不明原因习惯性流产患者的Th亚群激活状态研究

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1、H C V 试剂的实际使用情况比较分析表明，虽然各试剂厂商均称自己的试剂是第三代E L I S A 抗H C V 产品，但各试剂的各 种重复性和特异性的符合率均达不到国际第三代试剂的 9 9 的要求；从配对M c N e m a r 检验分析表明，国产各试剂的阳性检出率的差异有非常显著的统计学意义。对于输血安全来说，这些资料足以说明，各试剂的灵敏度在实际使用中的差 别是很大的。虽然用国产两种( 或三种或多种) 不同的E L I S A 抗一H C V 试剂检测同一份标本可以减少一部分抗H C V 阳性漏检标本( 同时增加了假阳性数) ，但由于国产的这些试剂在实际使用中灵敏度、特异性、重复性的差

2、异很大的原因，还会有抗一H C V 阳性标本不能被筛检出。显然，用国产E L I S A 抗一 H C V 试剂即使做两遍献血血液检测也不能完全保证受血者 完全不感染H C V 病毒。法国的C o u r o u c eA M 比较了美国产的A b b o r tH C VE I A 3 0 ，O r t h oH C V3 0 E L I S AT e s tS y s t 日 n ， U B IH C VE I A4 0 ，比利时产的I r m o t e s tH C V A b ，英国产的 M u r e xa n t i H C VV e r s i o n ，法国产的M o n o

3、 l i s aa n t i H 阱n e wa n t i g e n s ，意大利产的E T I A B - H C V K - 3 共五个国家七个厂商 的试剂的灵敏度及特异性，结果均有假阴性的存在。而我国 试剂批准部门及各临床检验中心却以A b b o t t 或O r t h o 为判断标准评价国产抗一H C VE L I s A 试剂质量。可见我国现有抗一 H C VE l 。I S A 试剂质量与国外比还有很大差距。国家质量检 验检疫总局和国家食品药品监督管理局应对用于输血检测的 E L I S A 抗一H C V 试剂质量标准按国际高标准的要求做出严格规定，并在合格的试剂上标示

4、。 虽然一些国家应用高质量的抗一H C V 检测试剂，但仍有输血性丙型肝炎的发生。人们认识到，进一步缩短检测的“窗 口期”和应用高质量的抗一H C V 检测试剂是保证输血安全和 降低H C V 感染的残余风险度的基本措施。缩短检测的“窗口 期”的方法有H C VA g 检测和H C VR N A 核酸检测( N A T ，N u d e i c - a c i da m p l i f i c a t i o nt e c h n o l o g y ) 。据报道，H C VC o r eA g可以在感染两周后被检出，与H C VR N A 的检出时间大致相 同( Y c H C V 需在感染

5、的7 0 天后才被检出) ，大大缩短检测的“窗口期”。近年来，西班牙、意大利、法国、德国、英国、以色列 等一些国家规定把H C VA g 检测作为献血员和血液检测的常规项目，在欧洲、日本、美国等一些国家中，H C VR N A 核酸检测技术( 、) 开始用于献血员的筛检，其目的是迸一步保证 输血安全、持续降低输血后H C V 感染的残余风险度。这些国2 8 1 家的资料和本文十多年的研究资料证明：单纯依靠抗一H C V不同试剂多次检测的方法仍有残余比例的输血性丙型肝炎发生，实践证明它不是预防输血传播性丙型肝炎的更好方法。依据近年来许多国家的研究成果，我们认为应用高质量的抗 H C V 检测试剂

6、和H C VA g 检测或H C VR N A 检测两项联合检测是保证输血安全和持续降低H C V 感染的残余风险度的更好措施。我国是丙型病毒性肝炎高发病区，为提高输血安 全、降低输血性H C V 感染的风险度，增加H C V 抗原检测应是一个性价比很好的选择方案。本文资料证明，趾水平与抗一H C V 有关联性，但列联系 数不大，两者关系较疏远。这说明在我国目前抗- H C V 检测 代替A L T 检测的可能性不大。在美国，早先的m 月活性检测是筛选非甲非乙型肝炎病毒的指标，现在已把非甲非乙型 肝炎病毒令名为H C V ，所以美国的学者和研究机构的结论是抗。H C V 筛检献血血液后，就不必

7、要再侧札丁活性浓度，也就是用抗一H C V 检测效果代替了啦卫浓度测定。但在其他 许多国家都明确要求献血员检测A L ，T 。虽然还有一些问题和各种不同观点，但本文资料表明，我国目前的试剂质量和方 法状况不支持抗一H C V 检测的效果能代替A L ，T 检测。我国 献血法明确要求对献血员和输血血液必须m J 和抗一H C V检测合格。输血后丙型肝炎的诊断涉及到医疗纠纷和赔偿等法律问 题。因医患关系的矛盾以及医院与血站连带或共同作为的法律原因，使得输血性丙型肝炎的诊断存在较大顾忌。也由于名誉和利益的原因，一些资料都不能及时公开。因此，输血性丙型肝炎的诊断即使有标准也会变得人为的不确定性。这些问

8、题的存在表现出我国制定的这方面的法律不利于受害者， 不公平。这也不利于对保证输血安全和降低H C V 感染的残余风险度的研究。我们认为输血后丙型肝炎的诊断只要达到以下2 个标准就可确诊：1 受血者输血前肝功能正常，抗H C v 等阴性，并留血样备查；2 受血者输血2 周后，肝功能 异常，m 高于正常2 倍以上，H C v R N A 阳性和俄抗H C v阳性。本文资料分析表鲳，本地区输血性丙型肝炎病毒的基 因型主要是1 b 型。由于1 b 型与肝病的严重程度密切相关，有发展为慢性肝炎、肝硬化、甚至肝癌的趋势，其治疗预后不理想，其赔偿相对要多。因此，建议输血性丙型肝炎的诊断可以增加基因分型诊断。

