定量检测系统分析性能及评价方法

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1、定量检测系统分析性能定量检测系统分析性能 及评价方法及评价方法广东省中医院广东省中医院 广州中医药大学第二附属医院广州中医药大学第二附属医院 徐建华徐建华Why to do？文控体系文控体系要求要求 科研平台科研平台要求要求1 1 引言引言 2 2 标准的范围标准的范围、引用文件引用文件 3 3 术语和定义术语和定义 4 4 管理要素管理要素 5 5 技术要素技术要素 附录附录文件的核心文件的核心，CNAS 根据各专业特性根据各专业特性，编编 写了应用说明写了应用说明。ISO 15189ISO 15189医学实验室质量和能力认可准则在临床生物化学检验领域 的应用说明（CNAS-CL29）（包含

2、检测系统分析性能验证相关内容）ISO15189ISO15189-技术要素技术要素5.1 5.1 人员人员5.2 5.2 设施和环境条件设施和环境条件5.3 5.3 实验室设备实验室设备5.4 5.4 检验前程序检验前程序5.5 5.5 检验程序检验程序5.6 5.6 检验程序的质量保证检验程序的质量保证5.7 5.7 检验后程序检验后程序5.8 5.8 结果报告结果报告需对检测系统的需对检测系统的 分析性能进行验证分析性能进行验证 和比对实验和比对实验。主要指标主要指标仪器校准仪器校准精密度精密度（EP5EP5- -A2A2，EP15EP15- -A2A2）正确度正确度（EP15EP15- -

3、A2, EP9A2, EP9- -A2A2）分析测量范围分析测量范围/ /临床可报告范围临床可报告范围 （EP6EP6- -A A）分析灵敏度分析灵敏度（EP17EP17- -A A）分析特异性分析特异性/ /分析干扰分析干扰（EP7EP7- -A2)A2)参考范围参考范围/ /生物参考区间生物参考区间(C28(C28- -A3)A3)携带污染携带污染1.六大分析性能六大分析性能 之之 CLSI 系列文件解读系列文件解读 （实验方案实验方案）EP5-A2 EP15-A2 EP9-A2 EP6 - A EP17 - A EP7 - A2 C28 - A3How to do？资料学习资料学习仪器全

4、面校准仪器全面校准1.1.工作环境及仪器状态检测工作环境及仪器状态检测。 2.2.零点漂移零点漂移、杂散光杂散光、吸光度线性范围吸光度线性范围、准确性准确性、 稳定性稳定性、重复性重复性。 3.3.样品携带污染率样品携带污染率、试剂系统携带污染率试剂系统携带污染率。 4.4.加样系统准确度与重复性加样系统准确度与重复性。 5.5.孵育池温度准确度及波动孵育池温度准确度及波动。 6.6.试剂舱温度检测试剂舱温度检测。详细操作参考各仪器公司相关详细操作参考各仪器公司相关SOP文件进行文件进行。精密度评价实验精密度评价实验1.传统方法传统方法2. EP15-A23. EP5-A2精密度评价方法精密度

5、评价方法1 1-传统方法传统方法（稳定样本多次测量稳定样本多次测量）方方 案案：1. 批内不精密度批内不精密度 在一批内重复测量在一批内重复测量20次次。2. 日间不精密度日间不精密度 每天测量每天测量1次次，连续多次测定连续多次测定（按月汇总按月汇总）。）。缺缺 陷陷： 批内不精密度是在一个很短实验时间的抽样批内不精密度是在一个很短实验时间的抽样，不能代表真正的批内不不能代表真正的批内不 精密度精密度。日间不精密度通常被不正确的称作总的不精密度日间不精密度通常被不正确的称作总的不精密度，而它本身并未将而它本身并未将 批内和批间不精密度区分开来批内和批间不精密度区分开来，因此只是代表性稍差的总

