《自拟中药复方制剂对畜禽肠道腹泻病原菌的体外抑菌试验 (论文)》由会员分享，可在线阅读，更多相关《自拟中药复方制剂对畜禽肠道腹泻病原菌的体外抑菌试验 (论文)（5页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、物主要 以抗生素为主 ，但近些年来 ，很 多病原 微 生物产生耐药性 ，给动物疫病 防控及 畜产品 安全和质量带来极大影响。因此现代畜牧养殖 业迫切需要寻找一类能代替抗生素的中药制剂 来治疗和防控畜禽的细菌性疾病。中药大多为 天然绿色植物、动物体组织和矿物质等。以其 资源丰富 、成本低廉 、高效低毒 ，且在 治疗疾 病方面有着一定的优势，因此用中草药防治畜 禽疾病已成为近年来研究的热点 。鉴于此 ， 研究用中药制剂代替抗生素来治疗细菌性疾病 具有重大 意义 ，近年来 已有很多关于 中草药抑 菌方面的研究 ，且已筛选出许多具有抑菌作用 的中草药5 1 。本试验通 过最小 抑菌 浓度( MI C
2、) 试验 ，确证I临床分离的畜禽腹泻病原菌对二种 中药复方制剂 的抗性 ，通 过最小抑 菌浓度试验 比较不同中药组方对畜禽肠道腹泻病原菌的抑 制作用，为抗细菌中药制剂的研究和临床应用 收稿 日期 ： 2 0 1 3 1 0 2 1 基金项目： 甘肃省农业科技专项农业科技示范基地建设项目 “ 抗畜禽传染病中草药研究开发” ( 0 6 2 3 0 0 6 ) 作者简介： 寇晓晶( 1 9 8 5 一 ) ， 女， 甘肃兰州人， 兽医硕士。 通讯作者 ： 刘磊 ， 教授 ， E ma i l ： l iu l e i g s 1 6 3 t o m 扶正止泻散基础方( 组) 所需的黄连 、五倍 子
3、、诃子等 以及在基础方上添加 了免疫增强剂 的扶正止泻散 ( I 组)所增加的黄芩、炒白术等 中药均购于 自甘肃省兰州市安泰堂药店 ，所有 药物经检定符合生药质量标准 。菌种来 自所采 猪场的腹泻猪病料( 4 0株)及微生物实验室提 供 的采 自鸡 、猪 、驴 、牛及羊 的肠道腹泻菌 ( 1 0株) 。对病料菌种进行编号 ，通过细菌分离 培养，根据菌株在三糖铁及伊红美兰平板上的 生长 特性 ，其 中 4株 菌 判定 为 沙 门 氏菌( 9 、 l 5 、3 6 、3 9 号) ，其余各株菌判定为大肠杆菌。 1 2 仪器与试剂 电子调节万用 电炉( 北京 科伟永兴仪器有 限公 司 ，2 2 0
4、V AC ，01 0 0 0 w) ，高压锅 ，电 子天平 ( 5 O O g O 1 g ，常熟市百灵天平仪器有限公 司) ，电热恒 温水浴锅( 永兴 昌医疗器 械厂)， 高速离心机，电热恒温培养箱 ( 上海市跃进医 疗器械一厂) ，p H试纸 ( 5 5 9 0 ，上海三爱思 试剂有限公司) ，移液枪、打孔器等。 蛋白胨、牛肉膏、琼脂粉 ( 北京奥博星生 物技术有限责任公司) ；磷酸氢二钾 ( 天津市致 远化学试剂有限公 司) ；氯化钠( 天津开发 区海 试 验 研 究 试 验 研 究 抑菌圈直径2 0 m m为极敏，1 5 l 9 m m为高敏 ， 1 0 1 4 mm为中敏 ，1 0
