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1、1HPLC 法测定不同采收期小叶榕叶中异牡 荆苷的含量【摘要】 目的 建立小叶榕叶中异牡荆苷的含量测定方法，并比较不同采收期小叶榕叶的异牡荆苷的含量差异。方法 用 HPLC 法进行测定，流动相为甲醇 水（3862），检测波长为 270 nm。结果 不同采收期药材异牡荆苷最高含量达0.69，最低为 0.18，712 月份含量明显高于其他月份。结论 该方法简便，准确，重复性好，适于小叶榕叶中异牡荆苷的含量测定。 【关键词】 高效液相色谱法；小叶榕叶；异牡荆苷；采收期Abstract:Objective To develop a quantitative method to determine is
2、ovitexin in Folium Fici Microcarpae, and to compare the content of isovitexin in Folium Fici Microcarpae of different growth stages.Methods HPLC method was used by using MeOH H2O (3862) as mobile phase. The detection wavelength was at 270 nm.Result The highest content of isovitexin from different gr
3、owth stages was 0.69%, and the lowest was 0.18%. The contents in 7-12 moths were significantly higher than other months. Conclusion This method was simple, quick and accurate for determination of isovitexin in Folium Fici Microcarpae.Key words:HPLC; Folium Fici Microcarpae; isovitexin小叶榕叶 Folium Fic
4、i Microcarpae，又名小榕叶、落地金钱，来源于桑科榕属植物榕树（Ficus microcarpa L.f.）的叶。小叶榕叶为民间常用中草药，其味淡，性凉，具有清热发表、解毒消肿、祛湿止痛的功效1。用于治疗哮喘和慢性支气管炎，在治疗心血管疾病、抗炎、抑菌等方面也都有显著的效果2。其中主要含黄酮、三萜类和甾体化合物等化学成分3。小叶榕叶中的黄酮类成分主要为异牡荆苷（另文报道）。本实验采用 HPLC 法，建立了小叶榕叶中异牡荆苷的含量测定方法。该方法操作简便、快速、重现性好，适用于本品的质量控制。21 仪器与试药美国 Waters 高效液相色谱仪：Waters 600 型泵，2487 型紫
5、外检测器，Empower工作站。赛多利斯电子天平。小叶榕药材采自广州，在一年中各月份分别采集，所有样品由广东药学院房志坚副教授鉴定为桑科榕属植物小叶榕 Ficus microcarpa L.f.的叶。对照品异牡荆苷为自制，经 UV、氢谱、碳谱鉴定（另文报道），并利用 HPLC 归一化法分析其纯度达 99.48%。甲醇（色谱纯，天津科密欧公司），其他试剂均为分析纯。2 方法与结果21 色谱条件Gracesmart C18 色谱柱（250 mm4.6 mm，5 m）；流动相：甲醇 水（体积比3862）；柱温：25 ；流速：1.0 mL/min；检测波长：270 nm；进样量：20 L。22 对照品
6、溶液的制备取异牡荆苷对照品适量，精密称定，以体积分数 50甲醇溶解，配制成每 1 mL 含异牡荆苷 21.6 g 的溶液，以此作为对照品溶液。23 供试品溶液的制备取本品粉末（过 20 目筛）约 1 g，精密称定，置圆底烧瓶中，精密加入体积分数50甲醇 50 mL，称定重量，加热回流 40 min，放冷，再称定重量，以体积分数350甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，精密量取续滤液 10 mL，通过聚酰胺柱（6080 目聚酰胺约 2 g，装于内径 1.5 cm 的小柱），以体积分数 50甲醇洗脱，洗脱液收集于 100 mL 量瓶，并以洗脱液定容至刻度，摇匀，即得。24 线性关系考察分别精密量取“2
7、2”项下对照品溶液 0.25，0.5，1.0，2.0，3.5，5.0 和 10.0 mL置 10 mL 量瓶，加体积分数 50%甲醇稀释至刻度，按上述色谱条件进样，测定峰面积，分别为 11 565、21 718、44 185、88 508、153 526、221 861、458 014，依峰面积（A）与质量浓度（）绘制标准曲线，所得回归方程为 A=21 171-2 585.1，r=0.9996，表明异牡荆苷质量浓度在 0.5421.6 gmL-1 范围内线性关系良好。 25 精密度试验精密吸取对照品溶液，重复进样 5 次，测定峰面积，求得 RSD 值为 0.73，表明精密度良好，结果见表 1。
8、26 稳定性试验对同一供试品溶液，分别于 0，2，4，12，24 h 进样，测定异牡荆苷峰面积，求得 RSD 值为 1.84，表明样品在 24 h 内稳定，结果见表 1。27 重复性试验取同一批号样品 5 份，按供试品溶液制备方法平行处理，依法测定，求得 RSD 值为 0.42，表明重复性良好，结果见表 1。表 1 精密度、稳定性、重复性试验测定结果（略）428 回收率试验精密称取已知含量的样品数份，精密加入一定量的对照品溶液，依法测定，计算平均回收率为 100.51，RSD 值为 4.50，结果见表 2。表 2 回收率试验测定结果（略）29 样品含量测定分别取不同采收期的样品按供试品溶液制备
9、方法处理，依法测定，计算含量。结果见图 1 及表 3。表 3 不同月份小叶榕叶中异牡荆苷的含量（略）3 讨 论31 异牡荆苷为小叶榕叶中含量较高的黄酮类药效组分之一，故将其作为小叶榕叶质量评价的指标成分。异牡荆苷在 270 nm 处有最大吸收4，故选择该波长为测定的波长。实验曾比较不同比例的甲醇作为提取液，以体积分数 50甲醇的提取液峰面积较高，杂质较少，确定选用体积分数 50甲醇回流提取。提取液通过聚酰胺柱能有效去除杂质，减少对色谱柱的损害。32 本试验考察了不同采收月份药材的情况，结果表明，小叶榕叶中异牡荆苷成分的含量在 16 月份较低，在 712 月份较高。该结果为小叶榕叶的合理采收和利
10、用提供了理论依据。对于不同采收年限，不同产地的药材还有待于进一步考察。33 本研究建立了小叶榕叶中异牡荆苷含量的测定方法。线性关系及重现性良好，方法稳定准确，可作为小叶榕叶的质量控制方法，为进一步研究其物质基础5和作用机理打下了基础。【参考文献】1赵守训.中药辞海：第三卷M.北京：中国医药科技出版社,1997：1334.2国家中医药局中华本草编委会.中华本草：第三册M.上海：上海科技出版社, 1999：495-497.3江苏新医学院.中药大辞典：下册M.上海：上海科技出版社, 1977：2529.4中国科学院上海药物研究所植物化学研究室.黄酮体化合物鉴定手册M.北京:科学出版社,1981：437-439.
