丹红注射液对大鼠心肌缺血损伤的保护作用

《丹红注射液对大鼠心肌缺血损伤的保护作用》由会员分享，可在线阅读，更多相关《丹红注射液对大鼠心肌缺血损伤的保护作用（4页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。

1、1丹红注射液对大鼠心肌缺血损伤的保护 作用【摘要】 目的 探讨丹红注射液对大鼠心肌缺血损伤的保护作用。方法 采用结扎冠状动脉制备大鼠心肌缺血损伤模型,将动物随机分为假手术组、模型组、丹参注射液阳性对照组(10 g/kg)、丹红注射液各剂量组(10、20、30 g/kg)。除假手术组和模型组给予同体积生理盐水外，各组动物在术后 12，23 h 分别尾静脉注射给药 1 次。术后 24 h，测定心肌梗死范围，检测血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD) 、丙二醛(MDA)水平及心肌组织 MDA、SOD 含量，并记录心电图 ST 段。结果 丹

2、红注射液(20，30 g/kg)剂量组能明显减少心肌缺血损伤大鼠心肌梗死面积，分别为(23.265.95)%、(20.549.78)%，而模型组为(36.798.01)%;模型组心电图出现 S T 段明显抬高(0.480.05) mV，而丹红注射液各剂量组能明显降低 S T 段抬高(0.290.04)，(0.220.04)，(0.170.03) mV (均 P0.01)。另外，丹红注射液能降低血清CK、LDH、AST 活性、血清及心肌组织 MDA 含量，增加血清及心肌组织 SOD 活性。结论 丹红注射液对大鼠心肌缺血损伤具有保护作用，其机制可能与抗氧化作用有关。 【关键词】 丹红注射液;心肌缺

3、血;抗氧化已有研究证明，丹红注射液对大鼠移植肾缺血再灌注损伤有保护作用1，2，然而对丹红注射液心肌损伤保护作用尚无详细研究。本实验从抗氧化角度出发，探讨丹红注射液抗大鼠心肌缺血氧化损伤的作用机制。1 料与方法21.1 实验材料1.1.1 动物 Wistar 大鼠，清洁级，雄性，体重 250280 g，由吉林大学白求恩医学院实验动物中心提供，合格证号 SCXK 2002 0001。1.1.2 药品与试剂 丹红注射液(国药准字 Z20026866，济南步长制药有限公司)，每支 10 ml，含生药 10 g(丹参 75%，红花 25%)，批号：070970，为红棕色的澄明液体。丹参注射液(上海中西制

4、药有限公司)含生药 1.5 g/ml，批号：0706030。乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒购自南京建成生物工程研究所，批号分别为：070508，070206，070303，20070902，20070514。红四氮唑(Tetrazolium chloride，TTC)购自中国医药集团上海化学试剂公司，批号 20070903。其他化学试剂均为国产分析纯。1.1.3 主要仪器 UV 2000 型紫外可见分光光度计(上海尤尼克公司)。HX 200 型动物呼吸机(成都泰盟科技有限公司)，ECG 651 型心电图机

5、(上海光电医用电子仪器有限公司)，TGL 16G 型高速冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂)，DKZ 2BO 型恒温水浴振荡器(上海一恒科技有限公司)，DHG 9053A 型鼓风干燥箱(上海一恒科技有限公司)。1.2 方法1.2.1 大鼠心肌缺血模型的制备 结扎冠状动脉前降支，当出现 T ST 幅度增高(0.2 mV)，即缺血模型成功。假手术组只穿线不结扎冠脉。1.2.2 分组与给药 术后第 12 小时,选取手术成功动物 60 只，将大鼠随机分为3假手术组;模型组;丹参注射液阳性对照组(含生药 10 g/kg);丹红注射液低、中、高剂量组(含生药 10，20，30 g/kg)，每组 10 只。各组

6、动物在术后 12、23 h 分别尾静脉注射给药 1 次，假手术组和模型组给予同体积生理盐水。1.2.3 心电图 ST 段记录3 分别于冠脉结扎后 13、24 h 记录心电图。观察导联 T 波、ST 段的变化。1.2.4 心肌梗死面积测定4 待结扎冠脉 24 h 后，取心脏，-20冰冻 10 min，在结扎线下平行于冠状沟将左心室横切 5 片，在 1%TTC 溶液 37 染色 6 min，染色后吸干水分，测量梗死区面积占心室面积的百分比。1.2.5 血清及心肌组织的生化指标测定 待结扎冠脉 24 h 后，腹主动脉取血，分离血清，按试剂盒要求操作测 CK,LDH,AST,MDA,SOD;取心肌组织

7、，用 0.025 mol/L 蔗糖溶液(含 1 mmol/L EDTA)制成匀浆，离心 (12 000 r/min)30 min，取上清液，按试剂盒要求检测 MDA、SOD。1.3 统计学分析 采用 SPSS11.0 软件，数据用 xs 表示，各组间均数比较采用单因素方差分析(one way ANOVA test)，组间比较采用双侧 t 检验。对各组数据进行正态分布和齐性检验5，均符合要求。 2 结 果2.1 对大鼠心肌梗死面积的影响 大鼠冠脉前降支结扎 24 h 后,模型组动物心脏出现明显的梗死区，心肌缺血区面积与心脏面积比为(36.798.01)%，而丹红注射液低、中、高剂量组(10，20

