《湖北省宜昌市葛洲坝中学2017-2018学年高二生物人教版选修一学案：专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》由会员分享，可在线阅读，更多相关《湖北省宜昌市葛洲坝中学2017-2018学年高二生物人教版选修一学案：专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（8页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、WtuWgifWtuWgif1专题专题 2 2 课题课题 2 2 土壤中分解尿素的细菌的分离与土壤中分解尿素的细菌的分离与计数计数【学习目标】研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定。研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定。【学习重点与难点学习重点与难点】1 1对土样的选取和选择培养基的配制。对土样的选取和选择培养基的配制。2 2对分解尿素的细菌的计数。对分解尿素的细菌的计数。【知识链接知识链接】尿素尿素CO(NHCO(NH2 2) )2 2 最初是从人的尿液中发现的，后来也是人工合成的第一个最初是从人的尿液中发现的，后来也是人工合成的第一个有机物，广泛存在于自然界中。尿
2、素是一种有机态氮肥，经过土壤中细菌将尿有机物，广泛存在于自然界中。尿素是一种有机态氮肥，经过土壤中细菌将尿素分解成氨之后才能被植物吸收利用。素分解成氨之后才能被植物吸收利用。【新知预习新知预习】一、研究思路一、研究思路1 1筛选菌株筛选菌株尿素是一种重要的氮肥，农作物尿素是一种重要的氮肥，农作物_直接吸收利用，而是首先通过土直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为壤中的细菌将尿素分解为_和和 COCO2 2，才能被植物利用，这是因为土壤中的，才能被植物利用，这是因为土壤中的这些细菌能合成这些细菌能合成_。因此，利用这一特点，可以将这些细菌从土壤中筛。因此，利用这一特点，可以将这些细菌
3、从土壤中筛选出来。选出来。(1)(1)实验室中微生物的筛选的原理：人为提供有利于实验室中微生物的筛选的原理：人为提供有利于_生长的条件生长的条件( (包括营养、包括营养、_、pHpH 等等) )，同时，同时_或或_其他微生物生长。其他微生物生长。(2)(2)选择培养基：在微生物学中，将允许选择培养基：在微生物学中，将允许_种类的微生物生长，同时种类的微生物生长，同时_或或_其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。WtuWgifWtuWgif22 2统计菌落数目统计菌落数目常用来统计样品中活菌数目的方法是常用来统计样品中活菌数目的方法是_。当样品的
4、。当样品的_足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中_。通过。通过统计平板上的统计平板上的_，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在准确，一般选择菌落数在_的平板进行计数。这种方法统计的菌落数比的平板进行计数。这种方法统计的菌落数比活菌的实际数目活菌的实际数目_。这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察。这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是到的只是_个菌落。因此，统计结果一般用个菌落。因此，统计结果一般用_而不是活菌数来表而不是活
5、菌数来表示。除此之外，示。除此之外，_也是测定微生物数量的常用方法。另外，细也是测定微生物数量的常用方法。另外，细菌的数目还可以通过菌的数目还可以通过_法来测定，例如，测定饮水中大肠杆菌数量的方法来测定，例如，测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将法是将_的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到_培养基上培养，培养基上培养，大肠杆菌菌落呈现大肠杆菌菌落呈现_色，通过计数得出水样中大肠杆菌的数量。你认为色，通过计数得出水样中大肠杆菌的数量。你认为在该实验中至少应取在该实验中至少应取_个水样。个水样。思考：思考： 如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？如何从平板上的菌
6、落数推测出每克样品中的菌落数？3 3设置对照设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中设置对照的主要目的是排除实验组中_对实验结果的影响，提高实验对实验结果的影响，提高实验结果的结果的_。例如为了排除培养基是否被杂菌污染了，需以培养该种生。例如为了排除培养基是否被杂菌污染了，需以培养该种生物的物的_培养基作为空白对照。培养基作为空白对照。对照实验是指除了对照实验是指除了_的条件外，其他条件都的条件外，其他条件都_ _的的实验。满足该条件的称为实验。满足该条件的称为_组，未满足该条件的称为组，未满足该条件的称为_组。组。二、实验设计二、实验设计实验设计的内容包括实验设计的内容包括_、材料用具、材料
