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1、1四妙勇安汤不同提取部位抗炎作用的研 究作者：王光宁, 李伟东 ,蔡宝昌【摘要】 目的 观察四妙勇安汤不同提取部位的抗炎作用。方法 利用二甲苯致小鼠耳廓肿和大鼠琼脂性肉芽肿炎症模型，观察不同提取部位对炎症的影响。结果 大孔树脂 50%醇洗液部位对小鼠耳廓肿胀度有明显的抑制作用 (P0.05);对大鼠琼脂性肉芽肿也有明显的抑制作用(P0.05，P0.01)，且呈一定的量效关系。结论 四妙勇安汤大孔树脂 50%醇洗液部位具有显著的抗炎作用。 【关键词】 四妙勇安汤;提取部位;抗炎Abstract:Objective To investigate the anti inflammation effe
2、cts of extractive fractions isolated from Simiaoyongan decoction. Methods The anti inflammation actions of extractive fractions were examined in acute inflammation model in mice and chronic inflammation model in rats. Results Extraction fraction isolated with macroporous resin+50% ethanol had obviou
3、s anti inflammation action acute inflammation in mice (P0.05); also had anti inflammation action chronic inflammation in rats with obvious dosage effect relationship (P0.05,P0.01). Conclusion Extractive fraction isolated with macroporous resin+50% ethanol had notable anti inflammation actions.Key wo
4、rds:Simiaoyongan decoction;extractive fractions ;anti inflammation四妙勇安汤为治疗热毒型脱疽的著名古方，由金银花、玄参、当归、甘草组成，该方能滋阴降火、和营解毒，为治疗血栓闭塞性脉管炎的有效验方。现代研究也证实本方水煎液具有较强的抗炎作用1，研究表明原方和氯仿萃取部位对小鼠耳廓肿胀度有明显的抑制作用2。本实验对四妙勇安汤不同提取部位(金银花挥发油、当归挥发油、醇沉部分、大孔树脂残留液、大孔树脂水洗液、大孔树脂 50%醇洗液)的2抗炎作用进行药效研究。1 材 料1.1 试药阿斯匹林(100 mg/片，批号：XK153)Quimic
5、a Farmaceutica Bayer,S.A.生产;琼脂(购自中国药品生物制品检定所，批号为 980424);四妙勇安汤各提取部位由江苏省中药质量控制工程技术研究中心提供，金银花挥发油和当归挥发油是二氧化碳超临界萃取物溶解所得。按照处方称取药材一定量，进行水提醇沉，滤过，滤液用SP825 型树脂进行纯化，分别得到残留液、水洗液和 50%醇洗脱液。1.2 动物清洁级 KM 种小鼠，各半，体质量 2530 g，合格证号：SCXK(沪)2002 0010;清洁级 SD 大鼠，雄性，体质量 180220 g，合格证号：SCXK(沪)2002 0010。动物购自上海斯莱克实验动物有限责任公司(原中科
6、院上海实验动物中心)。1.3 仪器PB303N 型电子天平，上海梅特勒托利多公司。2 方法与结果2.1 抗炎有效部位的药效筛选2.1.1 实验分组 取小鼠 80 只(禁食 12 h)，称重，随机分为 8 组，每组 10 只(各半),分别为空白对照组、阿斯匹林(阳性药)组、金银花挥发油、当归挥发油、醇3沉部分、大孔树脂残留液、大孔树脂水洗液、大孔树脂 50%醇洗液组共 8 组。2.1.2 实验方法3各组按表 1 剂量分别灌胃给药(其中供试品各组剂量相当于临床等效剂量)，给药量均为 35 mL/kg，阿斯匹林剂量为 0.2 g/kg(用 0.57%阿斯匹林灌胃 35 mL/kg)，空白对照组小鼠用
