血糖浓度测定实验详细解答

《血糖浓度测定实验详细解答》由会员分享，可在线阅读，更多相关《血糖浓度测定实验详细解答（13页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。

1、一、题目：一、题目：葡萄糖氧化酶法测定血糖浓 度血糖测量仪：血糖测量仪： 糖尿病患者需要经常独取静脉血以测定血糖，给患者造成一定的不便。有条件的患者可 以自备 l 台血糖检验仪，所测指血或耳血为毛细血管的血糖值，略高于静脉血糖值。但要 注意，当寒冷、水肿及血管痉挛时，稍受影响，其测定范围为05277 毫摩尔/升 (10500 毫克/分升) 。目前市场上常见的血糖仪按照测糖技术可以分为电化学法测试和光 反射技术测试两大类。前者是酶与葡萄糖反应产生的电子再运用电流记数设施，读取电子 的数量，再转化成葡萄糖浓度读数。后者是通过酶与葡萄糖的反应产生的中间物（带颜色 物质） ，运用检测器检测试纸反射面的

2、反射光的强度，将这些反射光的强度，转化成葡萄糖 浓度，准确度更高。 目前市场上尚有笔式及其他型号微量血糖测试仪供使用。90 年代以来国外研制出无损伤 血糖检测仪，是用电脑化的近红外线透过皮肤面测量其吸收变化，可在 5 秒钟内测出 222222 毫摩尔/升(40400 毫克/分升)血糖。 二、实验目的二、实验目的教学目的教学目的 学习葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖浓度的基础上，掌握血糖的正常参考值，掌握 肾上腺素对血糖浓度的影响，熟悉尿糖的半定量检测。 教学要求教学要求 （一） 掌握血糖的正常参考值，复习血糖的来源与去路；掌握肾上腺素对血糖浓度的影 响机理。 （二） 熟悉葡萄糖氧化酶-过氧化

3、物酶法测定血糖的操作步骤及注意事项。 （三） 熟悉葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖的原理，血清的制备，血糖浓度及血 糖增高率的计算，尿糖的原因及尿糖半定量检测的原理及方法。 (四) 了解动物耳缘静脉取血法，血糖调节的几种因素及血糖测定的临床意义。 教学内容教学内容 （一） 实验原理：血糖的正常参考值，血糖的来源与去路，血糖调节的几种因素，肾上 腺素对血糖浓度的影响机理，血糖测定的临床意义，葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖 的原理；尿糖的原因及尿糖半定量检测的原理。 （二） 实验操作：血糖测定及肾上腺素对血糖浓度的影响（收集注射肾上腺素前后耳缘 静脉血，制备血清，葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测

4、定血糖浓度） ；尿糖半定量检测。 （三） 计算血糖浓度及血糖增高率。 三、血糖定义：三、血糖定义：血糖（BS，BG）指血液中所含的葡萄糖。正常人血糖浓度相对稳定，饭后血糖可以暂时 升高，但不超过 180mg/dl，空腹血液浓度比较恒定，正常为 70-110mg/dl（3.9- 6.1mmol/L）。血中的糖类，绝大多数情况下都是葡萄糖，还有乳糖、半乳糖。体内各组织 细胞活动所需的能量大部分来自葡萄糖，所以血糖必须保持一定的水平才能维持体内各器 官和组织的需要。糖分是我们身体必不可少的营养之一。人们摄入谷物、蔬果等，经过消化系统转化为单 糖（如葡萄糖等）进入血液，运送到全身细胞，作为能量的来源。

5、如果一时消耗不了，则 转化为糖原储存在肝脏和肌肉中，肝脏可储糖 70120 克，约占肝重的 610%。细胞所能 储存的肝糖是有限的，如果摄入的糖分过多，多余的糖即转变为脂肪。 当食物消化完毕后， 储存的肝糖即成为糖的正常来源，维持血糖的正常浓度。在剧烈运动时，或者长时间没有 补充食物情况，肝糖也会消耗完。此时细胞将分解脂肪来供应能量，脂肪的 10%为甘油， 甘油可以转化为糖。脂肪的其它部分亦可通过氧化产生能量，但其代谢途径和葡萄糖是不一样的。人类的大脑和神经细胞必须要糖来维持生存，必要时人体将分泌激素，把人体的 某些部分（如肌肉、皮肤甚至脏器）摧毁，将其中的蛋白质转化为糖，以维持生存。象过 去

6、在图片上看到的那些难民个个骨瘦如材，就是这个原因。 人体所有的细胞所需的糖都由 血液来输送，所以维持血液中糖的恰当的浓度是很重要的。四、血糖的来源和去路四、血糖的来源和去路来源来源 1、食物，米、面、玉米、薯类、砂糖（蔗糖） 、水果（果糖） 、乳类 （乳糖）等，经胃肠道的消化作用转变成葡萄糖，经肠道吸收入血液成为血 糖。 为什么要在饥饿条件下采血？血糖主要来源是食物，进食会增高血糖浓 度。 2、储存于肝脏中的肝糖原和储存于肌肉的肌糖原、脂肪等分解成葡萄糖入血。3、非糖物质即饮食中蛋白质、脂肪分解氨基酸、乳酸、甘油等通过糖异生作 用而转化成葡萄糖。 糖异生：体内从非糖类物质如氨基酸、丙酮酸、甘油

