P16蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

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1、1P16 蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及 意义摘 要 目的:探讨 P16 蛋白在食管鳞状细胞癌发生、发展和转移的相关性。方法:采用 SP 免疫组织化学方法,检测食管鳞癌 90 例,淋巴结转移癌 49 例中 P16蛋白的表达。结果:P16 在高分化鳞癌组阳性表达率(52.6%)显著高于低分化鳞癌组(25.0%), (P0.05);有淋巴结转移组原发癌(21.9%)和无淋巴结转移组原发癌(60.4%)比较,具有显著性差异(P0.05)。结论:P16 基因蛋白对食管癌的转移可能有抑制作用,检测 P16 蛋白对食管癌淋巴结转移预测及预后评估具有一定意义。关键词 食管鳞状细胞癌;免疫组织化学;P16 蛋

2、白食管癌是我国最常见恶性肿瘤之一,对食管癌转移分子调控机制的研究,已成为食管癌研究领域的关键问题。为了探讨 P16 蛋白在食管鳞状细胞癌发生、发展过程中的变化及其与临床病理特征的关系,本实验采用灵敏的 SP 免疫组织化学方法,初步探讨了 P16 在食管癌的发生、发展、转移及判断预后的意义。1 材料和方法1.1 材料收集 2004 年2005 年长治医学院附属和平医院食管鳞状细胞癌新鲜组织标本 90 例,所有患者术前均未经放疗或化疗。经病理证实高分化鳞癌 38 例,中分化 40 例,低分化 12 例;其中侵及粘膜下肌层和浅肌层者 35 例,侵及深肌层及外膜者 55 例。伴淋巴结转移者 32 例,

3、其中转移淋巴结 49 枚,无淋巴结转移者 58 例。2男性患者 61 例,女性 29 例,年龄 40 岁76 岁,平均年龄 60.2 岁。1.2 方法采用 SP 法,P16 单克隆抗体、SP 试剂盒、DAB 显色剂由福建迈新生物技术有限公司提供。DAB 显色,苏木素复染。用 PBS 代替一抗作阴性对照,以已知阳性切片作阳性对照。1.3 免疫组化染色结果判定P16 阳性物质位于细胞核内,呈棕黄色颗粒,每张切片连续观察 10 个高倍视野,阳性细胞数超过 10%定为染色阳性病例(),否则,定为阴性病例()。1.4 统计学处理采用 2 检验,对各组资料进行统计学分析。 2 结果90 例食管鳞状细胞癌组

4、织中 P16 蛋白阳性表达 42 例,总阳性率为46.7%。P16 蛋白表达与食管鳞状细胞癌临床病理特征的关系见表 1。结果表明P16 蛋白在食管低分化鳞癌中表达较低,在中高分化鳞癌中高表达,两者与前者比较有显著性差异(P0.05),而 P16 蛋白表达与癌组织的浸润深度无关。有转移组原发癌 P16 表达的阳性率为 21.9%,无转移的原发癌阳性表达为 60.4%,两者有显著性差异,在 90 例食管癌中,有 42 例阳性表达,但在 49 枚转移淋巴结中,P16 蛋白仅有 9 枚阳性表达,两者统计学上有显著性差异(P0.05)。表 1 P16 蛋白表达与食管鳞状细胞癌临床病理特征的关系(略)3

5、讨论3P16 蛋白属于细胞周期依赖性激酶抑制剂(cyclin dependent kinase inhibitors,CDKI)中重要成分,它是细胞周期监控、驱动机制中最主要的调控蛋白,对细胞周期具有显著的抑制作用,检测 P16 蛋白有助于人们对食管癌生物学行为及预后的认识。P16 基因定位于人类染色体 9p21,全长 8.5kb,含 3 个外显子和 1 个内含子。P16 是 G1S 期限速步骤中重要的调节组件。有文献报道,在宫颈癌及其癌前病变中存在 P16 基因的丢失,提示 P16 失活参与宫颈癌的发生,并可能发生在宫颈癌的早期阶段。目前已发现,在人类许多种肿瘤细胞系和原发肿瘤中均有 P16

6、 基因及其产物的改变,。本研究表明 P16 蛋白表达在食管鳞状细胞癌中阳性率为 46.7%。P16 蛋白在高分化鳞癌中的阳性率为 52.6%,显著高于低分化组的 25.0%,提示 P16 蛋白表达缺失与食管癌分化不良有关,检测 P16 可作为判断肿瘤分化程度的一个参考指标。本资料还显示,有淋巴结转移组的 P16 蛋白阳性率(21.9 %),明显低于无淋巴结转移组(60.4 %),两组比较具有显著性差异(P0.05),提示 P16 的低表达对食管癌的演进及最终使癌细胞获得转移的潜能具有重要作用。P16 在食管原发癌中阳性率为 46.7%,而在淋巴结的转移癌中其阳性表达率为 18.3%,转移癌中阳

7、性病例在其相应的原发癌中 P16 同样为阳性,二者比较有显著性差异(P0.05),结果表明,P16 在原发癌和转移癌中失活机制可能不尽相同,转移癌为食管癌的晚期事件,故失活率较高。P16 的高表达有可能抑制食管癌淋巴结转移,提示检测P16 对于食管癌转移预测及预后评估有一定作用。4参考文献1夏加增,尹浩然,朱正纲.P27 蛋白分子生物学及其与消化系肿瘤的关系J.国外医学消化系疾病分册,2000,20(2):107110.2Serrano M,Hannon G J,Beach D,et al.A new regulatory motif in cycle control causing specific inhibition of cyclinD/CDK4J.Nature,1993,366(16):704712.3王 梅,王 冰,王晓丽,等.宫颈上皮癌变过程中细胞周期调节蛋白P16、CyclinD 和 Rb 相互惠作用的研究J.实用肿瘤杂志,2002,17(1):1416.4战雪梅,王国新,孙崇伟,等.食管癌组织中 P16、P21、P53、CyclinD1 表达及其意义J.实用癌症杂志,2001,16(1):3638.5吕有勇,高崇峰,崔建涛,等.胃癌中 MTS1/P16 基因及异常表达的研究.中华肿瘤杂志,1996,18(3):189191.

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