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1、草菇常用育种技术 作者： | 来源：吉林省食药用菌信息网 | 发布时间：2010-5-20 | 浏览次数：14 次 草菇又名兰花菇、美味苞脚菇、中国蘑菇，属担子菌纲伞菌目毒伞科苞脚菇属，原产热带和亚热带地区，是一种肉质肥嫩、滋味鲜美、营养丰富的食用菌。近年来，广州地区草菇生产得到迅猛发展，生产规模不断扩大，已成为全省乃至全国最大的草菇生产基地，全年产值超过 1.5亿元。但目前草菇育种工作严重滞后，菌种老化、退化现象严重，已成为草菇产业可持续发展的重要制约因素。因此，笔者针对广东省草菇育种技术人员的水平、实验室相关育种仪器设备等具体情况，简述草菇选育种常用的、实用的、相对简单的育种技术，供草菇育
2、种工作人员和菌种生产人员参考。希望通过大家的努力，打破广东省十多年来无草菇菌株通过品种审定的尴尬局面。1自然选育自然选育也称为评选法或淘汰法，是指通过人工选择菌种自然产生的优良性状的育种方法。自然选育法是最古老的，也是最简便的、应用最广的选育菌种的方法。广东省微生物研究所的育种工作者从野外采集子实体，经组织分离选育出 V23、V5 等菌株，便是用该种方法的典范。自然选育主要包括如下步骤：（1）在自然界采集野生菌株的子实体，或从人工栽培的草菇中挑选性状优良的子实体；（2）对采集回来的子实体进行组织分离、转管，把性状优良的子实体留作母种；（3）将母种扩大培养成原种和生产种；（4）做出菇试验，经过初
3、筛、复筛,把出菇早、出菇均匀、粒大、菇形好、产量高的菌种筛选保留；（5）小面积试种，检验一致性和稳定性；（6）中试和区试；（7）新品种鉴定或审定，大面积推广应用。2 孢子分离法育种孢子分离法主要是利用草菇成熟的有性孢子萌发成菌丝来获得菌种，是一种很有实用价值的有性繁殖育种方法，如与自然选育法交互使用，可以有效地防止菌种老化、退化。孢子分离法可分为多孢子分离法和单孢分离法。 2.1多孢子分离法多孢子分离是把许多担孢子一起接种在同一灭菌培养基上，让其萌发后自由结合而获得纯菌种。多孢分离法主要包括如下步骤：(1)种菇的选择和消毒处理，选择形态正常、发育健壮、无病虫害、包被刚刚开始破裂的草菇子实体作为
4、种菇，用 75%酒精对种菇表面进行消毒，（2）收集担孢子，可采用孢子采集器法、钩悬法、菌褶上抹法、试管印模法收集担孢子；（3）多孢子培养，根据可育性菌株的菌丝生长初期透明无色、纤细、分枝性强、爬试管壁能力强、生长速度快，生长后期变灰白至白色、较粗壮、呈棉絮状或全绒毛状、气生菌丝旺盛、产生少量或大量的红褐色厚垣孢子，移植后生长正常的培养特征1，筛选出符合条件的菌株培育成母种；（4）将母种扩大培养成原种和生产种；（5）进行出菇试验，经过初筛、复筛,把出菇早、出菇均匀、粒大、菇形好，产量高的菌种筛选保留；（6）小面积试种，检验一致性和稳定性；（7）中试和区试；（8）新品种鉴定或审定，大面积推广应用。