7、蒸馏水 35 mL/kg 灌胃给药。给药后 1 h 各鼠左耳正反两面涂二甲苯 0.03 mL/只，右耳作对照，20 min 后脱颈椎处死，沿耳廓基线剪下两耳，用直径 6 mm 的打孔器将双耳同部位等面积切下，用天平分别称重，以左右耳片质量之差为肿胀度。计算各组肿胀度和肿胀率(%)，计算肿胀抑制率(%)。各给药组与空白对照组采用 t 检验进行统计学处理。 肿胀率=左耳质量(mg)-右耳质量(mg)/ 右耳质量(mg) 100%肿胀抑制率=(对照组平均肿胀度-给药组平均肿胀度)/对照组平均肿胀度100%2.1.3 实验结果 大孔树脂 50%醇洗液与空白对照组肿胀率相比，差异有显著性，肿胀抑制率为
8、22.2%，提示大孔树脂 50%醇洗液部位为四妙勇安汤抗炎的有效部位。结果见表 2。表 1 四妙勇安汤各提取部位药液浓度及给药剂量表 2 四妙勇安汤各提取部位对小鼠耳廓肿胀的影响2.2 大孔树脂醇洗液对大鼠琼脂性肉芽肿的影响2.2.1 动物建模 取雄性大鼠在背部中线处取 2.0 cm2.0 cm 面积去毛，消毒，皮下注射 2%琼脂(55 水浴保温)2 mL，注射后立即凸起球状包块即可。2.2.2 实验分组与给药3 取四妙勇安汤大孔树脂 50%醇洗部位：批号：42005 1 2,浓度为 10 g 生药/mL，临用前用蒸馏水配成 4.95、2.475、1.238 g 生药/mL，分别作为大、中、小
9、剂量用药。隔日取 60 只肉芽肿模型大鼠，随机分为 5 组，每组 12 只，分别为模型对照(蒸馏水)组、阳性药(阿斯匹林)组和四妙勇安汤大孔树脂 50%醇洗部位大、中、小剂量组。大、中、小剂量组大鼠分别用含醇洗部位4.95、2.475、1.238 g 生药/mL 药液灌胃 10 mL/kg(即剂量分别为 49.5、24.75、12.38 g 生药/kg)，阳性药(阿斯匹林)组用含 1 g/mL 药液灌胃 10 mL/kg(即剂量为 0.1 g/kg)，模型对照组用蒸馏水灌胃 10 mL/kg。每日灌胃给药 1 次，连续给药 10 d，每日观察肉芽肿变化，末次给药 1 h 后脱颈椎处死大鼠，剪开
10、肉芽部位皮肤，剥离肉芽肿琼脂块并称重，记录湿重，根据肉芽肿的湿重计算肉芽肿抑制率(%)，按如下公式计算：抑制率=(模型对照组湿重均值-给药组湿重均值)/模型对照组均值100%2.2.3 实验结果 以每 100 g 肉芽的重量即肉芽肿系数作为指标，阿斯匹林组和各剂量组与模型对照组进行组间 t 检验，具体数据见表 3。由表可得出：四妙勇安汤 50%醇洗部位的大剂量组与模型组相比差异有极显著性，中剂量差异有显著性，表明四妙勇安汤 50%醇洗部位对大鼠琼脂性肉芽肿有明显的抑制作用，且呈一定的量效关系。表 3 四妙勇安汤 50%醇洗部位对大鼠琼脂性肉芽肿的抑制作用3 讨 论通过小鼠急性炎症试验(二甲苯致
11、耳肿胀法)和大鼠慢性炎症试验(琼脂性肉芽肿法)对四妙勇安汤的抗炎有效物质基础进行了药效筛选，结果表明大孔树脂醇洗部位有明显的抗炎作用，且呈一定的量效关系。为四妙勇安汤古方的现代研究和进一步开发制剂打下基础。其中除了大孔树脂 50%醇洗部位有显著的抗炎作用外，5金银花挥发油、当归挥发油、醇沉部分、大孔树脂残留液对小鼠耳廓肿胀都一定的抑制作用，建议可在以后的研究中对以上提取部位合并做进一步的药理药效研究。【参考文献】1 马世平，瞿融，徐向伟，等.四妙勇安汤的抗炎作用J.南京中医学院学报，1994，10(6)：27.2 李伟东，石磊，刘陶世，等. 四妙勇安汤及不同提取部位对小鼠急性炎症的影响J. 南京中医药大学学报，2004，20(5)：305.3 李仪奎.中药药理实验方法学M.上海：上海科学技术出版社，1991：300-304.广东药学院学报
