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1、1鲍曼不动杆菌院内感染株的耐药及同源 性分析作者：应建飞 陈云波 俞燕红 【关键词】 感染鲍曼不动杆菌(AB)由于其对营养无特殊要求，抵抗力强，在干燥物体表面可存活时间长,在住院病人中定植率为 75%,所以极易播散并引起院内感染。同时，由于长期抗生素选择压力使多重耐药株明显增加,特别是对碳青霉烯类的耐药,给临床抗菌治疗带来困难。作者对分离的 223 株鲍曼不动杆菌进行了抗菌药物敏感性试验，并对 27 株耐碳青霉烯类抗生素的菌株进行基因分型，结合临床资料分析感染源头及途径，现报告如下。1 临床资料1.1 菌株来源223 株 AB 均分离自 2006 年 1 至 12 月本院住院病人，菌株使用 A
2、TB 细菌鉴定仪（法国 BioMerieux 公司）鉴定。标准菌株为大肠埃希菌 ATCC25922 和铜绿假单胞菌 ATCC27853。1.2 仪器和试剂水解酪蛋白(Mueller-Hinton,MH)琼脂购自法国梅里埃公司，哌拉西林(PIC)、哌2拉西林/他唑巴坦（TZP）、头孢哌酮/舒巴坦（CPS）、头孢他啶（CAZ）、头孢吡肟（FEP）、氨曲南（ATM）、亚胺培南（IPM）、美洛培南（MER）、庆大霉素（GEN）、阿米卡星（AKN）、环丙沙星（CIP）、复方新诺明（TSU）头孢噻肟（CTX）等药敏纸片均为 OXOD 公司生产， MERCK 公司的蛋白酶 K，Seakem Gold 琼脂糖
3、，DNA 限制性内切酶 Sma-I 为宝生物工程（大连）有限公司产品。1.3 药敏试验2.2 PFGE 结果PFGE 电泳图(图 1)，聚类分析结果(图 2)。聚类分析提示 27 株菌株有 7 个克隆，其中 3、4、6、9、10、11、12、13、14、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27 等19 株为同一克隆（A1 型）。1 号和 2 号株为同一克隆（A2 型），16 号和 17 号株为同一克隆（A3 型）， 5、7、8、15 各自为不同克隆。2.3 临床资料分析27 株耐碳青霉烯类抗生素的菌株来自呼吸科 3 株、神经外科 7 株、重症监护室 17 株。标本来源：来自血
4、液 2 株、静脉导管头 1 株，其余均为痰标本。重症监护室的 17 株菌株为 A1、A2、A3 克隆，神经外科 7 株为 A1 克隆。病人因病情危重均不可避免的长时间住院，同时又使用人工气道或各种侵入性操作、免疫抑制剂、广谱抗生素等。 3 讨论鲍曼不动杆菌系条件致病菌，普遍存在于环境中，是临床标本和院感监测中最常分离到的革兰阴性非发酵菌。近年来，鲍曼不动杆菌感染率不断上升，已成为重症监护室、神经外科和呼吸科抗感染治疗最棘手的问题。本试验中,223 株鲍曼不动3杆菌对亚胺培南和美洛培南的敏感性最高(87.89%),但已出现耐碳青酶烯类抗生素的菌株，由于舒巴坦对鲍曼不动杆菌有独特的抑酶活性,使 C
5、PS 具有 78.48%的敏感性明显比 TZP 高。第三、四代头孢菌素及 ATM 的耐药率为 58.74%70.40%,青酶素类、氨基糖甙类、TSU、CIP 的耐药性均很高。 2002 年 1 至 12 月全国细菌耐药性监测网所属 57 家三级甲等医院调查发现，AB 菌临床分离率为 4.2%，并发现 AB 菌对 17 种临床常用药物的耐药率 4.3%86.9%。解放军总医院对呼吸机相关肺炎的病原学和耐药性监测发现，AB 菌分离率达 11.5%,对 15 种临床常见药物的耐药性更高达 10.5%100%。本 PFGE 聚类分析提示，27 株菌株有 7 个克隆，其中3、4、6、9、10、11、12
6、、13、14、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27 等 19 株为同一克隆（A1 型），1 号和 2 号株为同一克隆（A2 型），16 号和 17 号株为同一克隆（A3 型）， 5、7、8、15 各自为不同克隆。对比临床资料发现重症监护室的 17 株菌株为 A1、A2、A3 克隆，神经外科 7 株为 A1 克隆，这种在同一时间、空间分布的集中趋势，认为是大规模的暴发流行，需联合院感管理部门进一步监控。PFGE 高重复性的分辨能力，其分型结果是控制院内感染的重要基础，可以帮助临床发现潜在的危险因素，进而及时切断流行菌株的来源及传播途径。当发现相似耐药谱的鲍曼不动杆菌的流行，
7、就必需采取严格的措施，防止交叉感染。因鲍曼不动杆菌耐受肥皂，所以应注意无菌观念，防止造成医源性感染。严格消毒呼吸机管道，定期取样送检，同时应加强抗菌药物的合理使用和细菌耐药性的检测及监测，是防止和延缓鲍曼不动杆菌耐药率增长的必需措施。【参考文献】1 张樱. 不动杆菌感染及耐药机制的研究进展. 国外医学流行病学传染病学4分册，2005,32(2):109122 National Committeefor clinical laboratory standard. Perfermance standards for antimicrobial susceptibility testing. Ele
8、venth informational Supplement. M100-S15 Vol 25. Pennsylvania:NCCLS, No.1,January 2006.3 Neil Woodford.Alan P.johnson. 分子细菌学方法与临床应用.西安：世界图书出版公司，1998.4347.4 马越，李景云，张新妹，等.2002 年临床常见细菌耐药性监测.中华检验医学杂志，2004，27（1）：3845.5 蔡少华，张进川，俞森洋，等.呼吸机相关肺炎的病原学和耐药性监测.中华医院感染学杂志，2004，14（4）：365368.采用 K-B 法测定 13 种抗菌药物的敏感性，并根据 CLSI/NCCLS 2006 年版要求进行抗生素敏感性判断。1.4 脉冲场凝胶电泳 参考分子细菌学方法与临床应用3，切 13mm 胶块，浸入 150l 酶切体系中（其中含 Sma-I30IU），37酶切过夜。使用电泳仪（Bio-rad）,电压 6V/cm，电泳时间 16h，脉冲参数 0.2218s，120，电泳温度 14。电泳结束后，将凝胶取出，用 0.5g/ml 的 Goldview 染色 30min,去离子水脱色 30min，用凝胶成像仪读胶分析。2 结果2.1 抗菌药物敏感性试验5见表 1。表 1 223 株鲍曼不动杆菌对 13 种抗菌药物的药敏结果（略）
