《HPLC法测定感速康胶囊中绿原酸的含量》由会员分享，可在线阅读，更多相关《HPLC法测定感速康胶囊中绿原酸的含量（4页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1HPLC 法测定感速康胶囊中绿原酸的含量【关键词】 感速康胶囊,绿原酸,HPLC 法【摘要】 目的 建立感速康胶囊中绿原酸的含量测定方法。 方法 高效液相色谱法，Alltima C 18 （5m，150cm4.6mm）;流动相为甲醇水（内含 0.02mol/L 磷酸二氢钠，磷酸调 pH 为 3.84.0）为 3565;检测波长为327nm。 结果 平均回收率为 98.7%，RSD=1.37%。 结论 该方法简便，结果准确，重现性好，可作为感速康胶囊的质量控制方法。 关键词 感速康胶囊 绿原酸 HPLC 法Determination of Chlorogenic acid in Gansuka
2、ng capsule by HPLCZhao Bin，Huang Wenhua，Li Na Chengdu University of TCM，Chengdu611730.【Abstract】 Objective To establish a method for determine of the contents of Chlorogenic acid in Gansukang capsule;Methods Determine by HPLC，with Alltima C 18 （5m，150mm4.6mm），MeOH-0.02mol/L NaH 2 PO 3 （Changed pH to
3、3.84.0by H 3 PO 3 ）（35:65）as mobile phase and UV detector at327nm.Results The average re-covery rate was98.7%，RSD=1.37%.Conclusion This method is rapid，reliable and simple，and can be used for the quality control of Gansukang capsule.Key words gansukang capsule chlorogenic acid HPLC感速康胶囊为卫生部药品标准收载的品种
4、（标准号:WS 2 -B-3985-98-2002）;由金银花、对乙酰氨基酚等六味药组成，具有清热解毒，消炎止痛的功效。原标准只用分光光度法测定其中对乙酰氨基酚的含量 1 ，而金银花也为方中君药，其主要有效成分为绿原酸，为了更好的控制该制剂的质量，本文采用高效液相色谱法对2金银花中的绿原酸进行了含量测定，方法简单，重现性好。 1 仪器与试药剂1.1 仪器 Agilent1100 型高效液相色谱仪（G1310A IsoP-ump;G1315B DAD 检测器;G1313A Als 自动进样器;G1316A Colcom 柱温箱）;万分之一电子天平（Sartorius BP121S）;超声波清洗器
5、（DL-360 中国宁波）。1.2 试药剂 甲醇为色谱醇;水为重蒸馏水，其余试剂均为分析纯。绿原酸对照品（批号:753-9909，中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用）;感速康胶囊（吉林泷源制药有限责任公司）;阴性对照品（由成都中医药大学生化教研室提供）。2 实验方法与结果2.1 色谱条件 色谱柱:Alltima C 18 （5m，150mm4.6mm）;流动相为甲醇水（内含 0.02mol/L 磷酸二氢钠，磷酸调 pH 为 3.84.0）为 3565;流速 1ml/min;柱温30;检测波长 327nm。2.2 实验用溶液的制备2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品 11.8
