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1、 测脉动，奥必佳，佳得乐对离体蟾蜍测脉动，奥必佳，佳得乐对离体蟾蜍 心脏活动的影响心脏活动的影响【目的目的】 学习 Straub 氏法灌流蟾蜍离体心脏方 法；了解心肌的生理特性；并观察各种功能饮品 等因素对心脏活动的影响。 【原理原理】 作为蛙心起搏点的静脉窦能按一定节 律自动产生兴奋，因此，只要将离体的蛙心保持 在适宜的环境中，在一定时间内仍能产生节律性 兴奋和收缩活动。心脏正常的节律性活动需要一 个适宜的理化环境，离体心脏也是如此，离体心 脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接 影响，可以通过改变灌流液的某些成分，观察其 对心脏活动的作用 【预习要求预习要求】 1仪器设备知识:参见第二
2、章第三节 RM6240 微机生物信号采集处理系统。 2实验理论:实验动物知识参见第二章第一 节 生理科学实验常用实验动物的种类和第四章 第一节 动物实验的基本操作；统计学知识参见 第五章第四节 常用统计指标和方法；实验理论 知识参见生理学教材中有关心脏的生物电及心肌的生理特性、自主神经系统对心血管活动的调节 内容。检索全文数据库中的相关研究论文，检索 方法参见第五章第五节。 3预绘制实验原始数据记录表格和统计表 格（参考实验指导 P81-82） 。 4预测结果：预测脉动、佳得乐、奥必佳 对离体蟾蜍心脏活动的影响。 【材料材料】 牛蛙；RM6240BD 微机生物信号处理系 统，张力换能器；蛙心套
3、管（straub） ，常用手 术器械，蛙板或蜡盘，蛙心夹，滴管，培养皿或 小烧杯，污物缸，纱布，橡皮泥，任氏液，无钙 任氏液 【方法方法】 1仪器连接和参数设置 张力换能器输出线接微机生物信号处理系统 第 1 通道（亦可选择其它通道） ， 微机生物信号 处理系统参数设置： RM6240 系统：点击“实验”菜单，选择“生 理科学实验中”的“蛙心灌流”项目。系统进入 该实验信号记录状态。仪器参数：通道时间常数 为直流，滤波频率 10Hz，灵敏度 3g，采样频率 400Hz，扫描速度 1s/div。2离体蛙心制备 （1）取蟾蜍一只，破坏脑和脊髓后，仰卧固定 在蛙板上，从剑突下将胸部皮肤向上剪开，然后
4、 剪掉胸骨，打开心包，暴露心脏，分离左、右主 动脉。 （2）在左主动脉下方穿 1 根线，靠头端结扎作 插管时牵引用，在主动脉干下方穿 1 根线，在动 脉圆锥上方系一松结用于结扎固定蛙心插管。 （3）左手持左主动脉上方的结扎线，用眼科剪 在松结上方左主动脉根部剪一小斜口，右手蛙心 插管由此切口处插入动脉圆锥。当插管头到达动 脉圆锥时，用镊子夹住动脉圆锥少许，将插管稍 稍后退，并转向心室中央方向，镊子向插管的平 行方向提拉，心室收缩期时将插管插入心室（如 图 1） 。蛙心插管进入心室后管内的任氏液的液面 会随心室的舒缩而上下波动。蛙心插管进入心室 后，用预先准备好的松结扎紧，扎线套在蛙心插 管的侧
5、钩上打结并固定。剪断主动脉左右分支。好的松结扎紧，扎线套在蛙心插管的侧钩上打结 并固定。剪断主动脉左右分支。 图 1 蛙心插管示意图 （4）轻轻提起蛙心插管以抬高心脏，用一线在 静脉窦与腔静脉交界处作一结扎，结扎线应尽量 下压，以免伤及静脉窦，在结扎线外侧剪断所有 组织，将蛙心游离出来。 （5）用新鲜任氏液反复换洗蛙心插管内含血的 任氏液，直至蛙心插管内无血液残留为止。此时 离体蛙心已制备成功，可供实验。 （6）将蛙心插管固定在铁支架上，用蛙心夹在 心室舒张期夹住心尖，并将蛙心夹的线头通过滑 轮连至张力换能器的应变梁上，调节此线张力至 1g，插管内加灌流约 11.5ml，并在插管上标记 灌流的
6、高度，在此后的实验过程中，灌流液恒定 于该高度。 【模拟实验操作方法】 1模拟实验窗口（图 2） 蛙心插管内为任氏液，下端左侧为放水管，正下方是离体蟾蜍心 脏，其心室尖部用蛙心夹夹住，蛙心夹上棉线与 张力换能器相连（图中略去） 。蛙心插管上方滴 头处为加药、冲洗之处。 2离体蛙心 蛙心活动频率和幅度用动画展现， 并与仿真记录仪记录的曲线同步。 3仿真二道记录仪 第一道记录离体蛙心收缩 曲线，第二道记录实验项目标记。仿真记录仪面 板设灵敏度、位移、纸速、停纸按钮，面板设数 字显示框，分别显示记录仪第一道灵敏度、心肌 收缩力量、实验项目、实验时间。 4试剂架 试剂架上放置试剂，滴头可拖动， 鼠标器
7、左键点击某一药品或试剂瓶的滴头并拖动 至蛙心插管上方滴头处释放完成灌流液的更换或 药品的滴加，仿真记录仪上显示曲线数据、标注 实验内容。 5窗口内容和可操作控件均有提示，窗口提示 栏右侧设置“返回”按钮，鼠标点击“返回”按 钮，程序返回到模拟实验窗口。 图 2 离子与药物对离体蟾蜍心脏活动的影响模 拟实验窗口【观察项目】 1描记正常的蛙心搏动曲线，注意观察心跳频 率、心室的收缩和舒张程度。 2把蛙心插管内的任氏液全部更换为脉动溶液， 做好标记，观察心博变化。待曲线出现明显变化 时，立即吸取套管中的灌流液，同时做好标记； 并用新鲜任氏液清洗 2-3 次，待心搏恢复正常。 注意：换液时切勿碰套管，
8、以免影响描记曲线基 线，同时保持液面的高度一致。 3向套管内加入 2-6 滴脉动溶液，做好标记， 观察心博曲线的频率与振幅变化。当曲线明显变 化时，立即吸取套管中的灌流液，并做好标记， 迅速用壬氏液清洗 2-3 次，待心博恢复正常。 4同法向套管滴加奥必佳溶液 12 滴，观察并 记录心搏变化。当曲线明显变化时，立即吸取套 管中的灌流液，并做好标记，迅速用壬氏液清洗 2-3 次，待心博恢复正常。 5同法向套管滴加佳得乐溶液 12 滴，观察并 记录心搏变化。当曲线明显变化时，立即吸取套 管中的灌流液，并做好标记，迅速用壬氏液清洗2-3 次，待心博恢复正常。 【实验报告】 1题目。 2署名 作者和合作者姓名及单位。 3结构式摘要（目的，方法，结果，结论） 。 4材料和方法 主要实验材料，离体蛙心标本 制备方法简要，仪器装置连接和仪器参数， 5观察项目及观察指标，填写实验指导 81-82 表格。 6结果 列各项处理前后心率、心室的收缩和 舒张张力原始数据表格，用文字和数据逐一描述 实验结果。 7讨论 对实验结果进行分析推理。 8参考文献。
