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1、黑龙江八一农垦大学硕士学位论文绿豆轮纹病菌毒素及药剂防治的研究姓名：张海燕申请学位级别：硕士专业：植物病理学指导教师：辛惠普2003.6.1堡呈竺塾堕堕量鲞墨堑型堕塑塑受壅 文献综述 绿豆具有广泛的用途，被誉为粮食中的绿色珍珠，既是调节饮食的佳品， 又是食品工业和酿酒工业的重要原料之，也是重要的药材。近年来随着栽培 面积不断扩大，发生病害种类达2 0 余种，并已遍布全国各地，其中以轮纹病 发生普遍，为害严重，导致植株早枯落叶降低产量和品质。 l 绿豆轮纹病及A s c o c h y t a 引致病害的研究 1 I 绿豆轮纹病的症状 该病在绿豆苗期成株期均可发生，可侵染叶片，茎秆，豆荚，籽粒。
2、 苗期：病菌侵染种子随种子越冬，第二年苗期，在子叶上就会出现病斑， 常导致幼苗萎蔫枯死，病斑呈圆形，红褐色。 成株期：主要为害叶片、茎杆、豆荚、籽粒。 叶片：病斑近圆形，直径2 2 5 m m ，褐色，边缘红褐色，具有明显的同心 轮纹，容易破裂以后病斑上轮生或散生小黑点即分生孢子器。发病严重时， 叶片早期脱落，影响产量( 图版1 ) 。 茎杆：病斑呈褐色，不缢缩，没有同心轮纹，一般不产生分生孢子器。 豆荚：病斑近圆形或不定形，褐色或灰褐色，有不清晰轮纹，其上可生小黑点。 籽粒：轻微发病的籽粒变成红褐色，表皮皱缩有白色霉层，发病重的籽 粒变成黑褐色，严重皱缩，有白色霉层，不发芽。 1 2 绿豆轮
3、纹病的病原学1 2 1Ap h a s e o l o r H m 的分类地位及形态特征 据报道【1 1 4 1 1 5 l 绿豆轮纹病的病原菌为A s c o c h y t a p h a s e o l o r u mS a c c ，属半知 菌亚f - J ( D e u t e r o m y c o t i n a ) 腔胞纲( C o e l o m y c e t e s ) 球壳孢目( S p h a e r o p s i d a l e s ) 壳二 孢属( A s e o e h y t a ) 。 分生孢予器在病部上散生或聚生。初埋生后突破表皮，球形、扁球形，直 径8
4、 0 1 4 0 ( 1 am ) ，具圆形孔口，孔口处胞壁加厚，深褐色，器壁膜质，由2 3 层细胞组成。壁厚I l ( u m ) 。淡褐色( 图版2 ) 。 产孢细胞内壁芽生瓶梗式( e b p h ) 产孢。单细胞，无色，瓶状，大小5 7 1 5 之( | l m ) 。 分生孢子圊柱形，两端钝圆，无色，初为单胞，成熟后中央生一隔膜，分 隔处无缢缩或有缢缩，直或微弯。大小8 1 1x 2 5 3 5 ( “m ) ，有时具一油球。 1 2 2 且p h a s e o i o r u m 寄主范围 据自金铠【4 】等报道，病菌除侵染小豆、绿豆外，还能侵染菜豆、花生、芸 豆、豇豆、蚕豆和杂
5、草等。 1 2 3 A o h a s e o l o r u m 生物学特性 研究结果表明【7 】小豆壳二孢菌( A s c o c h y t a p h a s e o l o r u mS a c c ) 在2 “ C 3 3黑龙江八农垦大学硕士学位论文均可生长，最适生长温度为2 5 ；1 5 3 0 可以产生分生孢子，最适产孢 温度为2 5 ：菌丝生长p H 值范围为3 2 8 9 8 1 ；绿豆轮纹病菌可以利用多种 碳源和氮源，其中菌丝生长以甘露醇最好，最适产孢碳源为麦芽糖，而甘露醇 和鼠李糖不产孢：有机氮中病菌最易利用天门冬氨酸，谷氨酸最差，无机氮中 酒石酸铵最适合菌丝生长，C
