Ecadherin和Ki67在结直肠癌组织中的表达及意义

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1、1Ecadherin 和 Ki67 在结直肠癌组织 中的表达及意义作者：何艳姣, 刘朝霞，李洪利，俞进，李光【摘要】 目的探讨 E cadherin 和 Ki 67 在结直肠癌中的表达及意义。方法应用免疫组化 SP 法检测 48 例结直肠癌、23 例结肠腺瘤和 20 例正常结肠组织中E cadherin 及 Ki 67 的表达，并分析其与结直肠癌临床病理特征的关系。结果结直肠癌、结肠腺瘤和正常结肠组织中 E cadherin 异常表达率分别为77.1、24.0和 5.0，结直肠癌 E cadherin 异常表达率明显高于结肠腺瘤和正常结肠组织，组间比较差异有显著性（P0.01）。Ki 67 阳

2、性指数在结直肠癌、结肠腺瘤及正常结肠组织中分别为（67.602.52）、 （38.443.59）及（8.651.10）。结直肠癌的 Ki 67 阳性指数明显高于结肠腺瘤和正常结肠组织，组间两两比较差异有统计学意义（0.01）。E cadherin 表达与浸润深度和有无淋巴转移有关（P0.020 和 P=0.013），而与患者的年龄、性别、大体形态、分化程度无关。Ki 67表达与患者性别和有无淋巴转移有关（P0.011 和 P0.043），而与患者的年龄、大体形态、分化程度、浸润深度无关。E cadherin 正常表达组和异常表达组的Ki 67 阳性指数分别为（67.3018.87）和（68.6

3、411.99）。E cadherin 异常表达组 Ki 67 阳性指数略高于正常表达组，但无统计学意义。结论 E cadherin 和Ki 67 是结直肠癌发生发展过程中的重要因子，并与结直肠癌浸润转移有关，可作为评估结直肠癌预后、指导治疗的指标，但两者在结直肠癌发生、发展、侵袭和转移过程中没有协同作用。 2【关键词】 结直肠肿瘤；E cadherin；Ki 67Expression and Significance of E cadherin and Ki 67 in Colorectal CarcinomaAbstract：Objective To study the expression

4、 and significance of E cadherin and Ki 67 in colorectal carcinoma. MethodsForty eight colorectal carcinomas,23 colorectal adenoma and 20 normal colorectal tissues were envolled in this study. Immunohistochemistry method was used to detect the expressions of E cadherin and Ki 67, then their relations

5、hip with the clinicopathological features of colorectal carcinomas was analyzed. ResultsThe abnormal rate of E cadherin in colorectal carcinomas (77.1) was much higher than that of adenomas (24) and normal tissues (5), significant correlation was found (P0.01). Ki 67 positive index in colorectal car

6、cinomas（67.602.52） was much higher than that of adenomas（38.443.59） and normal tissues（8.651.10）, significant correlation was found (P0.01). E cadherin expression was associated with infiltrated depth and lymph node metastasis (P=0.020, P=0.013). Ki 67 expression was associated with gender and lymph

7、 node metastasis (P=0.011, P=0.043). Ki 67 positive index in E cadherin normal expression and abnormal expression were （67.3018.87） and （68.6411.99）. Ki 67 positive index in E cadherin abnormal expression was higher than normal expression, but no statistical significance. ConclusionE cadherin and Ki

8、 67 were important factors in occurrence and development of colorectal carcinoma, and associated with infiltration and metastasis of colorectal carcinoma, so they could be the index to evaluate prognosis and to guide treatment, but they had no cooperation in occurrence, development, infiltration and

9、 metastasis of colorectal carcinoma.Key words：Colorectal tumor；E cadherin；Ki 670 引言细胞粘附分子是介导细胞与细胞、细胞与细胞外基质间粘附和维持组织结构形态的重要因素，其在恶性肿瘤的侵袭和转移中起着重大作用。E 钙粘素（E cadherin）是一种依赖 Ca2+的跨膜糖蛋白，它与胞浆相关蛋白 连环素（ catenin）等形成复合物而发挥正常的细胞粘附和信号传递功能，是肿瘤转移的抑制因素。人体许多肿瘤的浸润和转移与 E 钙粘素表达减弱或丧失有关。本研究拟采用免疫组织化学 SP 法检测 E cadherin 在正常结肠

10、组织、结肠腺瘤组织及结直肠癌组织中的表达，并选择 Ki 67 指数作为反映结直肠癌增殖活性的指标，旨3在探讨它们的异常表达与结直肠癌分化、转移等之间的关系。1 材料和方法1.1 材料取自北京天坛医院 20032005 年间结直肠癌手术标本 48 例，均经病理证实。所有病例术前均未进行任何抗肿瘤治疗。常规 10%中性福尔马林固定、石蜡包埋。切片厚度 4m，常规 HE 染色。患者年龄 3284 岁，平均 62.2 岁。其中男 28 例，女 20 例。大体形态：隆起型 19 例，溃疡型 29 例。分化程度：高分化 9 例，中分化 31 例，低分化 8 例。浸润深度：浅层 7 例，深层 41 例。淋巴

