《仪器分析总结》由会员分享，可在线阅读，更多相关《仪器分析总结（2页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、?仪器分析爆头总结?填空 ： PCR 推导公式N=N0* （1+e）n 次方，质谱分析仪的构造（进样系统，离子源，质量分析器，检测器），IE 离子源，色谱法分为气相色谱法、液相色谱法，朗伯比尔定律：朗伯光的吸收程度和吸收层厚度的关系Ab 比耳又提出了光的吸收程度和吸收物浓度之间也具有类似的关系A c 二者的结合称为朗伯比耳定律。A b c = lg（I0/It) 在吸光值A=0.434 时， 测量误差最小， 而测量误差小于5%时， 吸光值 A 在 0.15 到 1 之间， PCR 的四个时期（基线期，指数增长期，线性增长期，平台期），电泳中的上样缓冲液成分（溴酚蓝，甘油）作用（甘油可以使待电泳
2、样品沉在点样孔底部，避免样品漂浮：第二，其中含有的溴酚蓝（某些有二甲苯青）作为电泳进度的指示分子，PAGE 凝胶电泳中的四种剂（过硫酸铵，单体，催化剂，加速剂，交联剂），前处理：溶液进样，凝胶电泳的三个效应原理（浓缩效应，电荷效应，分子筛效应） ，聚丙烯酰胺凝胶电泳的四个不连续性（凝胶层， .缓冲液成分， .pH，电位梯度的不连续性） ，凝胶中Cl为快离子，Gly 为慢离子，蛋白质样品被夹在中间，等电点聚焦电泳（电泳系统中加进两性电解质载体，当通已直流电时，两性电解质载体即形成一个由阳极到阴极连续增高的pH 梯度） SYBR 要做熔解曲线，当扩增效率 E 为百分之百时，A 为-3.32，标准质
3、谱图基本都是采用EI 源(70eV) 获得的，场致离子源包括场电离和场解析，四极杆分析器（四根棒状电极，形成四极场，由四根带有直流电压（DC）和叠加的射频电压（RF）的准确平行杆构成，相对的一对电极是等电位的，两对电极之间电位相反），质谱仪中最常用的离子检测器是电子倍增器，质谱图最高的峰称为基峰，其相对丰度定为100%，其它离子峰的强度按基峰的百分比表示， 值极具重现性，PCR 曲线的两种表达形式（对数图谱和线性图谱）选择，天体科学上的许多重大发现都是依靠哈勃望远镜的观测而得到的。扫描隧道显微镜的发明对细胞分化、 纳米科技的兴起和发展可以说起到决定性作用，X 射线衍射技术促进DNA双螺旋结构发
4、现，Mullis 发现 PCR，人类基因组计划与曼哈顿原子弹计划、阿波罗登月计划并称科学史上三大计划。微量分析试液质量0.1 到 10mg,试液体积0.1 到 1ml，非光谱法是指那些不以光的波长为特征的信号，仅通过测量电磁波幅射的某些基本性质（反射，折射，干涉，衍射，偏振等）。 （互补光：共同组成白光的两种颜色的光，如蓝黄， 绿紫）， 高锰酸钾可选择性吸收绿光，因而白光中剩下互补光紫色光，溶液呈紫色。摩尔吸光系数在数值上等于浓度为1 mol/L 、液层厚度为1cm 时该溶液在某一波长下的吸光度。透光率：描述入射光透过溶液的程度:透射光的强度It与入射光强度I0 之比称为透光率(transmi
5、ttance). 用 T 表示吸光度： 透光率的负对数称为吸光度，用符号A 表示， A lg T，T 越小，则A 愈大，溶液对光的吸收愈多，朗伯 比耳定律成立假定：所有吸光质点间不发生相互作用；只有在稀溶液(c10-2 mol/L) 时才基本符合，色散元件（棱镜/光栅）：将复合光分解成单色光，是单色器部件最关键的部件。石英棱镜可用于紫外光区光谱的分光，玻璃棱镜只用于可见光区光谱的分光。EB 要在紫外线下显色，气相色谱顶空法加液量不超过瓶体积的 2/3，PAGE 中的巯基乙醇作用是打开链内二硫键，DNA 分子在碱性缓冲液中带负电荷，聚丙烯酰胺凝胶电泳的四个不连续性目的是为了浓缩效应，PCR 模板
6、浓度过高会导致反应非特异性增加，判断 ：一共 5 道，错题居多，特别绝对的全错，（对于不同物质，它们的吸收曲线形状和max 则不同和软离子的那个是对的）。名词解释 ：等离子体：一般指电离度超过0.1%被电离了的气体，这种气体不仅含有中性原子和分子，而且含有大量的电子和离子，且电子和正离子的浓度处于平衡状态，从整体来看是出于中性的。色谱柱的老化：装填好的色谱柱，连接于仪器上后，应先试压，试漏，而后在恒定的温度下用载气吹洗数小时后承受分析，一般称此为柱子的老化过程最大吸收波长（吸收光谱中，吸光度最大处的波长为最大吸收波长，用max 表示），质谱（分析） 按照离子的质量对电荷比值(即质荷比 )的大小
7、 ,依次排列构成的图谱。质谱法按照离子的质核比（ m/z）大小对离子进行分离和测定的方法。内标法：在试样和标准样品中加入同样浓度的某一元素（内标元素） ，利用分析元素和内标元素的谱线强度比与待测元素浓度绘制工作曲线，并进行样品分析），溶剂效应：在不分流进样过程中，样品初始谱带较宽(样品汽化后的体积相对于柱内载气流量太大)汽化的样品中溶剂是大量的， 不可能瞬间进入色谱柱，结果溶剂峰就会严重拖尾，使早流出组分的峰被掩盖在溶剂拖尾峰中如图 4-3(a)所示 ，从而使分析变的困难，甚至不可能。气象色谱： 以惰性气体为流动相、以固定液或固体吸附剂作为固定相的色谱法称为气相色谱法。平台效应：理论上，PCR
8、 反应产物呈指数性增长，但这种增长形式在扩增25-25 个循环以后便放慢直至停止，达到反应平台， 此时扩增产物量不再随循环次数的增加而呈指数增长问答： 等离子体三种气（雾化器）的作用ICP 光源的气流（冷却气 起冷却作用， 保护石英炬管免被高温融化；辅助气 “ 点燃 ” 等离子体；雾化气 形成样品气溶胶将样品气溶胶引入ICP对雾化器、雾化室、中心管起清洗作用分子信标的原理（附图）质谱仪的离子源、质量分析器为啥必须处于高真空状态（若真空度低，则大量氧会烧坏离子源的灯丝；使本底增高，干扰质谱图；引起额外的离子分子反应，质谱复杂化；干扰离子源中电子束的正常调节；用作加速离子的几千伏高压会引起放电。）PCR 的优点，特异性强，引物与模板结合的特异性及聚合酶的忠实性，灵敏度高，指数增长，从 pg (10-12)可扩增至ng(10-6)水平，简便、快速，24 小时完成扩增。对标本的纯度要求低。DNA 粗制品及总RNA 均可作为扩增模板Taqman探针的原理）计算 ：PCR 的 CT 值初始拷贝数；以糖尿病人为例由图看灯塔灯塔，
