《α干扰素联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎过程中IL12水平的动态变化》由会员分享，可在线阅读，更多相关《α干扰素联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎过程中IL12水平的动态变化（4页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1干扰素联合胸腺肽治疗慢性乙型肝 炎过程中 IL12 水平的动态变化作者：李俐 马颖哲 孙国光 张桂荣【摘要】 目的 动态观察 干扰素联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎（CHB）过程中患者外周血 IL 12 水平,观察 CHB 患者对干扰素联合胸腺肽治疗的反应及免疫状态。方法 100 例患者随机分为 干扰素联合胸腺肽组和 干扰素组，采用ELISA 方法及 PCR 方法检测各组 IL 12 和 HBV DNA 含量，同时观察各组ALT 水平的变化。结果 治疗结束时联合组与干扰素组比较,IL 12 水平明显增加(P0.05),联合组血清 HBV DNA 阴转率及 ALT 复常率指标也均优于干扰素组,且治疗
2、结束后仍维持较长时间。结论 IL 12 参与 CHB 的发病机制,并可作为评估干扰素联合胸腺肽抗病毒治疗的重要免疫指标。胸腺肽联合干扰素治疗 CHB 比单独使用干扰素疗效更好、更持久。 【关键词】 慢性乙型肝炎（CHB）;干扰素；胸腺肽【Abstract】 Objective To observe the level of IL 12 of chronic hepatitis B(CHB) patients during the treatment with interferon combination with thymus peptide to forecast the therapeut
3、ic effect and the immune state. Methods 100 CHB patients were stochastically divided into interferon union thymus peptide and interferon groups . The level of IL 12 was tested by ELISA and the content of HBV DNA was tested by PCR. Results At the end of treatment, the level of IL 12 of interferon uni
4、on thymus peptide group was increased than that of interferon group (P 0.05), the negative rate of HBV DNA and ALT were higher in interferon union thymus peptide group than that of interferon group (P 0.05) and after treatment it still maintained for a long time. Conclusions IL 12 participates in th
5、e pathogenesis of CHB, and may takes an important indicator of assessing the anti virus therapeutic effect of interferon combination with thymus peptide. The effect of thymus peptide combination with interferon for CHB is better and more lasting than the treatment of interferon.2【Key words】 Chronic
6、hepatitis B (CHB); Interferon; Thymus peptide近年研究表明,乙型肝炎病毒(HBV)在机体内持续感染与辅助 T 细胞（TH）1和 TH2 细胞失衡密切相关,白细胞介素 12(IL 12)是由巨噬细胞、B 淋巴细胞等抗原提呈细胞在免疫应答中产生的细胞因子,其主要的生物学功能是诱导 TH1 细胞的分化、增加 CD8+T 细胞的细胞毒活性，能特异性促进 TH1 细胞发育而抑制TH2 细胞功能，同时增强自然杀伤细胞（NK 细胞）的功能，促进细胞免疫功能，是一种重要的抗 HBV 细胞因子。免疫调节剂胸腺肽与抗病毒药物干扰素联合应用，可有效促进 HBV 清除，加快
7、肝脏功能恢复。但关于胸腺肽与干扰素联合应用的临床研究报道较少。本实验通过检测胸腺肽与 2b 干扰素联合应用治疗老年慢性乙型肝炎（CHB）患者血清中 IL 12 及 HBV DNA 含量变化,旨在观察胸腺肽联合 2b 干扰素对老年 CHB 的治疗效果。1 材料与方法1.1 研究对象100 例 CHB 患者均系 2004 年至 2006 年 6 月住院及门诊患者,符合 2000 年西安会议制定的病毒性肝炎防治方案的诊断标准，男 73 例,女 27 例,年龄6172平均（68.24.1）岁,所有患者均排除甲、丙、丁、戊型肝炎等病毒重叠感染以及其他原因(酒精、药物等) 引起的肝脏损害。治疗前均未接受其
