《p38蛋白激酶在诱导凋亡前后胃癌组织中的表达及意义》由会员分享，可在线阅读，更多相关《p38蛋白激酶在诱导凋亡前后胃癌组织中的表达及意义（4页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1p38 蛋白激酶在诱导凋亡前后胃癌组织 中的表达及意义【摘要】 目的 探索 p38 蛋白激酶在胃癌组织中的表达及其意义，以及其在术前诱导化疗中的作用。方法 对 30 例进展期胃癌患者术前进行新辅助化疗 2 个周期，采用免疫组织化学 SP 法检测 30 例未行术前化疗患者（未化疗组）和 30 例术前行新辅助化疗患者（化疗组）的胃癌组织、癌旁组织标本中 p38 蛋白激酶的表达情况。结果 未化疗组胃癌组织中 p38 蛋白激酶表达高于癌旁组织；期及、期胃癌组织中 p38 蛋白激酶表达高于期胃癌组织。化疗组期胃癌组织中 p38 蛋白激酶表达与期胃癌组织中的表达差异有显著性（P0.01）。结论 p38
2、蛋白激酶表达水平与胃癌的分期相关；术前化疗诱导凋亡后胃癌组织中 p38 蛋白激酶表达下降。p38 蛋白激酶表达水平与胃癌的发生、发展和转移密切相关；p38 蛋白激酶参与了胃癌细胞的诱导凋亡。 【关键词】 p38 蛋白激酶；胃癌；化疗；免疫组织化学Abstract:Objective To investigate the significance of the expression of p38 mitogen- activated protein kinases (MAPK) in gastric cancer and the role of p38 MAPK in preoperative
3、chemotherapy to induce apoptosis. Methods 60 patients with gastric cancer were randomized into the chemotherapy group and the non-chemotherapy group. In the chemotherapy group, preoperative neoadjuvant chemotherapy was performed for 2 weeks on 30 cases with gastric carcinoma during progressive perio
4、d. Immunohistochemical SP method was employed to determine the expression of p38 MAPK in the cancer samples and the adjacent tissues in both groups.Results In the non-chemotherapy group, the p38 expression level in the cancer tissue was higher than that in the adjacent tissues and was significantly
5、higher in gastric cancer of clinical stages , and than that of stage . In the neoadjuvant chemotherapy cases, the p38 expression level in cancer tissues of stage was statistically different from that of stages and .Conclusions The expression level of p38 MAPK is correlated with the 2staging of gastr
6、ic cancer. Neoadjuvant chemotherapy can downregulate the expression of p38 in gastric tissues and adjacent tissues. The expression level of p38 MAPK is closely correlated with the pathogenesis and metastasis of gastric cancer. p38 MAPK participates in the apoptosis of the gastric cancer cells.Key wo
7、rds： p38 MAPK; gastric cancer; chemotherapy; immunohistochemistry丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase, MAPK）是细胞内主要的信号转导系统之一。p38 蛋白激酶属于 MAPK 亚家族中的重要一类1。其介导的信号转导通路不仅在炎症、应激反应中具有重要作用，还参与细胞的存活、分化和凋亡等过程2。近年来发现该通路在调节消化道肿瘤的发病、耐药、转移中起到重要作用。但在诱导胃癌细胞凋亡方面的作用鲜有报道。本研究采用免疫组化 SP 法检测 p38 蛋白激酶在不同时期及化疗前后胃癌组织中的不同
8、表达,探讨其在胃癌的发生、发展、转移及诱导细胞凋亡中的作用。1 资料和方法1.1 一般资料 收集连云港第二人民医院及南京医科大学第一附属医院 2006 年3 月2008 年 3 月胃癌患者 60 例，按术前有无进行新辅助化疗分为化疗组和未化疗组，每组 30 例。化疗组的入组标准：经胃镜检查并病理证实为胃癌且无化疗禁忌。化疗组患者签署知情同意书，术前化疗采用 PFC（多西紫杉醇、顺铂、氟尿嘧啶）方案,2 个化疗周期结束后手术。手术切除胃癌后 30 min 内采集肿瘤组织及周围胃组织（距肿瘤边缘大于 2 cm），并立即于液氮中贮存。化疗组：男性 18 例，女性 12 例；年龄 3265 岁，中位年