5、mm以下为低敏。 兽 五帮东志 1 6 最 小抑菌浓 度f MI C ) 测定 在实验 叶 l 陔 注意到由于 中药煎液的色泽对观察结果的 响 在不影响实验条件与结果 的前提 下 ，本 实验埘 M I C检测方 法进 行 了改进 。采用琼脂平板 验证 法来验证细菌在中药作用后能甭在平板上生长 即将选取不 同浓度 中药 与受 试细菌作 川后 ，冉 分别接 种到普 通平 板培养基 二 ，通过观察填住 培养 基上的生 长情况进 而进 行最小抑蔺浓度 的 判定1 9 1 。在普通琼脂平板上 划分 1 0份 ，分刖将 培养 2 4 h的培养 液用无 菌接 种环在 其上 划线 ， 放于 3 7 恒温箱 中
6、培 养 2 4 h ，观察细 菌生长情 况 ，记录 MI C值。以上操作均严格无菌 、 1 7 试验数据 的处理将试验 所得 中药复 方最 小抑菌浓度( M I C )值用 D P S软件做 差分析 ， 比较不 同复方抑菌作用的影响 ，用字 母标 已 法 表示结果 2结果和 分析 2 1 体外药物敏感试验 I 组对 菌种 的体外抑菌试验结果见表 结 果分析表明 ， I组对所有分离菌中的 l 5株 菌的 抑 菌作用好 ，抑菌 圈直径 的大 ， J 、 在 2 0 0 ra m 以 表 1 l 组 体 外 药 物 敏 感 试 验 结 果 单 位 ：mm 洼 ：表 中数据为平均值 标准差 二 ；对所
7、有 分离菌 中 的 1 4株菌 的抑 菌作用 最 差，抑菌圈直径的大小在 1 9 1 m m以下 ( 表 1 ) 。 组对菌种的体外抑菌试验结果见表 2 。结 果分析表 明 组对所有分离菌 中的 5株 菌的抑 菌作用好 ，其抑菌 圈直径 的大小 在 2 0 0 ram 以 上，对所有分离菌中的 2 l 株菌的抑菌作用最 差 ，抑菌圈直径 的大小在 1 9 1 m m以下( 表 2 ) 。 2 2 自拟中草药复方制剂的抑菌效果 2 2 1 两中草药复方制剂的最小抑菌浓度 I 组对菌种 的最小抑 菌浓度试验结果 见表 3 。结果分析表明 ， I组对所有 5 0株 菌中的 1 4 株菌抑菌效果好 ，
8、最小抑菌浓度低于 0 2 3 9 g m 1 ，对所有 菌株菌 中的 6株菌抑菌效果最差 ，最 小抑菌浓度高于 0 2 7 3 g m L ( 表 3 ) 、 ， r 兽 甚珲 2 o 1 4 g 1 期 ( 总 第1 7 6 期 ) _ 】 I 表 2 l I 组打孔法试验结果 单位 ：mm 菌号抑菌圈大小 菌号 抑菌圈大小 菌号抑菌圈大小 菌号 抑菌圈大小 菌号 抑菌圈大小 1 1 6 70 5 8 1 1 1 3 3 0 5 8 2 1 1 6 7 4 - 0 5 8 3 1 1 3 30 5 8 夏鸡大 2 O 0 0 O 0 2 1 3 3 0 5 8 1 2 1 6 7 0 5 8
9、 2 2 1 6 70 5 8 3 2 1 3 3 0 5 8 驴大肠 2 o 0 0 O 0 3 1 3 3 0 5 8 1 3 2 O 0 0 0 0 2 3 1 3 30 5 8 3 3 1 3 3 0 5 8 鸡沙 I 1 3 3 0 5 8 4 1 3 3 0 5 8 1 4 1 6 7 0 5 8 2 4 1 3 3 0 5 8 3 4 1 6 70 5 8 西鸡大 1 3 3 0 5 8 5 1 6 7 0 5 8 1 5 1 6 7 0 5 8 2 5 1 6 7-t- O 5 8 3 5 1 3 30 5 8 永 P大 1 6 7 0 5 8 6 1 6 7 0 5 8 1