6、a ( N 0 3 ) 2 生长最差：病菌可在液体培养基中生长， 以在W o l f i e 中生长最快。在S a c h 和B e i j e r i n c k 上生长最慢：病菌可利用多种 天然培养基，在胡萝卜、油菜、西瓜、燕麦、菠菜培养基上生长较快，在利马 豆上生长最慢，而在番茄和燕麦培养基上产器最多：在供试的微量元素中，锰 和锌抑制菌丝的生长：锌和三价铁有利于分生孢子器的产生；矿质元素中，缺 钾或镁菌丝生长较差。 分生孢子在5 3 5 均可萌发，萌发最适温度为2 5 。黑暗和通气均有 利于孢子萌发。分生孢子在葡萄糖中萌发率最高。分生孢子在水滴中比在相对 湿度小于1 0 0 的环境中萌发
7、快，而在相对湿度低于8 7 时，孢子不能萌发。分生孢子在p H 2 2 7 0 均可萌发，最适p H 3 5 0 。1 3A s e o e h y t a 引致病害的侵染循环 A s c o c h y t a p h a s e o l o r u m 以分生孢子器随病残体越冬，也可随种子越冬，第 二年释放出分生孢予成为初侵染菌源，以后借病斑上产生的分生孢子进行重复 侵染，扩大蔓延。绿豆种子上带菌如不进行种子处理，出苗后在予叶上就出 现病斑。轮纹病一般多在生育后期发病个别地块发病严重，对生育和产量影响颇大【”。 俞孕珍等于1 9 8 4 年对A s c o c h y t as p ，进行
8、越冬试验，将田间采集的病叶装 入纱网中，置于室外树上、地表、地下5 e m 、地下1 0 c m 及2 0 e r a 处越冬，分 别于翌年4 月中旬取回，对其进行萌发力及致病力的测定。结果表明经田间越 冬后的分生孢子的萌发率较室内越冬的明显下降，最高仅达4 5 1 ，而室内的 则高达9 2 4 ：和室内越冬菌源相比，田间越冬菌源在致病力上也明显降低， 最高仅为3 2 7 ，而室内越冬的不论是以器孢子接种的还是接菌悬液的，发病 率均在8 0 以上。由此作者得出结论，该病菌能以分生孢子器在田问病叶内 越冬，成为第二年的发病初侵染来源I 驯。 I AA s c o c h y t as p p 毒
9、素的研究现状 A s c o c h y t a 很多种都能产生毒素，种类较多最基本的是壳二孢素。1 4 1A s c o c h y t ac h r y s a n t h e m i 毒素和性质A s c o c h y t ac h r y s a n t h e m i 产生毒素【3 6 1 的稀释终点是l ：l o o l ：1 0 0 0 ，在4 培养滤液或部分纯化滤液可储存3 年，煮沸或加热会破坏其毒性，但高压灭 菌不破坏该毒素，该毒素不溶于有机溶剂，但可被活性炭吸附并可保留在 D E A E - 纤维素中( p H 8 0 ) ，在6 6 的甲醇中不沉淀。1 4 2AC a
10、u l i n a 毒素及性质绿豆轮纹病菌毒素及药剂防治的研究A s c a u l i t o x i n ，J 是由A c a u l i n a 产生的，该菌侵染藜，可以用作防治藜的生 防菌。这种毒素是亲水性的，分子量小于1 0 0 0 ，是含氨基酸的葡萄糖苷。此 菌同时还可以侵染甜菜、年蓬、苍耳、西风古等在生产中可用作真菌除草剂。1 4 3A h y a l o s p o r a 毒素及性质 A h y a l o s p o r a 可产生壳二孢素、P y r e n o l i d e 和H y a l o p y r o n e 3 种真菌毒素。 这3 种毒素均可使藜叶片的电解
11、质外渗率增加，可抑制大多数真菌和细菌的生 长，也对高粱根的生长起抑制作用。其中A s c o e h y t i n e 对A g r o b a c t e r i u m t u m e f a c i e n s ，C o r y n e b a c t e r i u mf l a c c u m f a c i n e s 和C o l l e t o t r i c b u ma c u t a t u m 有 强烈的抑制作用，而不抑制西w 加缸c a r o t o v o r a ，A s p e r g i l l u st Z a v u s P e n i c i l l