9、龄 55 岁；其中期 6 例，期 5 例，期 8 例，期 11 例。未化疗组：男性 19 例，女性 11 例；年龄 3467 岁，中位年龄 56 岁；其中期 5 例，期 7 例，期 8 例，期 10 例。12 方法 鼠抗人 p38 蛋白激酶多克隆抗体使用浓度为 1100，SP 试剂盒、DAB3显色剂均购于武汉博士德生物公司。所有组织块均制备成石蜡包埋标本并制成 4 m 连续切片备用。具体步骤严格按说明书进行，所有标本均在同一条件下，采用SP 法染色，阴性对照为 PBS 代替一抗的空白对照和正常兔血清代一抗的替代对照。13 结果判定 光镜下着色细胞数 5%25% 为(+),26%50%为(+),
10、51%以上为(+),每一例阳性切片染色程度及分布存在不均一性,阴性(-)为切片中癌细胞不显色或显色癌细胞数量占全部癌细胞的 5%以下。14 统计学处理 采用统计学软件包 SPSS 11.5 进行统计学分析,采用 2 检验及相关分析。 2 结 果2.1 p38 蛋白激酶在胃癌及癌旁组织中的表达 p38 蛋白激酶表达主要在胞质中，胞核也有少量的表达，为黄色的小颗粒。胃癌组织中 p38 蛋白激酶表达高于癌旁组织，有统计学意义（P0.05）;化疗组胃癌组织中 p38 蛋白激酶表达低于未化疗组，有统计学意义（P0.01）。见表 1，图 14。表 1 p38 蛋白激酶在胃癌及癌旁组织中的表达与癌旁组织比较
11、：*P0.05;与未化疗组比较：P0.012.2 p38 蛋白激酶表达与胃癌临床病理特征的关系 p38 蛋白激酶表达与患者性别和年龄无关，而与临床分期及有无转移相关。未化疗组中期及期高表达，明显高于期(P0.05)。化疗组期中 p38 蛋白激酶表达与期及期中的表达差异有统计学意义（P0.01）。而在未化疗组及化疗组有淋巴结和远处转移者组织中 p38 蛋白激酶的表达明显高于无转移者(P0.01)。见表 2。表 2 p38蛋白激酶表达与胃癌临床病理特征的关系 与期比较:*P0.05；与无转移比较：P0.01；与期比较: #P0.0143 讨 论肿瘤的发生发展是一个多步骤、多因素参与的极其复杂的过程
12、，涉及到细胞能动性的增强，细胞外基质的降解，肿瘤血管生成，肿瘤增殖及凋亡等。目前的研究表明 p38 蛋白激酶作为重要的胞内信号转导通路参与了这一系列过程。p38 蛋白激酶促进了细胞能动性增强。Kim 等3发现，在 H-Ras 诱导的细胞侵袭和转移中，抑制了 p38 蛋白激酶的活性，降低了细胞的运动能力，说明 p38 蛋白激酶是一非常关键的信号传导分子。我们通过对 30 例未行化疗和 30 例术前化疗患者的胃癌组织、癌旁组织中 p38蛋白激酶的表达情况进行研究发现胃癌组织中 p38 蛋白激酶表达高于癌旁组织，化疗组胃癌组织中 p38 蛋白激酶表达低于未化疗组，化疗组癌旁组织中 p38 蛋白激酶表
13、达与未化疗组相比无统计学差异。因此我们可以得出术前化疗后胃癌组织中 p38 蛋白激酶表达下降的结论。我们的研究发现术前化疗可以诱导胃癌细胞的凋亡4，由此可见在胃癌发生过程中 p38 蛋白激酶的表达降低可能与胃癌细胞的凋亡有关。 未化疗组中期及期胃癌组织高表达，明显高于期。化疗组期中 p38 蛋白激酶表达与期及期中的表达差异有统计学意义（P0.01）。我们发现 p38 蛋白激酶表达水平可能与胃癌的分期相关，而在未化疗组及化疗组有转移者组织中 p38 蛋白激酶的表达明显高于无转移者(P0.01)。上述结果表明 p38 蛋白激酶高表达生长抑制信号不能传入细胞内,从而使肿瘤细胞逃逸了生长抑制的作用。S
14、imon 等5报道了 p38 特异性抑制剂 SB203580 可抑制 TPA 诱导的 AP1 依赖的 MMP-9 的表达，而基质金属蛋白酶（MMP）可以降解细胞外基质，促进肿瘤转移。这为肿瘤细胞的生长创造良好环境，有利于肿瘤细5胞的生长、浸润、转移。调控肿瘤生长的信号转导途径是个庞大而复杂的网络系统，涉及到多条通路之间的交互和整合。采用 PFC 方案化疗后化疗组胃癌组织中 p38 蛋白激酶表达低于未化疗组，是否为化疗药磷酸化 p38 胞内分布的差异并对 Eca109 凋亡率产生较大影响，具体机制有待进一步探讨。我们发现 p38 蛋白激酶表达水平与胃癌的分期相关，我们推论是否可以通过某种药物去降
15、低 p38 蛋白激酶在胃癌组织中的含量,以此降低肿瘤细胞增殖与转移。靶向药物的研制最终是要应用到活体的，然而目前的研究多是在体外细胞株中得到的结果，人体组织中 p38 蛋白激酶通路在时间空间上如何分布，下游效应如何，均有待于更深入广泛地研究。【参考文献】1 Han J, Lee JD, Bibbs L, et al. A MAP kinase targeted by endotoxin and hyperosmolarity in mammaliancells J. Science,1994,265(5173):808-811.2 Obata T, Brown GE, Yaffe MB. MA
16、P kinase pathways activated by stress: the p38 MAPK pathway J. Crit Care Med，2000,28(4 Suppl): 67-77.3 Kim MS, Lee EJ, Kim HR, et al. p38 kinase is a key signaling molecule for H- Ras-induced cell motility and invasive phenotype in human breast epithelial cells J. Cancer Res， 2003,63(17):5454-5461.4 梁辉,陈国玉,俞学明,等.术前化疗对胃癌组织上皮钙黏附素表达的影响J.肿瘤防治杂志, 2002,9(6):595-596.5 Simon C, Simon M, Vuce