10、6 1 3 3 0 5 8 2 6 1 3 30 5 8 3 6 1 6 70 5 8 羊大肠 1 3 3 0 5 8 7 2 0 O0 0 0 1 7 1 6 7 0 5 8 2 7 1 6 70 5 8 3 7 1 3 30 5 8 符 P大 1 3 30 5 8 8 1 3 3 0 5 8 1 8 1 6 7 0 5 8 2 8 1 6 70 5 8 3 8 1 O 0-t - O 5 8 羚牛大 1 6 7 0 5 8 9 1 0 0 0 5 8 1 9 2 O 0 0 0 O 2 9 1 6 70 5 8 3 9 1 6 7 4 - 0 5 8 峡X 鸟 大 1 3 3 0 5 8
11、l 0 1 3 3-4- 0 5 8 2 0 1 6 7 0 5 8 3 0 1 3 30 5 8 4 0 1 6 70 5 8 兰鸡大 1 6 7 0 5 8 注：表中数据为平均值 标准差 表 3 I 组的最小抑菌浓度试验( MI C) 单位 ：g mE 菌号 MI C 菌号 MI C 菌号 MI C 菌号 M I C 菌号 MI C 1 0 2 0 8 0 0 7 2 1 1 0 1 6 7 0 0 7 2 2 1 0 3 3 3 0 1 4 4 3 1 0 3 3 3 0 1 4 4 夏鸡 大0 3 3 3 0 1 4 4 2 0 1 6 70 0 7 2 1 2 0 2 0 800 7
12、 2 2 2 0 1 6 70 0 7 2 3 2 0 3 3 30 1 4 4 谷 P大0 3 3 30 1 4 4 3 0 1 6 7 0 0 7 2 1 3 0 1 6 7 0 0 7 2 2 3 0 4 1 7 0 1 4 4 3 3 0 4 1 7 0 1 4 4 羚牛 大0 4 1 7 0 1 4 4 4 0 2 0 8 0 0 7 2 1 4 0 1 6 7 0 0 7 2 2 4 0 2 5 0 0 0 0 0 3 4 0 3 3 3 0 1 4 4 驴 大 肠 0 4 1 7 0 1 4 4 一 5 0 1 6 70 0 7 2 1 5 0 1 6 70 0 7 2 2 5
13、0 3 3 3 0 1 4 4 3 5 0 3 3 3 0 1 4 4 峡鸡 大0 2 0 8 0 0 7 2 6 0 1 6 7 0 0 7 2 1 6 0 2 0 80 0 7 2 2 6 0 1 6 7 0 0 7 2 3 6 0 3 3 3 0 1 4 J4 羊大肠0 3 3 3 0 1 4 4 7 0 2 0 8 0 0 7 2 1 7 0 4 1 70 1 4 4 2 7 0 1 6 7 0 0 7 2 3 7 0 3 3 3 0 1 4 4 鸡沙 f 1 0 3 3 3 0 1 4 4 写 8 0 1 6 70 0 7 2 1 8 0 1 6 70 0 7 2 2 8 0 2 0
14、 8 0 0 7 2 3 8 0 3 3 3 0 1 4 4 兰鸡大0 4 1 7 0 1 4 4 9 0 1 6 70 0 7 2 1 9 0 3 3 3 0 1 4 4 2 9 0 2 0 8 0 0 7 2 3 9 0 3 3 3 0 1 4 4 西鸡 大0 2 5 0 0 0 0 0 1 0 0 2 0 80 0 7 2 2 0 0 3 3 3 0 1 4 4 3 0 0 2 0 80 0 7 2 4 0 0 3 3 30 1 4 4 永 P大0 3 3 30 1 4 4 注：表中数据为平均值 标准差 组对菌种 的最小抑菌浓 度试验结果见表 4 。结果分 析表 明 ， 组对所有 5 O株菌 中 的 9 株 菌 抑 菌 效 果