6、mg，置 25ml 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，再精密量取 1ml，置 10ml 量瓶中，加 50%甲醇稀释至刻度，摇匀即得（每 1ml 含绿原酸 0.0472mg），避光低温保存。2.2.2 供试品溶液的制备 取装量差异项下的感速康胶囊 10 粒，研取约 0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 50%甲醇 50ml，称定重量，超声处理 30min，放冷，称定重量，用 50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过即得（避光低温保存）。32.2.3 阴性样品溶液的制备 取不含金银花的阴性样品，同供试品溶液制备方法制备。2.3 阴性干扰性实验 见图 1、图 2、图 3。图 1 绿原酸标准品
7、图 2 感速康胶囊样品在选定的色谱条件下，分别取绿原酸对照品溶液 5l 样品溶液和阴性样品溶液各 10l 注入液相色谱仪，绿原酸对照品峰的保留时间约为 10min，样品在对照品峰相应的位置上有相同的峰，阴性样品无干扰。 图 3 缺金银花阴性2.4 线性范围的考察 精密量取绿原酸对照品溶液（47.2g/ml）2、4、6、8、10、12l 注入液相色谱仪，记录色谱图，测定其峰面积，并以峰面积值（A）对进样量（C）进行回归分析，得标准曲线方程为:A=3443.1C+11.101，r=0.9996。结果表明在 0.09440.5664g 范围内，绿原酸线性关系良好。2.5 精密度试验 精密吸取供试品溶
8、液 10l，连续进样 5 次，测得绿原酸峰面积的相对标准差（RSD）=1.07%，精密度良好。2.6 稳定性试验 在避光低温条件下保存供试品溶液，每隔 1h 测定 1 次，样品中绿原酸峰面积值的 RSD%=1.75%。结果表明:样品供试液在 8h 内稳定。2.7 重复性试验 对批号为 040501 感速康胶囊样品，同法制备 5 份供试品溶液进4行测定，绿原酸的平均含量为 3.49mg/g，其 RSD%=2.14%，方法重现性良好。2.8 回收率试验 取已知含量的样品（3.49mg/g，批号 040501）6 份，每份约 0.3g，分别精密添另一定量的绿原酸对照品，照正文拟定的供试品制备方法制备
9、加样回收供试品溶液，精密吸取 10l 注入色谱仪中，测定峰面积，结果平均回收率为98.7%，RSD=1.37%（n=6）。2.9 样品含量测定 对三批市售样品进行含量测定，结果见表 1。表 1 三批感速康胶囊绿原酸含量测定结果 批号 含量（mg/g）（略）感速康胶囊每粒装 0.3g，根据测定结果，规定每粒中含金银花以绿原酸（C 16 H 18 O 9 ）计算不得低于 1.0mg/粒。3 讨论感速康胶囊为中西药结合制剂，金银花为中药部分的君药。原标准只收载了对乙酰氨基酚的含量测定，为了更好的控制成品的质量，本研究采用高效液相色谱方法测定金银花中绿原酸的含量，具有方法简单、精确，重现性好等优点。在
10、实验中曾选用药典金银花项下的高效条件，但本方中成分复杂，分离度不好;经反复试验，确定本文的条件，分离效果好，阴性无干扰。最大吸收波长的选择:绿原酸的甲醇溶液在 200400nm 进行了波长扫描，发现其在 327nm 处有最大吸收，故选择 327nm 为测定波长。提取条件的选择:在实验中比较了回流提取和超声提取两种方法，结果发现超声提取样品绿原酸含量较回流提取高，可能是由于绿原酸遇热不太稳定的原因 2 5。超声提取 30min，绿原酸即可提取完全。提取溶剂还曾选用甲醇，但样品绿原酸峰拖尾现象严重，选用 50%甲醇后，峰形尖锐，对称性好，能满足测定要求。参考文献1 中华人民共和国药典.北京:化学工
11、业出版社，2000，150.2 谢秀琼.中药新制剂开发与应用，第 2 版.北京:人民卫生出版社，2000，343. 医学论文中有关实验动物描述的要求在医学论文的描述中，凡涉及到实验动物者，在描述中应符合以下要求:（1）品种、品系描述清楚;（2）强调来源;（3）遗传背景;（4）微生物学质量;（5）明确体重;（6）明确等级;（7）明确饲养环境和实验环境;（8）明确性别;（9）有无质量合格证;（10）有对饲养的描述（如饲料类型、营养水平、照明方式、温度、湿度要求）;（11）所有动物数量准确;（12）详细描述动物的健康状况， （13）对动物实验的处理方式有单独清楚的交代， （14）全部有对照，部分可采用双因素方差分析。
