人体血型与交叉配血实验

《人体血型与交叉配血实验》由会员分享，可在线阅读，更多相关《人体血型与交叉配血实验（35页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。

1、人体血型鉴定与交叉配血人体血型鉴定与交叉配血 实验原理实验原理 血型就是红细胞膜上特异抗原(凝集原)的类型。在血型系统中最重要的是 ABO 血型系统，其次是 Rh 血型系统。在 ABO 血型系统中，根据红细胞上是否含有 A、B 凝集 原而分为 A、B、AB 和 O 型。血清中含有凝集素，且 A 凝集原只能与抗 A 凝集素结合， B 凝集原只能与抗 B 凝集素结合，血型鉴定即是将受试者的红细胞加入标准 A 型血清（抗 B 血清）及标准 B 型血清（抗 A 血清）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞上 凝集原的类型。Rh 阳性和阴性通常以红细胞上是否含有 D 抗原来判断，含 D 抗原则为 R

2、h 阳性，大部分人为 Rh 阳性，极少数人为 Rh 阴性。交叉配血实验是将供血者的红细胞和血清分别和受血者的血清（主侧）和红细胞 （次测）混合，观察有无凝集现象。交叉配血是输血前的必需步骤，应坚持同型输血、交 叉配血的原则。其目的，一是鉴定所测血型是否正确；二是观察是否还有其他不能输血的 因素存在，以确保安全输血。实验目的实验目的 掌握 ABO、Rh 血型鉴定和交叉配血的原理和方法实验对象实验对象 人（学生自愿者）。实验器材和药品实验器材和药品 显微镜、离心机、采血针、双凹玻片片、滴管、1ml 吸管、小试管、试 管架、牙签、消毒注射器及针头；标准 A、B 型血清、抗 D 血清、生理盐水、75%

3、酒精、 碘酒、棉球、消毒棉签。实验步骤和观察项目实验步骤和观察项目一、ABO 血型鉴定：（一）玻片法1.用 75%酒精棉球消毒左手无名指端，用消毒采血针刺破皮肤、用吸管吸一滴血于盛有 1ml 生理盐水的小试管中，混匀之城红细胞悬液；2.取一双凹载玻片，在左上角写 A 字，右上角写 B 字，将一滴标准 A 型（抗 B）血清滴在 右侧凹内，一滴标准 B 型（抗 A）血清滴在左侧凹内，滴管切勿混用；3.用滴管吸取红细胞悬液，分别滴一滴于载玻片两侧的血清上，注意不要使滴管尖端与血 清接触，用牙签两端分别混匀；4.1030 分钟后用肉眼观察有无凝集现象。根据下表鉴定结果凝 集 现 象标准 A 型（抗 B

4、）血清 标准 B 型（抗 A）血清 被检者血型- + A 型+ - B 型+ + AB 型- - O 型玻片法鉴定 ABO 血型（+ 有凝聚，- 未凝聚）（二）试管法1.取试管 2 只，分别标明 A，B 字样，分别加入相应标准血清 2 滴，各管加入受试者的 红细胞悬液 12 滴摇匀；2.将上述二试管用 1000 转/分离心 1min；3.取出小试管，轻弹底部，如沉淀物呈团块状浮起为凝集，呈散在烟雾状上浮进而恢复 原混悬状为无凝集。二 Rh 血型鉴定（盐水介质法）（一）试管法 1.取小试管 3 支，1 支注明抗 D，另 1 支注明阳性对照，最后 1 支注明阴性对照； 2.将室温盐水反应活性的抗

5、D 血清各 1 滴加入上述试管内； 3.抗 D 试管中加入 1 滴 5待检者红细胞(盐水、血清)悬液，阳性对照及阴性对照试管中 分别加入相应的阳性红细胞及阴性红细胞悬液 1 滴； 4.轻轻混匀，于 3000r/min 离心 15s； 5.取出轻轻摆动观察有无凝集。 (二)玻片法 1.取三凹玻片 1 块，在左侧注明抗 D，中间段注明阴性对照，右侧注明阳性对照； 2.将室温盐水反应的抗 D 血清各 1 滴加入上述小格内； 3.抗 D 小凹内加入待检者 5红细胞悬液 1 滴，阳性对照内加入阳性对照红细胞悬液 1 滴， 阴性对照加入阴性对照红细胞悬液 1 滴； 4.用干净玻棒搅拌红细胞悬液和试剂血清充