7、等合成葡萄糖的代谢， 是维持血糖水平的重要过程。虽然由丙酮酸开始的糖异生利用了糖酵解中的七 步进似平衡反应的逆反应，但还必需利用另外四步酵解中不曾出现的酶促反应， 绕过酵解过程中不可逆的三个反应。糖异生保证了机体的血糖水平处于正常水 平。糖异生的主要器官是肝。肾在正常情况下糖异生能力只有肝的十分之一， 但长期饥饿时肾糖异生能力可大为增强。糖异生作用的主要生理意义是保证在 饥饿情况下，血糖浓度的相对恒定。 去路去路 1、葡萄糖在组织器官中氧化分解供应能量 2、在剧烈活动时或机体缺氧时，葡萄糖进行无氧酵解，产生乳酸及少量能量 以补充身体的急需； 3、葡萄糖可以合成肝糖元和肌糖元储存起来；多余的葡萄

8、糖可以在肝糖转变 为脂肪等。 4、当血糖浓度高于 8.9mmol/L（160mg/100ml）时，则随尿排出，形成糖尿。糖酵解：葡萄糖或糖原在组织中进行类似发酵的降解反应过程。最终形成乳 酸或丙酮酸，同时释出部分能量，形成 ATP 供组织利用。糖酵解在细胞的细胞 质中进行。早先人们只知道糖在无氧环境下可降解为乳酸，但今天人们终于清 楚知道，不论有氧还是无氧环境，糖会经过同样的过程分解为丙酮酸。不同的 则是在有氧条件下，丙酮酸会被丙酮酸脱氢酶转化为乙酰辅酶 A，进而进入三 羧酸循环完全被分解为二氧化碳。在原核生物和真核生物的大部分缺氧细胞或 组织（骨骼肌）中，丙酮酸会转化成乳酸，或者像糖类被酵母

9、分解那样，转化 为乙醇和二氧化碳(CO2)。 五、血糖的调节五、血糖的调节人体正常血糖含量人体正常血糖含量 3.89-6.11mmol/L 血液浓度能维持相对恒定是由于机体内存在一整套高效率的调节机制，精细地控制着血 糖的来源与去路，使之达到动态平衡。 （一）神经系统的调节作用 神经系统对血糖浓度的调节作用主要通过以下丘脑和自 主神经系统对所控制激素的分泌，后者再通过影响血糖来源与去路关键酶的活性来实现。 神经系统的调节最终通过细胞水平的调节来达到目的。 下丘脑一方面通过内脏神经作 用于肾上腺髓质，刺激肾上腺素的分泌；另一方面也作用于胰岛 -细胞，使其分泌胰高 血糖素；同时还可以直接作用于肝。

10、三方面共同作用的结果是使肝细胞的磷酸化酶活化， 使糖原分解加速；糖异生关键酶的活性增加，糖异生作用增加，从而使血糖浓度升高。 下丘脑了可通过迷走神经兴奋，使胰腺 -细胞分泌胰岛素，同时还可直接作用于肝，使 肝细胞内糖原合成酶活化，促进肝糖原的合成；此外还抑制糖异生途径，促进糖的氧化和 转化，总体上使血糖的去路增加，来源减少，最终达到使血糖浓度降低的目的。 （二）激素的调节作用 调节血糖浓度的激素可分为两大类，即降低血糖浓度的激素 和升高血糖浓度的激素。各类激素调节糖代谢反应从而影响血糖浓度的机制在表 3-1 中简 要说明。 1胰岛素胰岛素是胰岛 细胞分泌的一种蛋白类激素，由 51 个氨基酸组

11、成。血中葡萄糖或氨基酸浓度高时，可促进胰岛素的分泌。 胰岛素对血糖的调节机制， 首先是使肌肉和脂肪组织细胞膜对葡萄糖的通透性增加，利于血糖进入这些组织进行代谢。 胰岛素还能诱导葡萄糖激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶的合成，加速细胞内葡萄糖的分 解利用。胰岛素通过使细胞内 cAMP 含量减少，激活糖原合成酶和丙酮酸脱氢酶系，抑制 磷酸化酶和糖异生关键酶等，使糖原合成增加，糖的氧化利用、糖转变为脂肪的反应增加， 血糖去路增快；使糖原分解和糖异生减少或受抑制，使血糖来源减少，最终使血糖浓度降 低。 近年来从人血清中分离出的类胰岛素生长因子（insulin-likegrowthfactor，IGF， 也

