《灿烂甲酚蓝在单双链DNA修饰电极上的电化学行为研究》由会员分享,可在线阅读,更多相关《灿烂甲酚蓝在单双链DNA修饰电极上的电化学行为研究(2页珍藏版)》请在金锄头文库上搜索。
1、2 0 0 6 年11 月第四届海峡两岸分析化学学术会议论文集湖北武汉灿烂甲酚蓝在单双链D N A 修饰电极上的电化学行为研究杨茂霞,孙伟,姜棣,焦奎( 青岛科技大学化学与分子工程学院,青岛2 6 6 0 4 2 )电化学D N A 传感器是采用各种不同的电化学手段测定D N A 的生物传感器,将D N A 固定于电极表面后制成的D N A 修饰电极不仅可以用于选择性的检测目标序列,而且可以考察电活性小分子对单双链D N A 分子的识别能力,研究相互作用的基本模式。灿烂甲酚蓝( B C B ) 是一种酚嗯嗪类小分子化合物,具有环状平面结构且带正电荷,可以与D N A 发生明显的相互作用。本文采
2、用巯基乙醇自组装法固定了单双链D N A 制各了单双链D N A 修饰电极,对B C B 在电极上的电化学行为进行了研究。巯基乙醇自组装D N A 修饰电极的制备方法如下:将金电极依次用丙酮、乙醇、去离子水、仅一A 1 2 0 3 悬浊液等处理看得到表面清洁的裸金电极:将已抛光的裸金电极浸入1 0 0m m o l F L 巯基乙醇溶液中在室温条件下避光组装2 4 小时即得到巯基乙醇自组装修饰电极;将S A M A u 电极浸入含E D C 和N H S 的P B S 溶液中活化3 0r a i n 后再浸入含s s D N A 或d s D N A 溶液中共价键合制备得到不同D N A 修饰
3、电极。图1 分别为1 5 1 0 。4m o l LB C B 溶液在裸金电极( a ) 、s s D N A A u ( b ) 和d s D N A A u ( c ) 上的循环伏安曲线。B C B 在不同电极上的电化学参数如表1 所示。由表中可以看出,相应的峰电流和峰电位都发生了明显的变化,表明存在着不同的作用模式。B C B 在裸金电极上为一个准可逆的表面电极过程;在s s D N A A u 电极上式量电位负移表明B C B与吸附态s s D N A 发生静电作用;在d s D N A A u 电极上峰电流增大且式量电位负移变化不大,说明灿烂甲酚蓝与d s D N A 的键和反应既有
4、静电又有嵌插作用。 - - t 诗图l 灿烂甲酚蓝在裸金电极( a ) 、s s D N A A u ( b ) 和d s D N A A u ( c ) 的循环伏安曲线,扫速10 0m V s基金项目:国家自然科学基金( N o 2 0 4 0 5 0 0 8 ) 通讯联系人2 0 0 6 年11 月第四届海峡两岸分析化学学术会议论文集湖北武汉表lB C B 在不同修饰电极上的循环伏安结果考察了裸金电极、s s D N A A u 和d s D N A A u 修饰电极在B C B 溶液中扫速对峰电流的影响,随着扫速的增加,阴极峰和阳极峰电流逐渐增大,以i o g i 。对l o g v 作
5、图,可得三条直线,斜率分别为0 7 5 、O 7 9 和O 8 0 ,均在0 5 和l 之间。表明B C B 灿烂甲酚蓝在三种电极上的电极反应均为扩散与吸附联合控制的过程。考察了不同浓度的B C B 溶液在s s D N A A u 和d s D N A A u 上的循环伏安行为,随着浓度的增加,峰电流均逐渐增大并趋向于饱和,其形状符合L a n g m u i r 吸附曲线,由L a n g m u i r 吸附公式可算得B C B 在s s D N A A u 和d s D N A A u 修饰电极上的吸附常数分别为1 4 7 1 0 4M J 和3 2 2 1 0 4M “,表明D N
6、A 双螺旋结构对B C B 有更高的亲和力,B C B 与d s D N A的结合强度更大,结合物更稳定,说明B C B 对单双链D N A 有区分作用,可以作为一种新的D N A电化学杂交指示剂。参考文献:【1 】H a s h i m o t oK I t oK ,I s h i m o r lY A n a l C h e m 19 9 4 ,6 4 :3 8 3 0 2 】J uHX ,Y eYK ,Z h a oJH A n a l B i o c h e m ,2 0 0 3 3 1 3 :2 0 0 【3 】3P a n gDW Z h a n gM ,W a n gZL J E
7、 l e c t r o a n a l C h e m ,1 9 9 6 ,4 0 3 :1 8 3 E l e c t r o c h e m i c a lB e h a v i o r so fB r i l l i a n tC r e s y lB l u eo nD N AM o d i f i e dG o l dE l e c t r o d eY a n gM a o x i a , S u nW e i + ,J i a n gD i ,J i a oK u i( C o l l e g eo fC h e m i s t r ya n dM o l e c u l a rE n g i n e e r i n g ,Q i n g d a oU n i v e r s i t yo fS c i e n c ea n dT e c h n o l o g y ,Q i n g d a o2 6 6 0 4 2 )