6、分混合； 5.连续轻轻倾斜转动平板，一般在 2min 内观察有无凝集，或按试剂说明书规定的时间观察 结果。三 交叉配血：1. 以碘酒、酒精消毒皮肤后，用消毒的干燥注射器抽取供血者静脉血 2ml，取 1 滴加入盛 有生理盐水 1ml 的小试管中，制成红细胞悬液；其余血液装入另一小试管中，待其凝固后 离心分离血清；在试管上分别注明“供红”和“供清”。2.同法制成受血者的红细胞悬液及血清，分别注明“受红”和“受清”。3.取一双凹载玻片，在左上角写“供红受清”，右上角写“供清受红”。分别用滴管吸取 “供红”、“受清”各 1 滴于左侧凹内，再分别用滴管吸取“供清”、“受红”各 1 滴于 右侧凹内，用牙签

7、两端分别混匀。4.1030 分钟后观察结果，如两侧均无凝集现象，表示血型配合，可以输血。注意事项注意事项1.操作时各滴管不能混用。2.肉眼看不清凝集现象时，应在显微镜下观察。3.红细胞悬液不能太浓和太淡，否则可能出现假阴性反应。4.必须注意区分红细胞叠连现象与凝集现象，前者经混匀或摇晃，串状的红细胞即可分开， 而后者决不会因此而有所变化。5.静脉采血必须严格按临床化验要求进行操作，如本实验室不具备条件，可免做交叉配血 实验。【思考题】1.如果有标准 A 型红细胞和标准 B 型红细胞，但无标准血清时，能否进行血型鉴定？2.为什么血型相同的人之间输血仍要做交叉配血实验？心音听诊和血压测量心音听诊和

8、血压测量实验原理实验原理 心音是由心脏瓣膜关闭和心肌收缩引起的振动所产生的声音。用听诊器在胸壁前听诊，在每一个心动周期内可以听到两个心音。第一心音：音调较低（音频为2540 次秒）而历时较长（0.12 秒） ，声音较响，是由房室瓣关闭和心室肌收缩振动所产生的。由于房室瓣的关闭与心室收缩开始几乎同时发生，因此第一心音是心室收缩的标志，其响度和性质变化，常可反映心室肌收缩强弱和房室瓣的机能状态。第二心音：音调较高（音频为 50 次秒）而历时较短（0.08 秒） ，声音较清脆，主要是由于半月瓣关闭产生振动造成的。由于半月瓣关闭与心室舒张几乎同时发生，因此第二心音是心室舒张的标志。其响度常可反映动脉压

9、的高低。临床常用的心音听诊区： 二尖瓣听诊区：心尖部，即位于左锁骨中线内侧第五肋间处。三尖瓣听诊区：胸骨右缘第四肋间或胸骨剑突下。主动脉听诊区：胸骨右缘第二肋间。胸骨左缘第三、四肋间为主动脉瓣第二听诊区（又称第五点） ，主动脉瓣关闭不全时产生的杂音在此处最响亮。肺动脉瓣听诊区：胸骨左缘第二肋间。测定人体动脉血压最常用的方法是间接测压法，它是使用血压计的袖带在动脉外加压，根据血管音的变化来测量动脉血压的。通常血液在血管内流动时并没有声音，但如给血管施加压力使血管变窄形成血液涡流时则可发生声音（血管音） 。用袖带在上臂给肱动脉加压，当袖带内压力超过动脉的收缩压时，动脉血流完全被阻断，此时用听诊器在

10、肱动脉处听不到任何声音。如袖带内压力低于动脉内的收缩压而高于舒张压时，当心脏收缩，动脉内有血流通过，舒张时则无，血液断续地通过受压血管狭窄处，形成涡流而发出声音。如袖带内压力等于或小于舒张压时，则血管内的血流连续通过，所发生的音调突变或声音消失。故恰好可以完全阻断血流所必须的最小袖带内压力（即发生第一次声音时） ，相当于收缩压。在心舒张时也有少许血流通过的最大袖带内压力（即音调突变时） ，相当于舒张压。实验目的实验目的学习心音听诊的方法，了解正常心音特点及其产生原理，识别第一心音与第二心音。了解并掌握人体动脉血压的测定原理和方法，观察运动对动脉血压的影响。实验对象实验对象 人实验器材和药品实验