5、2.2单孢分离法单孢分离就是将采集到的孢子群分开培养，让其单独萌发成菌丝而获得纯菌种的方法。曹裕汉通过对草菇有性分离选育种研究，选育出草菇菌株 V40，表明草菇孢子分离菌株在菌丝形态、生长速率、产厚垣孢子能力、出菇、产量等性状上存在较大的差异。可以在菌丝浓密、气生菌丝好、能产生大量厚垣孢子的菌株中选择到较高产量的菌株应用于生产，解决草菇生产上出现的菌种老化、退化问题。单孢分离法主要包括如下步骤：(1)种菇的选择和消毒处理；(2)收集担孢子；(3)用连续稀释法获得单孢子，单孢子的分离可采用单孢子分离器法和平板划线分离法；（4）孢子涂布，将获得的单孢子均匀涂布于灭菌培养基上；（5）单孢培养，把单孢
6、子置于 3540恒温下培养至长成纯菌丝，然后按可育性菌株的培养特征把符合条件的菌株留作母种；（6）将母种扩大培养成原种和生产种；（7）进行出菇试验，经过初筛、复筛把出菇早、出菇均匀、粒大、菇形好、产量高的菌种筛选出来保留；（8）小面积试种，检验一致性和稳定性；（9）中试和区试；（10）新品种鉴定或审定，大面积推广应用。3 杂交育种杂交育种是指通过杂交使一个或几个亲本的染色体片段交换或重组而获得具有新的性状的新菌种。由于草菇是同宗配合的食用菌，因此，应用杂交育种法时只能运用多孢杂交进行育种。杂交育种法主要包括如下步骤：（1）单核菌丝的交配培养，将两个待杂交品种的担孢子分别制成适当浓度的孢子悬浮液
7、（一般为 100万个/mL），同时接入同一试管斜面，在 3540条件下恒温培养，两种孢子同时萌发（发生不同时萌发情况时可适当调整两个品种孢子的接入时间）。当它们的单核菌丝相遇时，即有可能进行杂交。当斜面上能看到极小的菌落时，及时将它们逐个挑出，转接到试管斜面培养。（2）检查有无锁状联合。待上述试管斜面菌丝长好后，分别挑取少许菌丝进行镜检，把无锁状联合的菌株淘汰，有锁状联合的菌株保留下来待测。（3）拮抗试验。把有锁状联合的菌株与亲本菌株一起作拮抗试验。如果待测菌株与亲本菌株有明显的拮抗线，则证明待测菌株是杂交菌株，可留作母种。（4）将母种扩大培养成原种和生产种。（5）进行出菇试验，经过初筛、复筛
8、,把出菇早、出菇均匀、粒大、菇形好，产量高的菌种筛选出来保留。（6）小面积试种，检验一致性和稳定性。（7）中试和区试。（8）新品种鉴定或审定，大面积推广应用。4 诱变育种诱变育种是利用某些理化因子诱导草菇遗传因子发生突变，再从多种突变体中选出正突变菌株的方法。诱变育种是获得优良食用菌菌株的常用手段。目前草菇诱变育种中最简单实用的是紫外线诱变育种法。紫外线诱变育种的一般过程是：孢子悬浮液的制备，一般要求悬浮液的孢子浓度为 10 000个/mL。诱变处理。可用 15 W的紫外灯在离待处理孢子的上方 30 cm处照射 0.55 min。孢子涂布。将照射后的孢子悬浮液用无菌水稀释至 1106万个/mL
9、，然后取稀释液涂平板，每个平板加入 0.10.2mL，均匀涂布。单菌落培养。将涂布后的平板封好置于 3540下恒温培养至平板上长出单菌落。挑取单菌落，当长出单菌落后，要及时将萌发早、生长快而健壮的单菌落挑取出来，移入试管斜面培养。初筛可育性菌株。按上述可育性菌株的培养特征，初筛出可育性菌株。拮抗试验。初筛出的可育性菌株与亲本菌株有明显拮抗作用的，则确定为变异菌株，保留下来做成母种。将母种扩大培养成原种和生产种。进行出菇试验，经过初筛、复筛,把出菇早、出菇均匀、粒大、菇形好，产量高的菌种筛选出来保留。（10）小面积试种，检验一致性和稳定性。（11）中试和区试。（12）新品种鉴定或审定，大面积推广应用。
