大鼠血清雌激素水平测定方法总结

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1、1、 酶联免疫吸附实验酶联免疫吸附实验(ELISA) 即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表 面进行的技术。该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等,具有快速、灵敏、简 便、载体易于标准化等优点。2、 放射免疫分析(英语:放射免疫分析(英语:radioimmunoassay,缩写为,缩写为 RIA) 简称放免或放免法,是一种在无须采用生物测定方法的情况下,用于检测抗原 (例如血清之中激素的水平)的实验室测定方法。这一方法是由罗莎琳萨斯曼耶洛和 Solomon Aaron Berson 于 1950 年代创建的。 通过抽取的少量血液或病人标本,利用放射性核素标记的

2、抗原和未标记的抗原 (两者的免疫原性相同)对专一抗体的竞争性相结合反应,来分析测定体内抗原的含 量。放射免疫分析法具有灵敏性高(可达 1012g10-15g) 。3 3、免疫荧光法(、免疫荧光法(免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )FIA)是标记免疫技术中发展最早的一种。用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。主要缺点是:非特异性染色问题尚未完全解决,结果判定的客观性不足,技术程序也还比较复杂。4、化学发光免疫分析(化学发光免疫分析(CLIA)亦称化学发光标记免疫测定,是用化学发光剂直接标

3、记抗原或抗体(化学发光剂标记物) ,与待测标本中相应抗体或抗原、磁颗粒性的抗原或抗体反应,通过磁场把结合状态(沉淀部分)和游离状态的化学发光剂标记物分离开来,然后加入发光促进剂进行发光反应,通过对发光强度的检测进行定量或定性检测。5、时间分辨荧光分析法也叫时间分辨荧光免疫分析(时间分辨荧光分析法也叫时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay, TRFIA)是以具有独特荧光特性的镧系元素及其螯合剂作为示踪物,建立的一种新型的非放射性微量分析技术。自从 1983 年 Pettersson 等采用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)法定量测定 hCG 以来,T

4、RFIA 方法学研究和临床应用发展迅速,成为继RIA 之后标记免疫分析发展的一个新的里程碑,国内外相继研制了多种 TRFIA 仪和配套的商品化试剂盒。是近十年发展起来的非同位素免疫分析技术,是目前最灵敏的微量分析技术,其灵敏度高达 10(-12)g/ml,较放射免疫分析(RIA)高出 3 个数量级。它用镧系元素标记抗原或抗体,根据镧系元素螯合物的发光特点,用时间分辨技术测量荧光,同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨,可有效地排除非特异荧光的干扰,极大地提高了分析灵敏度。由于其高灵敏度,在临床上得到了广泛的应用,逐渐代替了放射免疫分析。缺点是缺点是 E2E2 的线性浓度范围为的线性浓度范围为 2.5-200pg/ml.2.5-200pg/ml.?正常正常值值检测方法 检测范围常规免疫 mgg(10-3 10-6 g)荧光免疫,酶免疫 gng(10-6 10-9 g)放射免疫,发光免疫 ngpg(10-9 10-12 g)PCR pgfg(10-12 10-15 g)这些正常检测范围等没有统一的说法,但可以肯定的是 TRFIA 最优。最优。

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