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1、扬州大学硕士学位论文黄芪多糖对肉仔鸡免疫性能和生产性能影响的研究姓名：王俊丽申请学位级别：硕士专业：动物营养与饲料科学指导教师：佟建明;章世元20100501于俊丽黄芪多糖对肉仔鸡免疫性能和生产性能影响的研究黄芪多糖对肉仔鸡免疫性能和生产性能的影响研究硕士研究生：王俊丽导师：佟建明( 研究员) 章世元( 副教授)( 扬州大学动物科学与技术学院，扬州2 2 5 0 0 9 )摘要本研究通过4 个实验就黄芪多糖对肉仔鸡免疫功能和生产性能的影响进行研究。从淋巴细胞增殖、细胞因子产生、细胞信号分子等几个方面，通过体外试验和体内试验相结合进行免疫学探讨，并通过体内试验就黄芪多糖的实际应用价值加以验证。试
2、验一黄芪多糖对肉仔鸡淋巴细胞增殖的影响本试验通过体外细胞培养技术研究黄芪多糖对肉仔鸡淋巴细胞增殖的影响。将9 种浓度的黄芪多糖分别加入到肉仔鸡外周血、脾脏、胸腺、法氏囊淋巴细胞培养液中，使其浓度分别为0 、1 2 5 、2 5 、5 0 、1 0 0 、2 0 0 、4 0 0 、8 0 0 、1 0 0 0 、2 0 0 0 p , g m L ，采用M T T 法检测淋巴细胞增殖能力。结果表明，黄芪多糖与C o n A 、L P S 具有协同作用，促进2 1 、4 2 肉仔鸡淋巴细胞的增殖，但不同日龄其最佳增殖剂量略有不同，其中，黄芪多糖对T 淋巴细胞的促增殖作用以1 0 0 - - 4
3、0 0 I J , g m L 效果较好，1 2 5 2 0 0 p g m L 浓度范围时B 淋巴细胞增殖作用明显，综合分析，以1 0 0 以O O p g m L的浓度范围对淋巴细胞的促增殖作用最好。试验二黄芪多糖对肉仔鸡淋巴细胞分泌I F N ? 、I L 2 以及I L 6 的影响本试验研究了黄芪多糖在体外对肉仔鸡淋巴细胞分泌细胞因子I F N 吖、I L 2 以及I L 6 的影响。结果表明：一定浓度的黄芪多糖能够刺激2 1 、4 2 日龄肉仔鸡外周血、脾脏、胸腺淋巴细胞分泌I F N I 丫、I L 2 、I L 6 ，不同R 龄、不同来源鸡淋巴细胞对黄芪多糖浓度的适宜范围有相异之
4、处，但有共同相交点，综合分析，黄芪多糖在1 0 0 4 0 0 p # m L 时，显著促进肉仔鸡外周血、脾脏、胸腺淋巴细胞对I F N 吖、I L 2 、I L 6 的分泌，与试验一中T 淋巴细胞增殖浓度相近，提示，黄芪多糖可以通扬州人学硕+ 学位论文过调节细胞因子的分泌，促进淋巴细胞增殖，进而调节免疫系统功能。试验三黄芪多糖对肉仔鸡淋巴细胞化学发光以及N O 分泌的影响本试验研究了黄芪多糖在体外对肉仔鸡淋巴细胞化学发光以及N O 分泌的影响。结果表明，黄芪多糖能够增强肉仔鸡外周血、脾脏、胸腺及法氏囊淋巴细胞的化学发光，除法氏囊淋巴细胞外，另三种来源淋巴细胞的化学发光与黄芪多糖呈现明显的剂量
5、依赖性双向调节，在1 2 5 1 0 0 p g m L 浓度范围效果较好，超过这一浓度范围化学发光值降低，高剂量时出现抑制现象。黄芪多糖可以调节不同同龄肉仔鸡外周血、脾脏、胸腺及法氏囊淋巴细胞对信号分子N O 的分泌，除2 1 日龄鸡法氏囊淋巴细胞外，黄芪多糖可以促进各来源淋巴细胞N O S 的表达，提高 i N O S 活性，并促进N O 的产生，以1 0 0 2 0 0 舭浓度范围效果较好。试验四黄芪多糖对肉仔鸡生产性能和部分免疫指标的影响本试验将不同剂量的黄芪多糖( 1 0 0 、2 0 0 、4 0 0 、8 0 0 、1 0 0 0 、2 0 0 0 m g k g ) 添加于肉仔