11、器材和药品 听诊器、血压计 实验步骤和观察项目实验步骤和观察项目一、心音听诊：受试者安静端坐，露出胸部。主试者戴好听诊器，听诊器的耳端应与外耳道开口方向一致（向前） 。以右手的食指、拇指和中指轻持听诊器胸端紧贴于受试针胸部皮肤上，依次（二尖瓣听诊区主动脉瓣听诊区肺动脉瓣听诊区三尖瓣听诊区）仔细听取心音，注意区分两心音。如难以区分两心音，可同时用手指触诊心尖搏动或颈动脉脉搏。与此同时出现的心音即为第一心音。然后再从心音音调高低、历时长短鉴别两心音，直至准确识别为止。比较不同部位上两心音的声音强弱。二、血压测量：受试者静坐分钟，脱去右臂衣袖。松开打气球上的螺丝，将袖带内的空气完全放出，再将螺丝扭紧

12、。将袖带裹于受试者右上臂，其下缘应在肘关节上约厘米，松紧应适宜。受试者手掌向上平放于台上，袖带应与心脏同一水平。在肘窝找到受试者的肱动脉搏动处，左手持听诊器的胸端放在上面（注意：不可用力下压，但也不能接触过松而听不到声音） 。右手持打气球，向袖带打气加压，同时注意倾听声音变化，在声音消失后再加压 30毫米汞柱。然后扭开打气球之螺丝，缓慢放气（切勿过快） ，此时可听到血管音的一系列变化，声音从无到有，由低而高，而后突然变低，最后完全消失。再次扭紧打气球螺丝，继续打气加压，反复听次。重复上一操作，同时注意血压计之水银柱和声音变化。在缓慢放气减压时，第一次听到血管音时的水银柱高度即代表收缩压，在血管

13、音突然由强变弱时的水银柱高度即代表舒张压。记下测定数值后，将袖带内的空气放尽，使压力降至零，再重测一次。打开袖带与检压计的皮管接头（注意不可将袖带取下） ，令受试者在室外跑跳分钟后，立即将接头接好，测定血压，观察运动后的血压变化。注意事项注意事项实验室内必须保持安静，以利听诊。听诊器耳端应与外耳道方向一致，橡皮管不得交叉、扭结。橡皮管切勿与它物摩擦，以免发生摩擦音，影响听诊。如呼吸音影响听诊，可令受试针暂停呼吸片刻。袖带裹绕要松紧适宜，并与心脏同一水平，切上臂不能被衣袖所压迫。重复测压时，须将袖带内空气放尽，使压力降至零位，然后再加压测量。如发现血压超出正常范围时，应让受试者休息 10 分钟后

14、复测。在受试者休息期间，可将袖带取下。血压计使用完毕，应将袖带内气体放尽，收好。【思考题】描述所听到的心音及不同听诊区两心音各自的不同。根据你的操作，你认为哪些因素可影响血压的测定？体表心电图体表心电图实实验验原原理理 心电图（electrocardiogram） 心脏在每个心动周期中，窦房结、心房、心室相 继兴奋，伴随着生物电的变化，并通过心脏周围的导电组织和体液传到体表。这种电 变化经心电描记器从体表引出多种形式的电位变化的图形，称心电图 （ECG） 。心电 图可反映整个 心脏兴奋的 产生、传导及恢复过程 中的生物电变化 。心电图应用最广 泛的是普通心电图及 24 小时动态心电图。 正常的

15、心电图包括 P 波、QRS 波和 T 波， P 波表示心房去极化， QRS 波表示心室去极化， T 波表示心室复极化。实验目的实验目的 了解心电图产生原理、测量方法、各波和间期的形态及其意义 实验对象实验对象 人 实验器材和药品实验器材和药品 心电图仪，导电液，酒精棉球 实验步骤和观察项目实验步骤和观察项目1.接好地线后打开电源，以防交流电干扰并保障病人安全。2.受试者摘下眼镜、手表等金属物品和手机等电子产品后平卧。3.两侧腕关节屈侧上方、内踝上方 3-5cm 处先用酒精棉球脱脂，涂上导电液后放上电极。4.接好肢体和胸导联线 肢导 右手腕-红色 左手腕-黄色 左脚腕-绿色 右脚腕- -黑色 胸导 V1：探查电极放在胸骨右缘第 4 肋间。 V2：探查电极放在胸骨左缘第 4 肋间。 V3：探查电极放在 V2 与 V4 连线的中点。 V4：探查电极放在锁骨中线与第 5 肋间的交点上。 V5：探查电极放在左腋前线与第 5 肋间的交点上。 V6：探查电极放在左腋中线与第 5 肋间的交点上。5.调节心电图仪的基线位置、增益幅度、记录速度。6.再检查基线平稳、无肌电和市电干扰后依次记录肢体导联、aVR、aVL、aVF 和胸前导联 V1、V2、V3、V4、V5 、V6 12 个导联的心电图。6.记录完毕后，关上电源开关，在记录纸上注明姓名，测定时间等。