9、不明原因习惯性流产患者的T h 亚群激活状态研究谭玉洁马莉王焰刘若英T h l 和T h 2 细胞是C D + T 辅助细胞( Th e l p e rc e l l ，T h )的两个亚型，在免疫调节中起重要作用。T M 和T h 2 细胞可分泌不同的细胞因子，多种细胞因子在对T h l r h 2 细胞亚群的激活与转化及其它各种免疫细胞的相互调节作用中发挥着重要作用。已有越来越多的证据表明，T h l Z r h 2 细胞亚群激 活状态与妊娠结局有密切联系，T h l T h 2 亚群失衡与妊娠病作者单位：5 5 0 0 0 1 ，贵阳医学院附属医院中心实验室理有关。 为了探讨不明原因习惯

10、性流产与T h 亚群激活状态的关系，我们对习惯性流产患者的外周血淋巴细胞亚群及T h l T h 2 型细胞因子水平等指标进行了一些观察和分析，现报告于后。材料与方法1 研究对象： U R A 组：2 0 例，为2 0 0 1 年5 月至2 0 0 3 年5 月期间，到贵阳医学院附属医院妇产科就诊的不明原因自然流产患者，按2 8 2 文献诊断标准确诊，为非妊娠阶段，年龄2 2 - - 4 2 岁，平均2 7岁。对照组：1 8 例，同期到我院进行体检的健康育龄经产妇， 非妊娠阶段，年龄2 2 - - 3 6 岁，平均2 6 岁。F A C s c u l i b u r 流式细胞仪( F C M

11、 ) B D 公司采集受检者外周静脉血，分离血清，一2 0 E 冷冻保存，用 作T O R C H 特异性抗体检测；用E D T A 抗凝全血及血浆，作淋 巴细胞亚群计数和细胞因子水平测定。二、方法：1 淋巴细胞亚群分类计数采用流式细胞分析术，试剂盒 购自美国B e c t o nD i c k i n s o n ( B D ) 公司，主要包括C D 3 一F I T C C D 4 一P E ；3 一F I T C C D 8 一P E ；c D 8 一F I T C 佃1 9 一P E ；8 一F I T C V C D l 6 + 5 6 一P E 四种单克隆抗体及鼠同型I g G l

12、 一F I T C I g G 2 a - P E 阴性对照。实验流程参照试剂盒说明书进行。数 据获取及分析：F C s S S C 密度图设门，以F L l 对F L 2 收集 1 0 0 0 0 个细胞，C e l l q u e s t 软件分析，获得C D 3 + 、C I M + 、 、 C D l 6 + 5 6 + 以及C D l 9 + 细胞的百分率。2 T h l q h 2 型细胞因子测定( C B A 法) ，用组合微珠捕获法( C y t o m e t r i cB e a dA r r a y ，Q 认) ，结合流式细胞技术进行测 定和数据计算。试剂盒购自B D 公

13、司：主要包括五种荧光强 度不同的人类细胞因子捕获珠，珠表面已分别包被有抗人I L 2 、I l ，4 、I L - 5 、I I ，1 0 及I F N 一了的抗体；P E 标记的人T h l T h 2 型细胞因子检测试剂以及人T h l T 忱型细胞因子标准品等。数据获取： 在B DC B AI n s t r u m e n tS e t u p 模板下运行B e a d sC y t o m e t e r 。用C e l l q u e s t 软件建立获取模式。 建立F S C 对S S C 点图，设门R 1 ，使R 1 细胞数为1 8 0 0个。3 统计学处理：用S x 3 s

14、1 0 0f o rw i n d o w s 统计软件包进 行统计分析。血清I g M 抗体阳性率的差异采用x 2 检验；样本 均数的检验采用单因素方差分析，若方差齐采用L S D 法，方差不齐则用T a m h a n e 法。结果1 U R A 患者外周血淋巴细胞亚群数量测定：表1 可见， L I R A 患者比对照组的c 1 2 + 细胞显著减少( P 2 0 0 n g m l 为1 1 9 例。实验室检查A F P 阳性血清中的白蛋白，总胆红素，凝血酶原时间，A L ，T 、A S T 、7 一G T 、A K P 等指标都有不同作者单位：4 7 6 1 0 0 商丘市第一人民医院

15、检验科程度异常。血清A F P 与肝功能损害程度的关系，1 7 3 例中A F P 2 0 0 r i g m i l l 9 例，白球蛋白呈倒置关系者2 0 例，岍、A S T 、7 一G T 、A K P 等指标增高者1 1 8 例，说明高水平A F P 阳性者，肝脏损害程度严重，病人死亡率也越高。 肝癌患者不易治愈，特别是中晚期死亡率高，见于A F P 阳性率与H B V 、H C V 之间的关系，肝炎病毒携带者越多，患肝癌的机率就越大，我区又是肝病患者高发区，本人认为：一、加强自身的防卫能力，养成良好的卫生习惯，少到公共场所吃喝。二、 丑3 B A g 阴性者定期注射疫苗。三、尽量避免血源传染。四、肝炎病毒携带者要早发现早治疗。减轻肝纤维化，有效降低肝细胞癌的发生率。