11、结转移：无淋巴结转移 28 例，有淋巴结转移 20 例。并另取结肠腺瘤组织活检标本 23 例及正常结肠组织(远癌端正常组织)活检标本 20 例作为对照。1.2 免疫组织化学染色（链霉素抗生物素蛋白过氧化物酶法，SP 法）石蜡切片常规脱蜡至水，染色方法按 SP 试剂盒说明书步骤进行， 0.01M 枸橼酸缓冲液（pH=6.0）微波修复 18 分钟行抗原修复，第一抗体（鼠抗人 E cadherin、Ki 67 单克隆即用型抗体均购自北京中杉金桥公司）4过夜。经 DAB 显色后，苏木素复染，中性树胶封片。阴性对照采用 0.01M PBS（pH7.4）液体代替一抗，其他步骤不变。SP 及 DAB 试剂盒

12、均购自北京中杉金桥公司。1.3 结果判定标准 E cadherin 在正常情况下阳性染色定位于细胞膜，即连续的细胞膜染色。每张切片随机选取 10 个高倍视野，每个视野计数 100 个瘤细胞，计数阳性细胞百分比。无着色为（），阳性瘤细胞数90为表达降低，90为表达正常。20以上瘤细胞核和（或）浆染色为核和（或）浆表达。出现胞浆和（或）胞核表达为异位表达。异位表达和表达降低统归为异常表达1。Ki 67 主要表达于细胞核，染成黄棕色者为阳性，未被染成黄棕色者为阴性。每张切片随机选取410 个高倍视野，每个视野计数 100 个肿瘤细胞，计算阳性标记细胞数的平均百分率。阳性细胞表达率50者为低表达，50

13、者为高表达2。1.4 统计学分析采用 SPSS 10.0 统计分析软件进行分析，用 t 检验、卡方检验和确切概率法。2 结果2.1E cadherin 和 Ki 67 在结直肠癌、结肠腺瘤及正常结肠组织中的表达情况表 1 结直肠癌中 E cadherin 和 Ki 67 表达与临床病理指标的关系（略）结直肠癌 48 例中，E cadherin 正常表达 11 例，异常表达 37 例，异常表达率为 77.1，见图 1、2；结肠腺瘤 25 例中，E cadherin 正常表达 19 例，异常表达 6例，异常表达率为 24.0；20 例正常结肠组织中，E cadherin 正常表达 19 例，异常表

14、达 1 例，异常表达率为 5.0。结直肠癌 E cadherin 异常表达率明显高于结肠腺瘤和正常结肠组织，组间比较差异有统计学意义（0.01）。Ki 67 阳性指数在结直肠癌、结肠腺瘤及正常结肠组织中分别为（67.602.52）、 （38.443.59）及（8.651.10）。可见，结直肠癌的 Ki 67 阳性指数明显高于结肠腺瘤和正常结肠组织，组间两两比较差异有统计学意义（0.01），见表 1。经统计学分析，E cadherin 表达与浸润深度和有无淋巴转移有关（P0.020 和 P=0.013），而与患者的年龄、性别、大体形态、分化程度无关。Ki 67 表达与患者性别和有无淋巴转移有关（

15、P0.011 和 P0.043），而与患者的年龄、大体形态、分化程度、浸润深度无关。2.2 结直肠癌中 E cadherin 与 Ki 67 表达的关系 E cadherin 正常表达组和异5常表达组的 Ki 67 阳性指数分别为（67.3018.87）和（68.6411.99）。E cadherin 异常表达组 Ki 67 阳性指数略高于正常表达组，但无统计学意义。E cadherin 与 Ki 67 表达无关，见表 2。表 2 结直肠癌中 E cadherin 表达与 Ki 67 表达的关系（略）3 讨论3.1E cadherin 在结直肠癌中的表达及意义 E cadherin 是钙粘附蛋

16、白超家族的成员之一，是最重要也是近几年研究最深入的一类钙粘附蛋白。E cadherin 被看作是上皮细胞选择性粘着剂，以维持组织结构的完整性和极性，E cadherin 表达下调或不表达是上皮细胞离散的分子基础，提示 E cadherin 具有肿瘤侵袭和转移抑制功能3,4。目前，E cadherin 已成为研究恶性肿瘤侵袭和转移的热点之一，如膀胱癌4、甲状腺乳头状癌5等。大量的研究结果表明，E cadherin 表达下降或丧失与肿瘤低分化、高侵袭、高转移和高复发率呈正相关，是预示肿瘤进展及患者预后的指标之一。本研究结果显示，结直肠癌中 E cadherin 异常表达率明显高于结肠腺瘤和正常结肠组织，组间比较差异有显著性，表明 E cadherin 在结直肠癌的发生发展中起一定作用。关于 E cadherin 与肿瘤分化程度、浸润深度和淋巴转移的关系的研究，结果不一致。有文献报道结直肠