《miR-142-3p对THP-1细胞释放炎症因子的调控作用 (论文)》由会员分享，可在线阅读，更多相关《miR-142-3p对THP-1细胞释放炎症因子的调控作用 (论文)（4页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1 8 0 广东 医学2 0 1 4年 1 月 第 3 5卷第 2期 Gu a n g d o n gMe d i c a l J o u r n a l J a n 2 0 1 4， V o 1 3 5 ，N o 2 m i R一1 4 2 3 p对 T H P一1细胞释放炎症 因子 的 调控作用 张振辉 ，江子欣，杨其霖，陈伟燕，熊旭明 广州医科大学附属第二医院重症医学科( 广州 5 1 0 2 6 0 ) 【 摘要】 目的探讨 m i R一 1 4 2 3 p 对人单核细胞株 T H P 一1 释放炎症因子的调控作用。方法 体外培养 人单核细胞株 T H P一 1 ， ( 1 ) 以不同
2、浓度( 0 5和2 O m L ) 脂多糖( L P S ) 诱导 T H P一1细胞2 4 h ； ( 2 ) 将 m i R一1 4 2 3 p的拟似物( m i m i c ， 1 0 0 n mo l L ) 转染至 T H P一1 细胞 4 8 h ； ( 3 ) 先将 m i R一1 4 2 3 p的抑 制剂( i n h i b i t o r ， 1 0 0 n m o l L ) 转染至 T H P一1 细胞2 4 h ， 再用不同浓度( O 5和 2 0 m L ) L P S 诱导 T H P一1细胞2 4 h 。处理后收集细胞培养液， 用 E L I S A法分别检测T
3、 H P一1细胞培养液中肿瘤坏死因子 一仅 ( T N Fd ) 、 白细胞介素 一 6 ( I L一6 ) 和单核细胞趋 化蛋 白 一1 ( MC P一1 ) 的释放量 。结果( 1 ) 两种 浓度 L P S诱导 T H P一1细胞后 ， T N Fo 、 I L一 6 和 MC P一1的释放 量均增加( P0 0 5) 。两 组 T N F一 、 M C P一1 的释放量差异 亦无统计 学意 义( P 0 0 5 ) 。见表 4 。 3 讨论 脓毒症源于微生 物感染 ， 与机体 过度 的炎 症反应 密切相关 。细菌释放的 L P S 、 巨噬细胞 单核 细胞释放 的一氧 化 氮 、 各
4、种细胞 因子 ( 如 T N F一仪、 I L一6 、 I L一 1 5 、 干扰素、 M C P一1 、 巨噬细胞移动抑制因子) 等单独 或联合作用均能引起脓毒症 的发病 。免疫 细胞活 化 ， 过 度释放炎症 因子进 而启动炎症 级联反应 是脓毒 症发生发展 的重要机 制。在 各种免 疫细胞 中， 单 核细 胞 的作用显著 ， 在炎症早期 ， 单核 细胞 主要分泌 T N F一 、I L一 1 、 I L一 6等促炎 因子 ， 促 进脓毒 症发展 。L P S 被广泛 验证能诱 导单核 细胞释放炎 症 因子 ， 在 早期 主 要诱导 T N F一 、 I L一 6和 MC P一1等 炎症
5、因 子 的释 放 。本研究利用 L P S诱导 T H P一1细胞 ， 结果显 示 ： L P S诱导 2 4 h后 ， T N F 、 I L一6和 MC P一1释放 量增加 明显 ， 且高浓度 ( 2 0 m L ) L P S 诱导较低浓度 ( 0 5 g m L ) 显著 ， 这 与研究 报道相一致 。 本实验通过转 染 m i t l 一1 4 23 p的拟似 物 m i m i c ， 使 T H P一1 细胞过表达 m i R一1 4 23 p ， 4 8 h后检 测细 胞释放 的炎症 因子浓 度 ， 结果 显示 ， 其 T N F一 、 I L一6 和 MC P一1的释放量均较
6、 N C组增加 明显 ( P 0 0 5 ) 。以上结果表明抑制 m i R一1 4 2 3 p表达 对 L P S 诱导的炎症因子释放存在部分抑制作用。S U N 等 通过给予野生小 鼠注射锁核酸修饰 的寡核苷 酸 以 抑制 m i R一1 4 2 3 p表达 ， 降低了 L P S诱导的致死效 应 。 说明抑制 m i R一1 4 23 p表达 亦能减 轻炎 症反 应 。 在本实验中， 抑制 m i R一1 4 2 3 p 表达只对低浓度 L P S 诱导释放的I L一 6有抑制作用， T N F一仅和 MC P一1虽 有下降趋势， 但差异无统计学意义 ， 这可能有以下几方 面的原 因 ：
7、 其 一 ， 从 m i R N A作 用 机 制 上分 析 ， 成 熟 的 m i R N A通过 R N A诱导沉默复合物与靶基因起作用的方 式有两种 ， 当两者完全互 补时 ， m i R N A可 导致靶 m R N A 降解， 完全阻遏基 因的翻译 ； 而两者不完全互补时， m i R N A则与靶 m R N A 3 端非翻译 区结合 ， 部分地阻遏 基因转录后翻译过程 。对哺乳动物而言， 作用形式 以不完全互补多见 ， 故 m i R一1 4 2 3 p可能 与炎症 因子 释放相关的内部因子非翻译 区结合， 部分地阻遏基因 的翻译， 抑制效应有限。其二， L P S涉及的炎症信号