12、称 somatomedins）其化学结构和生物学特性类似胰岛素，但 IGF 的免疫学性质与胰岛素 完全不同。IGF 通过 IGF 受体和胰岛素?相当于胰岛素的一部分，例如：促进脂肪细胞转 变、摄取和氧化葡萄糖，并合成脂肪的强度仅为胰岛素的 1/50 或 1/100；对心肌细胞摄 取葡萄糖的作用为胰岛素的 1/2 或 1/5；对骨骼肌摄取、氧化葡萄糖及合成糖原的作用只有 胰岛素的 1/20。IGF 的长期效应是促进生长。 2胰高血糖素是胰岛 细胞合成和分 泌的由 29 个氨基酸组成的肽类激素，分子量为 3500。其一级结构和一些胃肠道活性肽如 胰泌素、肠抑制胃肽（GIP）等类似。血糖降时胰高血糖

13、素分泌增加，高糖饮食后其分泌则 减少。 胰高血糖素主要通过提高靶细胞内 cAMP 含量达到调节血糖浓度的目的。细胞 内的 cAMP 可激活依赖 cAMP 的蛋白激酶，后者通过酶蛋白的共价修饰改变细胞内酶的活 性，即激活糖原分解和糖异生的关键酶，抑制糖原合成和糖氧化的关键酶，使血糖升高。 该蛋白激酶还激活脂肪组织的激素敏感性脂肪酶，加速脂肪的动员和氧化供能，减少组织 对糖的利用，从而加重血糖升高。目前认为，胰高血糖素是使血糖浓度升高的最重要的激 素。 胰高血糖素的前体为无活性的胰高血糖素原。由肠道上皮细胞生成和分泌的类似 胰高血糖素的物质叫肠高血糖素。所以，用一般免疫法测得的高血糖素由胰高血糖素

14、、胰 高血糖素原、肠高血糖素 3 种形式组成，正常血浆中的基础浓度为 50-100ng/L。 在激 素发挥调节血浆浓度的作用中，最重要的是胰岛素和胰高血糖素。肾上腺素在应激时发挥 作用，而肾上腺皮质激素、生长激素等都可影响血糖水平，但在生理性调节中仅居次要地 位。 综上所述，胰岛素和胰高血糖素是调节血糖浓度的主要激素。而血糖水平保持恒定则是 糖、脂肪、氨基酸代谢协调的结果。 肝在糖代谢调节中的作用肝是调节血糖浓度的 主要器官，这不仅仅是因为肝内糖代谢的途径很多，而关键还在于有些代谢途径为肝所特 有。 餐后食物中糖类经消化吸收，以葡萄糖形式大量进入血液，使血糖浓度暂时轻度 升高。此时葡萄糖直接促

15、进肝等组织摄取葡萄糖，使肝细胞内糖原合成明显增加，同时也 抑制肝糖原的分解，减少其向血中释放葡萄糖，同时还使糖转为脂肪，结果是餐后血糖浓 度仅轻度升高，并很快恢复至正常范围。饥饿时肝通过自己特有的葡萄糖-6-磷酸酶，将贮存的肝糖原分解成葡萄糖以提供血糖，而肌糖原则不能转为葡萄糖。 肝还是糖异生的 主要器官（表 3-2） ，在生理情况下，甘油、氨基酸等非糖物质主要在肝细胞骨转变成葡萄 糖，以补充血糖因空腹所致血糖来源不足。这是因为糖异生途径的关键酶：丙酮酸羧化酶、 磷酸烯醇式丙铜酸羧激酶的活性似肝最高。饥饿或剧烈运动时，肝脏利用非糖物质转变成 糖的作用尤为显著。此外，肝所具有的果糖二磷酸酶、葡萄

16、糖-6-磷酸酶在其他单糖转化为 葡萄糖的方面也起着重要作用。 由此可见，肝在血糖的来源与去路方面所发挥的作用 较其他器官全面，所以它是维持血糖恒定的关键器官。当机体需要时，通过神经-激素的作 用，使肝细胞内各种糖代谢途径的酶活性改变，实现肝维持血糖浓度恒定的目的。当肝功 能严重受损时，进食糖类或输注葡萄糖液都可发生一时性高血糖甚至糖尿，而饥饿时则可 出现低血糖症状。血糖平衡的神经调节中，神经中枢是下丘脑的不同区域，效应器有多个， 属间接刺激。 1、血糖浓度升高血管壁等处的化学感受器兴奋传入神经下丘脑中调节血糖平衡 的某一区域传出神经胰岛 B 细胞分泌胰岛素肝脏，骨胳肌脂肪组织等处的体细胞 血糖浓度降低。 2、血糖浓度过低血管壁等处的化学感受器兴奋传入神经下 丘脑中调节血糖平衡的某一区域传出神经胰岛 A 细胞分泌胰高血糖素，肾上腺髓质分 泌肾上腺素肝脏等处的体细胞血糖浓度升高。 药物对血糖调节的影响正常人的糖