nm。IFKine 是独特的系列新型荧光抗体产品,由于其具有市场上最高的荧光染色亮度和耐光性,并兼具较少的非特异性杂交和背景,非常适合作为免疫荧光和流式细胞术实验。IFKine 系列二抗采用最新一代的荧光染料,包括 IFKine Green、IFKine Orange 和IFKine Red 三种不同荧光团;IFKine 均为驴来源二抗以确保在多标使用中的通用型,并且经过特殊处理,其与其它种属来源的蛋白样本或抗体几乎没有交叉反应,因此其在免疫荧光分析的双标以

3、及多标实验中有更出众的表现。在免疫荧光(Immunofluorescence,IF)实验中,通常会在同一组织细胞标本上同时检测两种抗原,因而进行双重荧光染色(直接法和间接法)。一般来说,直接法简便可靠,但灵敏度较低,而且抗体来源较少;因此,大部分人会选择间接免疫荧光法:先用两种不同种属来源的特异性一抗孵育,再用对应的不同荧光素标记的二抗孵育,从而在荧光显微镜下观测。在免疫荧光实验中,有时候也需要同时对两个或多个目标蛋白进行共定位。此时,可以选择两个带有不同荧光颜色标记的一抗;然而,在更多的情况下,需要通过两到三种不同种属来源的未标记一抗,再配合两到三种带不同荧光标记的二抗以实现 IF 双标或三

4、标。那么该如何选择合适的免疫双标/多标实验的二抗? 首先需要考虑荧光颜色的选择红色和绿色是最常见的两种荧光选择,绿色如 FITC、Cy2 或新一代 Dylight 488 等荧光染料;橙色如 TRITC、Cy3 等荧光染料,而 Texas Red 则显示红色,Cy5、Cy7、APC 或新一代荧光染料 Dylight 649 等则提供了深红色显示方案。目前 IF 双标一般优先选择红色和绿色;如果是三标,则第三种颜色选择蓝色,如 AMCA 或者新一代 Dylight 350、Dylight 405 等。IFkine系列荧光二抗来自于最新一代的荧光标记基团,在荧光强度、信噪比以及荧光的耐http:/

5、淬灭性上远远由于通用的 FITC、TRITC、罗丹明等常规荧光基团的优势,同时具有接近或优于第二代荧光染料 Alexa Flour 和 Dylight 的荧光表现。其 IFkine Green 提供绿色标记方案,IFkine Green 则是 Cy3 和罗丹明的卓越替代物,IFkine Red 则为 Texas Red 提供更优越的红色荧光方案。该系列荧光团具有更高的荧光强度、更低的背景、更佳的抗淬灭性以及优异的性价比。另外二抗的类型对 IF 双标/多标也有莫大的影响在免疫荧光双标或多标时,首先样本本身的复杂条件可能会产生与二抗的非特异性杂交;另外,由于同时有两个一抗分子,因此一抗与二抗之间也

6、有一定的非特异性结合。IFkine系列荧光二抗经过特别优化,其针对目的种属的特异性非常高,同时针对其他非目的种属的抗体分子的非特异性结合降到最低,同时避免了二抗与样本以及其它一抗的非特异性杂交。在二抗的种属来源角度,因为需要考虑一抗的不同种属来源,以及免疫荧光封闭血清的选择。二抗的种属与一抗的种属最好有所区别,同时考虑到血清的种属来源要与二抗一致,所以最优的情况是,IF 多标实验中二抗的种属来源于非小鼠、非兔、非山羊,而是选择驴、马、鸡等种属来源,并且二抗采用一样的种属来源,这样可以一种来源的血清完成两个抗体的封闭。IFkine系列荧光二抗均来源于驴,可以配合驴血清进行封闭,效果非常好,在免疫

7、荧光双标以及多标实验中有更出众的表现。IFKine系列荧光(IFKine Green、IFKine Orange 和 IFKine Red)的激发光谱:IFKineIFKine荧光团荧光团激发光激发光发射光发射光发射颜色发射颜色替代基团替代基团IFKineIFKine GreenGreen493nm493nm518nm518nm绿色绿色FITC/Cy2/AlexaFITC/Cy2/Alexa 488/Dylight488/Dylight 488488IFKineIFKine OrangeOrange555nm555nm570nm570nm橙色橙色Cy3/Rhodamin/AlexaCy3/Rh

8、odamin/Alexa 555/Dylight555/Dylight 549549IFKineIFKine RedRed591nm591nm615nm615nm红色红色TexasTexas Red/AlexaRed/Alexa 594/Dylight594/Dylight 594594作为独特的系列新型荧光抗体产品,IFKine具有市场上高的荧光染色亮度和耐光性,并兼具较少的非特异性杂交和背景,非常适合作为免疫荧光和流式细胞术实验。驴来源二抗以确保在多标使用中的通用型,并且经过特殊处理,其与其它种属来源的蛋白样本或抗体几乎没有交叉反应,因此其在免疫荧光分析的双标以及多标实验中有更出众的表现。http:/

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