8、通 路广泛， 本实验仅是对 m i R一1 4 2 3 p和与之相关的调 控通道进行干预， 故炎症因子释放的抑制效应有 限。 其三， L P S 诱导细胞 内众多变化的 m i R N A中也存在一 些双 向调控炎 症作 用 的 m i R N A， 如 m i R一1 4 6 a 、 m i R一 1 5 5等。这些具有双向调节作用的 m i R N A既启动了介 导炎症发生的信号通路， 又激活了抑制炎症 因子合成 释放的信号通路 。Z I A D等 在小 鼠腹腔内注射 L P S 作为预处理后再注射肺炎克雷伯菌诱导腹膜炎； 相对于生理盐水 预处 理组 ， 腹 腔渗 出细胞 中的 m i R
9、一 1 4 23 p 、 m i R一1 4 6 、 m i R一2 9 9和 m i R一2 0 0 c表 达 上 升 ， T N F一 、 I L一1 B和 I L一6释放 减少 。表 明 m i R N A 调控作用是主要众多变化 m i R N A 的综合 调控 的结 果 ， 抑制 mi R一1 4 2 3 p表达的抗炎作用在本实验只能部 分体现。 综上所述 ， 本实验结果表明， 过表达单核细胞 内 m i R一1 4 2 3 p具有促进炎症因子释放作用， 此作用类 似于 L P S ； 抑制 m i R一 1 4 2 3 p表达一定程度地减少炎症 因子的释放， 可能具有抑制炎症的作用
10、。因此， m i R一 1 4 2 3 p在调控单核细胞炎症反应 中具有重要作用 ， 具体机制有待进一步研究。 参考文献 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 1 2 1 3 1 4 1 8 3 a n di mm u n i t y ： t in y p l a y e r s i n a b i gfi e l d J I m mu n i t y ， 2 0 0 7， 2 6 ( 2 ) ：1 3 31 3 7 TAGANOV K D，BOL DI N M P，C HANG K J ，e t a 1 NFk a p- p a B d e p e n d e n t i n d u c
11、t i o n o f mi c r o RNA n fiR 一 1 4 6，a n in h i b i to r t a r g e t e d t o s i g n a l i n g p r o t e i n s o f i n n a t e i mm u n e r e s p o n s e s J P r o c N a t l A c a d S c i U S A， 2 0 0 6 ，1 0 3 ( 3 3 ) ：1 2 4 8 1 1 2 4 8 6 J I N G Q， H UA N G S ，Z A R UB I N T， e t a1I n v o l v e
12、m e n t o f mi e r o R N A i n Aur i c h e l e m e n t me d i a t e d mR N A i n s t a b i l i t y J C e l l ， 2 0 0 5，1 2 0 ( 5 ) ： 6 2 36 3 4 RI S OE P K， RYG U， WANG Y Y， e t al C e c a l l i g a t i o n a n d p u n c t u r e s e p s i s i s a s s o c i a t e d wi t h a t t e n u a t e d e x p r
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14、o r t a l i t y J B l o o d ， 2 0 1 1 ，l 1 7 ( 2 3) ： 6 1 7 2 6 1 8 3 ZI AD K ，REBE CC A B，S ARAH GDy s r e gu l a t i o n o f mi R 一1 4 2 3 p， 一1 4 6， 一2 9 9， a n d 一2 0 0c d o wn r e g u l a t e s HMGB1 a n d i n d u c e s mi c r o b i a l t o l e r a n c e i n a n o v e l mo d e l o f c h r o n i
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