8、，30 g/kg)分别为(26.736.21)%，(23.265.95)%,(20.549.78)%(P0.05，P0.05，P0.05)。与模型组比较，丹红注射液中、高剂量组(20，30 g/kg)降低梗死面积有明显差异。丹参注射液阳性对照组(10 g/kg)4有明显降低死面积的作用(18.123.34)%(P0.05)。2.2 对心肌缺血大鼠心电图 S T 段的影响 与假手术组(0.130.03) mV 比较，模型组在结扎 24 h 后心电图出现 S T 段明显抬高(0.480.05) mV(P0.01)。而丹红注射液低、中、高剂量组(10，20，30 g/kg)及丹参注射液阳性对照组(1

9、0 g/kg)能明显降低 S T 段抬高(0.290.04)、(0.220.04)、(0.170.03)、(0.160.02) mV，与模型组比较具有显著差异(均 P0.01)。2.3 对心肌缺血大鼠血清 LDH、AST、CK、SOD、MDA 的影响 见表 1。与假手术组比较，大鼠心肌缺血模型组可见血清 CK,LDH,AST,MDA 均明显增加(P0.05)，而血清 SOD 活性明显下降(P0.05)。丹红注射液低、中、高剂量组及丹参注射液阳性对照组(10 g/kg)均可提高心肌缺血大鼠血清 SOD 活性、降低MDA 水平，抑制血清 LDH,AST,CK 的增加，与模型组比较有统计学差异(P0

10、.050.001)。2.4 对心肌缺血大鼠心肌组织 SOD、 MDA 的影响 见表 2。与假手术组比较，大鼠心肌缺血模型组可见心肌 MDA 含量明显增加,SOD 活性明显下降。丹红注射液各剂量组及丹参注射液组均可明显提高心肌缺血大鼠心肌 SOD 活性、降低MDA 含量，与模型组比较有显著差异(P0.010.001)。表 1 丹红注射液对心肌缺血大鼠血清 LDH、AST、CK、SOD、 MDA 的影响表 2 丹红注射液对心肌缺血大鼠心肌组织 MDA 的影响3 讨 论长期心肌缺血会导致心肌梗死、心肌细胞死亡6，心肌缺血时，心肌酶CK，LDH，AST 被认为是心肌细胞受损程度的重要标志酶。本实验证明

11、，丹红注5射液各剂量组可明显抑制心肌缺血大鼠血清 LDH，AST，CK 的增加，同时能改善心电图损伤变化，抑制 S T 段的抬高，缩小心肌梗死面积，提示丹红注射液对心肌缺血心肌损伤具有保护作用。氧自由基形成过多是心肌缺血发生的主要机制之一6。MDA 含量变化可间接反映细胞受自由基损伤的程度。SOD 可清除超氧阴离子，保护机体免受氧自由基损伤，其活性高低可间接反映机体清除氧自由基的能力5。本实验证明，丹红注射液各剂量组能明显抑制心肌缺血损伤大鼠血清、心肌组织 MDA 含量的升高,提高 SOD 活性,提示丹红注射液可能通过提高内源性抗氧化酶 SOD 活性，清除自由基引起的脂质过氧化反应,减轻自由基

12、对心肌细胞的损伤，起到保护心肌损伤的作用。目前的实验和临床研究均表明，应用心肌保护剂能明显降低人、动物的心肌梗死范围，减轻心肌损伤程度7。最近有人研究，利用结扎 SD 大鼠冠状动脉左前降支 40 min 后,再灌注 120 min,建立心肌缺血再灌注损伤模型。静脉注射给药丹参红花提取物有效成分。结果表明，与模型组比较,丹参红花提取物有效成分丹参酚酸 B 和羟基红花黄色素 A(丹酚酸 B 含量 10.44 mg/g、羟基红花黄色素 A 含量 22.1 mg/g)小剂量(1.94 生药 g/kg)组、中剂量(3.89 生药 g/kg)组和大剂量(5.83生药 g/kg)组,均可使大鼠血清 CK M

13、B 的含量显著降低(P0.01);丹红中、大剂量组还可抑制心肌缺血/再灌注损伤后大鼠血小板聚集率。 提示丹参红花有效成分配伍中、大剂量组对大鼠心肌缺血/再灌注损伤具有保护作用8。综上所述，丹红注射液对缺血心肌损伤具有保护作用，其机制可能与抗氧化作用有关。6【参考文献】1 夏 康,吴小候,李家兵.丹红注射液对大鼠移植肾缺血再灌注损伤的保护作用J.中药新药与临床药理,2009;17(2):6 10.2 Stanton LW，Garrard LJ，Damm D,et al.Altered patterns of gene expression in response to myocardial in

14、farctionJ.Circ Res，2000;86(9)：939 45.3 Bian GX，Li GG，Yang Y,et al.Madecassoside reduces ischemia reperfusion injury on regional ischemia induced heart infarction in ratJ.Biol Pharmacol Bull，2008;31(3):458 65.4 Hangaishi M，Nakajima H，Taguchi J,et al.Lecithinized Cu，Zn superoxide dismutase limits the

15、infarct size following ischemia reperfusion injury in rat hearts in vivoJ.Biochem Biophy Res Commun，2001;285(5)：1220 8.5 徐淑云,卞如濂,陈 修.药理实验方法学M.第 3 版.北京：人民卫生出版社,2002：210.6 Valko M，Leibfritz D，Moncola J,et al.Free radicals and antioxidants in normal physiological functions and human diseaseJ.Int J Biochem Cell Biol,2007;39(1):44 52.7 Wang QD，Pernow J，Sjoquist PO,et al.Pharmacological possibilities for protection against myocardial reperfusion injuryJ.Cardiovas Res,2002;55(1):25 33.8 张 蕾,刘剑刚,史大卓，等.丹参红花有效部位配伍对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用J.中国实验方剂学杂志，2009;15(6):56 9.