6、鸡日粮，研究其对2 1 、4 2 日龄肉仔鸡生产性能和部分免疫指标的影响。研究发现：各剂量组黄芪多糖对不同日龄肉仔鸡平均采食量以及2 1 日龄平均日增重、料重比均无显著影响( 尸 0 0 5 ) ，从4 2 日龄或全期( 0 - - 4 2 ) 来看，各剂量组平均R 增重均比对照组提高，降低单位增重饲料消耗，1 0 0 0m g k g 组达到显著水平( 尸 0 0 5 ) ，但1 0 0 “g m L 组显著促进胸腺T 淋巴细胞的增殖( P 0 0 5 ) 。由表1 2 可以看出，除4 0 01 t g m L 剂量组对4 2 日龄肉仔鸡外周血T 淋巴细胞转化具有显著促进作用外p 0 0 5
7、 ) ；各黄芪多糖剂量组对肉仔鸡胸腺T 淋巴细胞的促增殖作用除1 0 0p g m L 组较对照组显著增加外( 尸 0 0 5 ) ，mm卯时舫m川肿勉删伽眦撇舢伽伽舢黜0Onm0OO00协筋如m姗伽湖姗撇王俊丽黄芪多糖对肉仔鸡免疫性能和生产性能影响的研究1 51 0 0 “g m L 组O D 值较1 2 5 、2 5 、4 0 0 、8 0 0 、1 0 0 0 、2 0 0 0l a g m L 组也显著增 J t T ( P O 0 5 ) ；与对照组相比，法氏囊B 淋巴细胞的促增殖作用以5 0 、1 0 0 p 幽：n L 组效果较好，其O D 值分别增加了3 9 9 7 ( P O
8、 0 5 ) ，其它各剂量组与对照组差异不显著( 胗0 0 5 ) 。表2 3 黄芪多糖对2 1 日龄肉仔鸡淋巴细胞分泌I L 2 的影响( n = 3 )T a b l e 2 3E f f e c to f A P So n21d a y so l db r o i l e r sl y m p h o c y t e ss e c r e t i o no fl L 2由表2 - 4 可以看出，1 0 0 、2 0 0 、8 0 0 1 x g m L A P S 促进4 2R 龄肉仔鸡外周血淋巴细胞I L 2 的分泌，较对照组分别增加1 8 9 9 ( P O 0 5 ) 。表2 -
9、6 黄芪多糖对4 2 日龄肉仔鸡淋巴细胞分泌I L - 6 的影响( n = 3 )T a b l e 2 - 6E f f e c to f d i f f e r e n tA P So n4 2d a y so l db r o i l e r sl y m p h o e y t e ss e c r e t i o no fI L - 6 ( n = 3 )由表2 - 6 可以看出，与对照组相比，1 0 0 、2 0 0 、8 0 0 p g m L 组A P S 显著促进4 2 日龄肉仔鸡血淋巴细胞I L 6 的分泌量，其它各剂量组均较对照组显著降低( P O 0 5 ) ，1 0
10、 0 、4 0 0 “g m L 组较5 0 、8 0 0 、1 0 0 0 、2 0 0 0 1 上g m L 组也显著增加( 尸 0 0 5 ) 。2 1 2 脾脏L y C L 激发值变化3 0扬州人学硕+ 学位论文O1 幺52 55 D1 0 02 0 04 0 08 0 01 0 0 02 0 0 0浓度( | l g m L )图2 脾脏淋巴细胞化学发光激发值变化由图2 可以看出，与对照组相比，1 2 5 、2 5 9 9 m L A P S 剂量组脾脏淋巴细胞C L 激发值显著增加( 尸 0 0 5 ) 、3 7 6 3 ( 尸 O 0 5 ) ，1 0 0 、2 0 0 r t