8、他抗病毒药物治疗及免疫调节剂治疗。以 20 例健康志愿者作为正常对照。1.2 治疗方法3联合组:55 例, 2b 干扰素 300 万 U 肌肉注射,1 次/d,2 w 后改隔日 1 次；胸腺肽 90 mg 加入 10%葡萄糖注射液静脉滴注 1 次/d,2 w 后改隔日 1 次,干扰素组:45 例,单用 2b 干扰素,用法同联合组。疗程 6 个月。1.3 观察指标各组均于治疗前、治疗后第 3 、6 、12 个月后检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）1.4 检测方法1.4.1 ALT 水平检测 用自动生化仪检测。1.4.2 HBV DNA 定量检测乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝全血 2 ml 用生理盐
9、水 23 倍体积稀释,混匀，加入盛有 2 ml 淋巴细胞分离液的离心管中,2 500 r/min 离心 10 min，吸取中间层单个核细胞，生理盐水洗涤,10 000 r/min 离心 5 min,留取沉积物，用 pH7.2 磷酸盐缓冲液（PBS）10 ml 洗涤 5 次,以去除残留的血浆 HBV DNA,收集末次洗涤液(500 l)及细胞,调整细胞浓度至 2109/L,取 100 l 细胞悬液加等量细胞裂解液反应 20 min,显微镜观察证实细胞完全裂解,用外周血单个核细胞（PBMC）裂解液常规碱裂解法提取 HBV DNA,采用美国 BIOlcycler 荧光定量 PCR 仪及深圳匹基生物工
10、程有限公司出品 HBV DNA 荧光定量检测试剂盒测定,由计算机软件分析计算定量结果，试验的灵敏度为 103 拷贝/ml,病例均以103 拷贝/ml 为阴性结果。为便于统计,以检测结果绝对值进行比较。 1.4.3 血清 IL 12 浓度检测 4用特异性双抗夹心 ELISA 法，试剂盒由深圳晶美生物工程有限公司提供，按说明书操作，同时检测标准品，绘制标准曲线。1.5 统计学处理使用 SPSS11.5 统计软件进行 t 检验和 2 检验。2 结 果2.1 两组治疗前后 HBV DNA 水平比较在治疗 3 个月差异无显著性(P0.05)，治疗 6 个月时，联合组阴转率显著高于干扰素组，治疗 12 个
11、月时，联合组的 HBV DNA 阴转率依然高于干扰素组(P0.05)。见表 1。表 1 治疗后不同时间两组 HBV DNA 阴转率n（略）2.2 ALT 恢复情况联合组在治疗结束时 ALT 恢复正常 46 例(83.36%)，干扰素组为 22 例(48.88%)，两组比较差异有统计学意义(P0.05)。2.3 血清 IL 12 水平在治疗前患者血清 IL 12 浓度差异无显著性(P0.05)，治疗 3 个月时联合组较干扰素组有所增加,治疗结束 6 个月时联合组患者的 IL 12 水平较干扰素组明显增加(P0.05),且治疗结束 12 个月时联合组患者的 IL 12 水平依然高于干扰素组(P0.
12、05)。见表 2。表 2 患者治疗前后外周血 IL 12 含量变化(略)3 讨 论5 2b 干扰素通过和肝细胞膜上神经节甙酯或糖蛋白组成的特异性结合受体结合，诱生多种抗病毒蛋白，从而抑制病毒在细胞内的复制，是 CHB 治疗中最主要的抗病毒药物1。但治疗 CHB 的 HBV DNA 阴转率较低,不能在人体内彻底清除 HBV，因此停药后复发率较高。胸腺肽具有诱导淋巴细胞活化产生 IL 12、 干扰素、 干扰素等细胞因子,促进免疫细胞抗原递呈的作用。IL 12 能促进 TH1型细胞增殖分化和产生 TH1 型细胞因子,抑制 TH2 型细胞的增殖分化, 干扰素又可增强 IL 12 的产生,协同促进 TH
13、1 型细胞增殖。Kimura 等经小鼠实验表明IL 12 能可有效抑制肝细胞中 HBV 基因表达和复制2，胸腺肽与干扰素联合使用，起到协同抗病毒效应3,可以从多方面发挥抑制或阻断 HBV 复制的作用、清除肝细胞内 HBV、提高抗 HBV 疗效。本实验显示,联合组与干扰素组治疗前血清 IL 12 水平均较正常对照组低,治疗后 6 个月联合组 IL 12 水平明显高于干扰素组,且治疗结束 12 个月后仍较干扰素组有统计学差异。干扰素联合胸腺肽治疗 CHB 与单用干扰素组比较,症状及体征消失快，血清 HBV DNA、ALT 恢复正常率也优于干扰素组，治疗结束后仍可维持较长时间。同时本实验还显示,联合
14、组 IL 12 的血清水平随血清 HBV DNA 拷贝数降低而增高,表明 IL 12 在抑制病毒复制、病毒清除和疾病恢复方面具有重要作用。临床动态监测血清 IL 12 水平变化,是预测干扰素联合胸腺肽治疗老年CHB 患者疗效及免疫状态的指标之一;二者联合应用治疗老年 CHB 是一条更有效、持久的治疗途径。【参考文献】1 Leuns N.Treatment of chronic hepatitis B： case selection and duration of therapyJ.J Gastroenterol Hepatitis，2002；17（4）:409 14.2 Kimura K,Kakimi K,Wieland S,et al.Activated intrahepatic antigen presenting 6cells inhibit hepatitis B virus replication in the liver of transgenic miceJ.J Immunol，2002；169(9):5188 95.3 杨素清.干扰素联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎临床疗效观察J.临床肝胆病杂志，2006；2(2):88.