6、不精密度因此只是代表性稍差的总不精密度。精密度评价方法精密度评价方法2 2-EP15EP15- -A2A2实验方案实验方案： 1.步骤步骤 选择低值和高值两个浓度水平的质控品选择低值和高值两个浓度水平的质控品，实验实验 持续持续5天天，每天每个水平重复测定每天每个水平重复测定3次次，记录实验记录实验 结果结果。2. 统计分析统计分析 分别计算分别计算 Swithin和和Stotal（用户测定的批内标准差和总用户测定的批内标准差和总 标准差标准差），），与厂商声明的与厂商声明的within和和total比较比较。3. 结果分析结果分析 如果如果S withinwithin，有可能这种差异无统计学

7、意义有可能这种差异无统计学意义，需要进行验需要进行验 证证，若若S within 小于验证值小于验证值，厂商声明的批内精密度通过验证厂商声明的批内精密度通过验证。 S total与与 total结果分析同上结果分析同上。举例举例1 1：NTNT- -proBNPproBNP 精密度验证结果精密度验证结果（EP15EP15- -A2A2）10.1110.1210.1310.1410.15质控品质控品1举例举例2 2：强生干化学分析仪常用生化指标强生干化学分析仪常用生化指标 精密度验证结果精密度验证结果（EP15EP15- -A2A2）尿素高值水平未能通过验证，主要为干片更换批号未及时发现， 导致

8、日间精密度较差所致。经纠正后，重做实验，结果显示：Swithin 为0.08，Stotal为0.25，通过验证。精密度精密度评价方法评价方法3 3- -EP5EP5- -A2A2方案方案：2 22 22020的实验方案的实验方案，即每天检测即每天检测2 2批批，每批每批 重复重复2 2次次，共进行共进行2020天天获得获得8080个有效数据个有效数据。方案同时提供了较直观实用的实验方案同时提供了较直观实用的实验记录表格记录表格， 数据通过简单计算就能得到数据通过简单计算就能得到批内批内、批间批间、天间以天间以 及总不精密度及总不精密度。EP5-A2-精密度评价精密度评价1.重复性重复性（批内批

9、内）评价评价（run） 公式公式：EP5-A2-精密度评价精密度评价run and runEP5-A2-精密度评价精密度评价day and dayEP5-A2-精密度评价精密度评价或总不精密度或总不精密度TotalTotalEP5-A2-判断标准判断标准结果与厂家性能要求或其它性能标准的比较结果与厂家性能要求或其它性能标准的比较采用检验来判断是否可以接受。2EP5-A2-应用举例应用举例罗氏罗氏 Modular PPI Modular PPI 检测血清检测血清ALTALT为例为例采用采用正常值质控品正常值质控品（PNUPNU），），每天分每天分2 2 批检测批检测，每批重复检测每批重复检测2

10、2次次，共进行共进行2020天天。经经离群值检验离群值检验后未发现离群值后未发现离群值。具体结果统计见具体结果统计见附表附表。EP5-A2应用举例应用举例EP5-A2应用举例应用举例EP5-A2应用举例应用举例EP5-A2应用举例应用举例正确度评价实验正确度评价实验1. EP9-A22.EP15-A23.简易比对简易比对常用的正确度评价方案常用的正确度评价方案1. 1.方法学比对方法学比对（EP9EP9- -A2A2，EP15EP15- -A2A2，简易比对简易比对）2. 2.权威机构室间质控品权威机构室间质控品（CAPCAP、临检中心临检中心）3. 3.标准物质标准物质（NISTNIST标物

11、标物）4. 4.定值的定值的质控品或质控品或不同批号不同批号校准品校准品5. 5.与与参考方法参考方法测定结果比较测定结果比较EP9-A2，EP15-A2，简易比对简易比对熟悉仪器熟悉仪器，样本制备样本制备，检测检测数据收集数据收集同一方法内重复测定值的离群值检验同一方法内重复测定值的离群值检验绘制绘制Y-X散点图和散点图和（Y-X）-X偏差图偏差图目测线性检查目测线性检查目测方法间的离群值检查目测方法间的离群值检查足够分布范围检查足够分布范围检查计算回归方程计算回归方程目测散点图的一致性检查目测散点图的一致性检查使用线性回归程序使用线性回归程序计算平均和最大偏倚的估计值并与计算平均和最大偏倚

