《手性药物佐米格的磺化β环糊精毛细管电泳分析与拆分机理研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《手性药物佐米格的磺化β环糊精毛细管电泳分析与拆分机理研究（2页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、手性药物佐米格的磺化B 一环糊精毛细管电泳分析 与拆分机理研究吴春勇高静狄斌杨静刘文英( 中国药科大学药物分析教研室南京2 1 0 0 0 9 ) 新药佐米格( Z o m i g t m ) 结构中有一个手性中心，有效构型为S 型。本文以磺化B 一环糊 精为手性选择剂，首次建立了佐米格手性分离的毛细管电泳法，进行了方法学的验证，计算 了佐米格与磺化B 一环糊精之间形成包容络合物的稳定常数K ，并对两者之间相互作用的热力 学常数进行了测定。1电泳分离条件与结果 H P3 ”C E 型毛细管电泳仪( H e w l e t t P a c k a r d ) ，石英毛细管6 0 c m ( 有效
2、长度5 1 5 c m ) 5 0 “mI D ( 河北永年光导纤维厂) 。运行缓冲液为含1 磺化1 3 一环糊精( F l u k aC h e m i c a lC o ) 的2 0 m m o l L 磷酸二氢钠缓冲液( 磷酸调节p H 至3 5 0 ) ；分离电压- 3 0 K V ；柱温2 0 ；气压进 样( 5 0 m b a r ，6 s e c ) ；2 2 0 n m 检测。电泳分离结F i g 1T h ee l e c t r o p h e r o g r a mo ft h es e p a r a t i o no fZ o m i g t m E n a n t
3、i o m e r sa n dt h e i rs p e c t r u m so b t a i n e do n l i n eb yD A D( R - Z o m g i g t m ，t r l0 9 9 7 m i n ；S - Z o m g i t m t r l2 3 0 4 m i n )果和二极管阵列检测器直接测得的两对映体峰 的紫外光谱图见F i g 1 。 2分析方法验证 R 一佐米格浓度在4 8 0 “g m l 范围内线性关 系良好( A = 1 6 4 7 7 C + 3 5 6 1 3 ，r = O 9 9 9 8 ) ，进 样精密度为2 8 3 ( n
4、= 6 ) ，检测限为2 p g m l ( S N 2 3 ) ，平均回收率为9 9 9 7 ( n = 9 ，R S D = 2 2 0 ) 。药物中光学杂质低于0 5 时，光学杂质仍能准确测定。 3 包容络合物的稳定常数K 计算 稳定常数K 与对映体的电泳淌度的关系如下【1 2 1 1l11：一= = k 一，屯，一o( 。一o ) KC。一z o 式中，肋是对映体在游离状态时的电泳迁移率；。是包容络合物的电泳迁移率：。为各种手 性选择剂浓度下的电泳淌度扣除因粘度变化后的校正值。试验结果见T a b 1 。T a b 1T h er e s u l to fK由K s 、K s 的数值可
5、知，R 一佐米格更易于被包容在磺化B 一环糊精的空腔中，因此能形成具 有更多负电荷的包容络合物，在负电压条件下先出峰。 4 热力学常数的计算包容络合物的热力学函数与其分离因子a 相关哺一1 ：Rl n 口：二垒! 垒丝：2 + ( so ) 由上式可见，计算不同温度下的a 值，由1 T 对R l na 作图，所得首线的斜率和截距即可 求出对映体分离过程中的a ( A H o ) 和a ( A S o ) 。康经武等人H 1 将手性分离因子a 表示为：，一，一，口= 萼L 卫x 鱼二等幻为溶质在游离状态时的电泳迁移时间，亡。为包容络合物的电泳迁 f ；2 一气乙一f ；1 移时间，可由稳定常数中
6、所求的。换算而成。t 一为校正迁移时间。 以( 1 T ) 为横坐标，R l na 为纵坐标，测得的回归方程为：R l n a = 6 2 6 0 6 ( i T ) + 2 6 1 2 9 ( r = O 9 4 4 9 ) ，a ( A n o ) 为6 2 6 0 6 J m o l ，a ( A S o ) 为2 6 1 2 9 J ( m o l K ) ，a ( A G o ) ( 2 9 3 K )1 6 2一一_一一H一翻耐一_，一010儿艋西一 霾mj一蓝、m搿暑尴鬻为一1 4 3 0 4 J m o l 。 5 讨论 5 1 手性选择剂浓度的影响 磺化B 一环糊精浓度对佐米
7、格对映体的有效电泳淌度及其淌度差( 肛) 的影响如图2 a 、 2 b 所示。F i g 2E f f e c to ft h ec o n c e n t r a t i o no fc h i m la d d i t i v eo n e n a n t i o m e r e f f e c t i v em o b i l i t i e sf o r z o m i g t me n a n t i o m e r s ( a ) a n de n a n t i o m e re f f e c t i v em o b i I m e sd 滑e m n c e( 口U ) f
8、 o rz o m i g t me n a n t i o m e r s ( b ) 由上图可见，在试验的浓度范围内， “有一最大值。但此时的分离是在正电压条 件下得到，迁移时间长，电泳淌度随浓度变 化敏感，不利于结果的重现。在l 浓度时，分离度完全符合基线分离的要求，此浓度处于 “C 训，。关系曲线的平稳段，在1 0 0 5 的浓度范围内，“相差不大，加之考虑到手性 选择剂的费用，最终决定选用手性选择剂的浓度为1 ，此时试验重现性好。 5 2 背景电解质p H 值的影响 试验中随着p H 的升高，药物质子化程度减弱，包容络合作用减弱，同时，与络合物淌度 方向相反的电渗流( E O F ) 也随之增加，因此，迁移时间逐渐延长。为了抑制电渗流，减少毛 细管壁的吸附，保证迁移时间的重现性，决定选用低p H 值，而在低p H 范围中，p H 3 5 0 时分 离度与峰面积均最大。 此外还考察了环糊精种类、磷酸盐种类、磷酸盐缓冲液的浓度、有机改性剂、分离电压 与温度等因素对手性分离的影响。6结论 对佐米格与磺化B 一环糊精之间形成包容络合物的稳定常数K 及两者之间相互作用的热 力学常数的测定有助于拆分机理的阐明。 考文越( 喀)1 6 3