12、 i u m n o t a t u m 的生长。而P y r e n o l i d eA 只对C o r y n e b a c t e r i u mf l a c c u m f a c i e n s ，P e n i c i l l i u mn o t a t u m 和C o l l e t o t r i c b u ma c u t a t u m 有抑制作用；H y a l o p y r o n e 则可抑制C o r y n e b a c t e r i u mf l a c c u r n f a c i e n s 和上述所有真菌的生长，只有西w 加缸 c a
13、r o t o v o r a 不被任何一种代谢物所抑制u8 。 1 4 A 本属其他种的产毒情况 0 k u 和N a k a n i s h J 3 9 1 从蚕豆壳二孢( A f a b a e ) 的培养滤液中获得 a s e o e h i t i n e 结晶，B e r t i n i 从豌豆壳二孢( A p i s i ) 中获得同样的毒素晶体：S u s u k ie ta l t 4 0 1 从不全壳二孢( 彳i m p e r f e c t a ) 的培养滤液中分离纯化出d e c u m b e n s ， 它与斜卧青霉( P + d e c u m b e n s
14、) 产生的一种毒素相同：T a m u r a 从蚕豆壳二孢 ( 一v i c i a e ) 的培养滤液中分离纯化出a s c o c h l o r m ；S a s a k i 从同样的菌株中分 离纯化出a s c o f u r a n o n e l 4 1 。 1 S 病害防治 1 5 1 绿豆轮纹病的防治 1 5 1 1 采用轮作制度 发病严重地块应与玉米、小麦、高粱、谷子等禾本科作物进行2 年以上轮作。 1 S 1 2 消灭越冬菌源 秋收后及时秋翻地，将病残体深埋土里；收集病叶、病株烧毁，以减少侵染来源 3 1 。 1 5 1 3 药剂防治据c L B h a r d w a
15、j 【4 2 l 报道，单用7 5 代森锰锌W p4 0 0 倍液或5 0 多菌灵 W p l0 0 0 倍液或8 0 敌菌丹W p4 0 0 倍液均可有效防治轮纹病，并提高绿豆产 量。他还指出这3 种杀菌剂配合使用，将显著增产。 1 5 1 4 选用抗病品种1 5 2A s c o c h y t as p p 引致病害的防治 本属病害的防治方法有选用抗病品种，种植无病种子，与其他作物轮作墨苎堑丛二窒呈丕主堡主兰些堡塞等，但最重要的是化学防治，主要防治方法有：G u r d i ps i n g ha n dM a n i n d e rs i r I g h 1 报道，应用5 0 多菌灵w
16、 p + 5 0 福美 双W p ( 1 ：1 或1 ：3 ) 混剂3 克，处理种子1 0 0 克，可有效地消除种子上的病菌； 用百菌清6 m l 或涕必灵5 克，处理1 0 0 0 克种子，杀菌效果也好。叶面喷雾用 百菌清15 0 0 m l h a 、l a e x c a p 4 e g h a 或十三吗啉9 0 0 9 h a 兑3 0 0 升水喷洒叶面，防 效优于其它杀菌剂。W a r k e n t i nT D H 53 曾报道，用百菌清或多菌灵从始花期 开始，以后每隔1 0 天喷药1 次，处理分为1 次、2 次、3 次，对降低豌豆褐斑 病( 4 p ) 病情，提高豌豆千粒重和产量很有效，尤其3 次用药效果最好 可增产3 3 。 另据R a mS i n g h 和M a h e n d r aP a l 1