12、的估计值并与 厂商声明的性能或内部标准比较厂商声明的性能或内部标准比较若可能若可能，删除非线性点删除非线性点剩余的范围是否足够剩余的范围是否足够调查调查增加数据增加数据，延伸分布范围延伸分布范围使用部分偏倚程序使用部分偏倚程序使用部分残差程序使用部分残差程序调查调查是是否否不好不好是是不好不好超过一个离群值超过一个离群值r20.95否否好好少于一个离群值少于一个离群值r20.95EP9-A2比对流程图比对流程图EP9-A2 分析物浓度分布要求分析物浓度分布要求EP9-A2实验实验方案方案：1. 1. 每天每天8 8个样本个样本，每个样本分别在每个系统上重复测每个样本分别在每个系统上重复测 两次

13、两次，做做5 5天天共共4040个样本个样本。2. 2. 样样本按本按1 1、2 2、3 3、4 4、5 5、6 6、7 7、8 8顺序顺序测第一次测第一次，然然 后后按反顺序测第二次按反顺序测第二次。3. 3. 每个系统得每个系统得4040对数据对数据，共获得共获得160160个数据个数据。EP9EP9- -A2A2 实验数据的收集、处理和应用1.检查每一方法内双份测定有无离群值。以4倍的差值均值为判断限，同方法内的成对差值都 应在限值内。2.线性回归方程： =bX +ab和a分别表示两种方法间的比例误差和恒定误差。可在各临床医学决定水平浓度（Xc）处，了解待评方 法相对于目标方法的系统误差

14、（SE）。3. 作X、Y散点图和X、（X-Y）偏差图，了解有无线性 关系或明显离群点(附图）。4.检查分析物浓度分布是否适当。与r相关的因素：A. 实验点和回归线的离散程度B. 分析物浓度分布情况，一般要求 r0.975或r20.95，认为X范围是合 适的 (附图)。EP9EP9- -A2A2 实验数据的收集、处理和应用EP9EP9- -A2 A2 应用举例应用举例 （强生干化学与强生干化学与Roche Modular PPI Roche Modular PPI 比对比对- -K K+ +）VITROS FS 5.1 对ROCHE Modular 单个结果散点图y = 1.0049x - 0.

15、0818 R2 = 0.9890.002.004.006.008.0002468 ROCHE Modular PPIVITROS FS 5.1VITROS FS 5.1 均值对ROCHE Modular 均值散点图y = 1.0049x - 0.0818 R2 = 0.98970246802468ROCHE Modular PPIVITROS FS 5.1（单个待评方法结果单个待评方法结果-单个目标方法结果单个目标方法结果）对对(待评待评 方法均值方法均值+目标方法均值目标方法均值）/2（待评方法均值待评方法均值-目标方法均值目标方法均值）对对(待评方法均值待评方法均值+ 目标方法均值目标方法均值）/2EP9-A2 应用举例应用举例比对方案比对方案2 2-EP15EP15- -A2A2用户对精密度和正确度性能的核实试验用户对精密度和正确度性能的核实试验批准指南批准指南方案：每天5个样本，连续4天，共20个样本，20个数据。（标本检测和浓度分布范围同EP9-A2）EP15-A2 应用举例应用举例简易比对方案简易比对方案 （5 5个不同浓度标本个不同浓度标本）CNASCNAS-规范性附录规范性附录：实验室内分析系统比对：1.样本要求：5个样本，覆盖测量范围，包括医学决定水平。2.判断标准： 测量结果偏倚1/2 CLIA88允许总误差（允许有一个 结果偏倚超出