7、用具、_和时间安排等。关于土壤中某样品细菌的分离与计数的实验操作步骤如下：和时间安排等。关于土壤中某样品细菌的分离与计数的实验操作步骤如下：WtuWgifWtuWgif31 1土壤取样土壤取样从肥沃、湿润的土壤中取样。应先铲去从肥沃、湿润的土壤中取样。应先铲去_3_3 cmcm 左右，再取样，左右，再取样，将样品装入事先准备好的将样品装入事先准备好的_中。中。2 2样品的稀释样品的稀释样品的样品的_将直接影响平板上生长的菌落数目。由于不同微生将直接影响平板上生长的菌落数目。由于不同微生物在土壤中物在土壤中_不同，因此，分离不同的微生物采用不同的不同，因此，分离不同的微生物采用不同的_范围，其目
8、的是保证获得菌落数在范围，其目的是保证获得菌落数在_之间、适于计数的平板。细菌之间、适于计数的平板。细菌稀释度为稀释度为_，放线菌稀释度为，放线菌稀释度为 10103 3、10104 4、10105 5，真菌稀释度为，真菌稀释度为_。第一次实验时，可以将稀释的范围。第一次实验时，可以将稀释的范围_一点，以保证一点，以保证能从中选择出适于计数的平板。能从中选择出适于计数的平板。3 3微生物的培养与观察微生物的培养与观察培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌一般在培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌一般在_C_C 培养培养1 12 2 d d，放线菌一般在，放线菌一般在 25252828 C
9、C 培养培养 5 57 7 d d，霉菌一般在，霉菌一般在_C_C的温度下培养的温度下培养 3 34 4 d d。在菌落计数时，每隔。在菌落计数时，每隔_h_h 统计一次菌落数目。统计一次菌落数目。选取选取_时的记录作为结果，以防止因时的记录作为结果，以防止因_不足而导致遗漏菌不足而导致遗漏菌落的数目。落的数目。一般来说，在一般来说，在_的培养条件下的培养条件下( (相同的相同的_、温度及、温度及_)_)，同种微生物表现出稳定的菌落特征。这些特征包括，同种微生物表现出稳定的菌落特征。这些特征包括_、大小、大小、_、颜色等方面。、颜色等方面。思考：思考： 为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度
10、？为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？三、对分离得到的分解尿素的细菌的鉴定三、对分离得到的分解尿素的细菌的鉴定在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的_将尿素将尿素分解成了分解成了_。氨会使培养基的碱性。氨会使培养基的碱性_，pH_pH_。因此，。因此，我们可以通过检测培养基我们可以通过检测培养基 pHpH 变化来判断该化学反变化来判断该化学反 应是否发生。在以应是否发生。在以WtuWgifWtuWgif4_为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果pH_pH_，指示剂将变，指示剂将
11、变_，说明该细菌能够分解尿素。，说明该细菌能够分解尿素。思考：如果分离得到的分解尿素细菌的鉴定结果是脲酶阳性，则说明什么？思考：如果分离得到的分解尿素细菌的鉴定结果是脲酶阳性，则说明什么？【课堂探究课堂探究】例例 1:1: “筛选筛选”是分离和培养生物新类型常用的手段，下列有关技术中不是分离和培养生物新类型常用的手段，下列有关技术中不能筛选成功的是能筛选成功的是( ( ) )A A在全营养的培养基中，筛选大肠杆菌在全营养的培养基中，筛选大肠杆菌B B在尿素固体培养基中，筛选能够分解尿素的微生物在尿素固体培养基中，筛选能够分解尿素的微生物C C用纤维素为唯一碳源的培养基，筛选能够分解纤维素的微生
12、物用纤维素为唯一碳源的培养基，筛选能够分解纤维素的微生物D D在培养基中加入不同浓度的氯化钠，筛选抗盐突变体植物在培养基中加入不同浓度的氯化钠，筛选抗盐突变体植物例例 2:2: 尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制培养尿素分解菌的培养基时尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制培养尿素分解菌的培养基时( ( ) )A A葡萄糖在培养基中含量越多越好葡萄糖在培养基中含量越多越好 B B尿素在培养基中含量适中尿素在培养基中含量适中最好最好C C培养基中的尿素属于无机氮源培养基中的尿素属于无机氮源 D D尿素在培养基中越多越好尿素在培养基中越多越好 类型一类型一 菌落数目的统计方法菌落数目的统计方法1 1稀释涂布平板法稀释涂布平板法( (又称又称_ _法法) )(1)(1)原理：当样品的原理：当样品的_ _足够高时，培养基表面生长的一个菌落，足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测