11、 g m L 血淋巴细胞N O 含量，N O S 、i N O S 活力较其它各组增加或显著增加。表3 - l2 1 日龄肉仔鸡血淋巴细胞N O 、N O S 、i N O S 变化( n = 3 )T a b l e3 - lT h ec h a n g e so f b l o o dl y m p h o c y t eN O 、N O S 、i N O So n2 1 d a y so l db r o i l e r s添加量( I u g m L ) N O ( p m o l L )N O S ( U m L )i N O S ( U m L ) C o n c e n t r
12、a t i o n1 2 52 6 1 0 2 - + 9 3 0 。3 1 0 a ：O 3 4 吣1 1 5 士0 0 8 甜2 518 6 4 2 士l5 6 8 。2 5 6 ：L - 0 15 。d1 6 4 士O 0 8 8 b c5 02 4 7 8 8 士1 8 7 3 e a3 2 4 士0 1 7 k1 6 7 士- 0 3 2 a b c1 0 03 8 9 4 2 士1 6 6 8 83 5 7 士o 2 0 a b1 9 1 士o 0 7 曲2 0 03 5 0 O O a ：12 4 4 04 0 6 士O 17 42 12 - - + 0 2 4 44 0 02
13、3 2 1 0 - a ：6 2 0 c d3 1 3 i - 0 1 4 b c1 3 8 士o 2 8 b c d8 0 02 2 0 6 3 士1 4 7 0 c d c3 1 7 士O 2 4 b c1 2 1 士O 0 9 c d10 0 02 3 7 8 3 ：L - 9 6 5 c d2 3 2 1 - 0 14 dO 9 7 ：L - 0 17 d2 0 0 02 2 1 5 2 士1 2 3 3 。3 2 0 士O 3 9 b cI 0 9 士0 1 4 c d注：同一列丰只邻小写字母表示差异妊著( P O 0 5 ) 。一手俊丽黄芪多糖对肉仔鸡免疫性能和生产性能影响的研究3
14、 3 一一：表3 - 24 2 日龄肉仔鸡血淋巴细胞N O 、N O S 、i N O S 变化( n - - 3 )T a b l e3 2T h ec h a n g e so fb l o o dl y m p h o c y t eN O 、N O S 、i N O So n4 2d a y so l db r o i l e r S。0 二= 。_ ：一添加量( “g mL )。一N O ( U m o l L )N O S ( U mL )i N O S ( U mL ) 1 , 5 0 1 1 c e n t r a t l o nX ：= = _ ：z = ：= 贫1 = _
15、一一017 8 91 士7 9 7 M2 0 0 士0 1 1a 。百丽面面厂12 517 5 5 8 + 5 3 3 甜2 414 - 0 13 b0 5 9 4 - 0 0 82 51 9 1 3 0 - 4 - 1 5 6 2 谢2 5 3 4 - 0 0 7 曲0 5 6 4 - 0 0 35 02 1 9 6 7 + 1 7 2 02 7 6 - 2 0 1 4 80 4 4 4 - 0 0 81 0 02 3 1 7 8 - - 1 ：1 3 2 6 32 7 7 4 - 0 1 0 80 6 5 4 - 0 1 32 0 02 0 2 2 6 4 - 1 0 1 俨2 0 6 4 - 0 1 3 翻0 4 4 4 - 0 0 84 0 018 8 2 5 4 - 11 4 7 b c d2 0 6 4 - 0 1 1c d0 5 9 4 - 0 0 48 0 017 7 9 5 4 - 1 4 8 7 c d2 3 8 4 - 0 1r0 4 3
